盖子环替换及定点突变提高菜豆环氧化物水解酶对邻甲基苯基缩水甘油醚的催化性能

菜豆环氧化物水解酶1和2（PvEH1、PvEH2）能够动力学拆分外消旋邻甲基苯基缩水甘油醚（rac-oMGE），从而保留(R)-oMGE。基于对PvEH1和PvEH2结构的同源模拟和分析，发现二者分子中的盖子环差异较大，故本文选择盖子环作为研究目标。经融合聚合酶链式反应（FPCR），获得了PvEH2的盖子环区域被PvEH1对应区域替换的杂合酶Pv2Pv1。用全细胞酶E. coli/pv2pv1催化rac-oMGE，当(S)-oMGE刚好水解完全时，产物(S)-3-邻甲苯基-1,2-丙二醇（(S)-oTPD）的ee_p由PvEH2的58.3%提高至75.5%。为进一步提高酶的性质，在Pv2Pv1中选取11个氨基酸位点进行丙氨酸(A)突变，获得最优突变子E. coli/pv2pv1^K176A，活性为E. coli/pv2pv1（4.2U/g）的2.1倍，且当S构型的底物刚好完全水解时，(S)-oTPD的ee_p进一步提高为80.3%。分子对接分析发现，盖子环替换和K176位点突变为A，均使(R)-oMGE环氧环中的C_α更易受到酶中D101位点的攻击。利用E. coli/pv2pv1^K176A催化150mmol/L rac-oMGE水解制备(R)-oMGE（ee_s＞99%）和(S)-oTPD（ee_p=80.4%），二者的产率Y_S和Y_P分别为32.7%和60.1%，时空产率STY_S和STY_P为1.6g/(L·h)和3.3g/(L·h)。本实验为改善EH的催化性质提供了一种有效策略。     

甜瓜种子性状及甜瓜籽油中角鲨烯含量研究

采用气相色谱法等对黄色马泡瓜、包瓜等30个甜瓜品种角鲨烯含量进行测定。种子形态特征及相关性分析得知百粒重与面积比和角鲨烯含量均成极显著相关水平,但百粒重与面积比的极显著关系为负相关,即面积比越大,百粒重越小,而角鲨烯含量却随着百粒重的增加有所增加。这30个品种甜瓜籽油中角鲨烯的含量较高(641.7~2 858.3 mg/kg),经主成分分析表明,共有4个主成分对其贡献率较大。在此基础上进行聚类分析可以将其分为4类,其中第一、二类群,面积比和单个重量较小,但角鲨烯含量较高,第三、四类群则长/宽均值较大,角鲨烯含量较高。     

不同瓜类种子性状及其油中角鲨烯含量的分析比较

为探究不同瓜类种子性状与含油量及其油中角鲨烯含量的相关性,以苦瓜、瓜蒌、籽瓜和南瓜等15个品种的瓜类种子为实验材料,对单粒质量、百粒质量、长、宽、干基含油量和油中角鲨烯含量进行测定,并分析其相关性。结果表明：籽瓜种子单粒质量最大、长度最长、宽度最宽,分别为0.255 2 g、0.632 mm和0.383 mm;阿根廷蛇瓜种子百粒质量最大,为24.919 3 g;砍瓜种子的干基含油量和油中角鲨烯含量最高,分别为41.14%和2 525.8 mg/kg;相关性分析发现种子长度越长,宽度越宽有利于单粒质量和百粒质量的增加,油中角鲨烯含量与干基含油量呈显著正相关(p<0.05);西葫芦、青皮绿肉酥、砍瓜、早熟南瓜和南瓜在籽油角鲨烯含量选育中具有一定的参考价值。综上,砍瓜为种子高含油量及其油中高角鲨烯含量的瓜类品种。     

国内儿科人群吸入制剂药物临床试验现状分析

目的：调研国内儿科人群吸入制剂药物临床试验的开展现状,为我国儿科人群吸入制剂药物临床试验的发展提供参考。方法：在中国药物临床试验登记与信息公示平台和Clinical Trials平台检索截至2021年11月20日的中国儿科人群吸入制剂药物临床试验项目,从临床试验的分期、适应证、药物类型等方面分析其特点。结果：截至2021年11月20日,在中国药物临床试验登记与信息公示平台检索到儿科人群吸入制剂药物临床试验项目21项,占所有人群吸入制剂药物临床试验项目8.9%（21/235）,试验药物主要为仿制药（47.6%）,集中在化痰药和抗哮喘的吸入制剂,占试验项目71.4%（15/21）。在Clinical Trials平台检索到34项中国儿科人群吸入制剂临床试验项目,占全球儿科人群吸入制剂临床试验总数5.7%,适应证主要为哮喘和麻醉用药,占试验项目76.5%（26/34）。结论：我国儿科人群吸入制剂药物临床试验起步较晚,总体数量较少,以仿制药为主,需重视吸入制剂新药研发和儿科人群吸入制剂药物临床试验的规范性及顺利进展。     

富磷土壤磷肥用量对烟株养分累积和烤烟产质量的影响

为探明富磷植烟土壤的适宜施磷量,通过大田试验,研究不同施磷量（0、63、94.5、126、157.5和189 kg/hm²）对烟株养分累积和烤烟产质量的影响。结果表明：（1）随施磷量的提高烤烟各部位干物质累积量呈先增加后降低的趋势。（2）与对照相比,施磷量为94.5~189 kg/hm²时均能提高烤烟叶片、地上部和植株氮磷钾养分累积量,且以施磷量157.5 kg/hm²为最高。（3）施磷量为94.5 kg/hm²时烤烟产量、上等烟比例和产值均最高,分别较其他处理增加了4.24%~23.29%、1.93~17.36百分点和3.26%~37.46%。（4）当施磷量为94.5和157.5 kg/hm²时磷素表观利用率较高,且显著高于对照和施磷量63 kg/hm²处理。（5）富磷土壤上过多施用磷肥（157.5和189 kg/hm²）有降低上部烟叶油分和中部烟叶香气量的趋势。因此,对于恩施州富磷土壤,建议磷肥推荐用量为94.5 kg/hm²。     

不同种类有机肥对植烟土壤微生物功能多样性的影响

为探究不同种类有机肥对植烟土壤微生物多样性的影响,通过长期定位试验研究了施用商品有机肥、农家肥（牛粪）和绿肥（光叶紫花苕子）对土壤微生物功能多样性和肥力的影响。结果表明,从烟株团棵期到采收后,微生物碳源利用能力呈现先升高后降低的趋势。与单施化肥相比,商品有机肥和农家肥处理烤烟团棵期的土壤微生物AWCD值分别提高了22.0%和31.0%,Mclntosh多样性指数显著提高了15.2%和18.0%。旺长期商品有机肥处理AWCD值和多样性指数均显著高于其他处理。有机肥处理的土壤活性有机碳和微生物量碳含量相比于单施化肥分别显著提高了19.9%~37.4%和11.9%~21.0%,以农家肥最为显著。有机肥均在一定程度上增加了土壤pH、土壤有机质、碱解氮和速效钾含量,其中以商品有机肥效果较为显著。相关性分析表明,土壤pH、速效钾与微生物功能多样性显著正相关。综合来看,以化肥配施商品有机肥效果最好。     

不同品种甜瓜种子表型性状、含油率及种子油脂肪酸组成分析北大核心CSCD

以50个品种甜瓜种子为试验材料,对其表型性状进行测定,然后用索氏抽提法测定含油率,气相色谱法测定种子油脂肪酸组成,并对种子表型性状、含油率与种子油脂肪酸组成相关性进行分析。结果表明:表型性状最大的甜瓜品种为MW,MW的籽粒表面积、宽、千粒质量均最大;林蜜25号甜瓜品种的种子含油率最高,为32.532%,WQ的种子含油率最低,仅为17.915%;甜瓜种子油中含量最高的脂肪酸为亚油酸,其次是油酸、棕榈酸、硬脂酸,亚麻酸含量最低,亚油酸含量最高的甜瓜品种是常见小绿瓜,为75.011%,油酸含量最高的甜瓜品种是省工108,为31.289%,棕榈酸含量最高的甜瓜品种是WQ,为13.281%,硬脂酸含量最高的甜瓜品种是爽口1,为9.862%;相关性分析表明,含油率与红度呈极显著正相关。3个品种的马泡瓜含油率较高,且皮薄,种子非常多,因而马泡瓜最适宜选育榨油。