人源胰蛋白酶-1与DsbA在E.coli中的融合表达

从供体动物获取的胰蛋白酶可能含有致病微生物的残留,目前急需重组胰蛋白酶的生产。按照密码子使用频率表,对人源胰蛋白酶-1的基因序列进行简并突变,并与质粒pET-39b(+)携带的DsbA融合,实现了胰蛋白酶在大肠杆菌中的表达。重组蛋白主要以包涵体的形式存在,约占菌体总蛋白的40%。包涵体经洗涤、变性、复性和凝血酶激活后,依照市售猪胰蛋白酶的量,每1 L发酵液得到1.6 mg有活性的胰蛋白酶,实现了人源胰蛋白酶在原核生物中的大量表达。     

有机酸对产丙二醇菌生长和生产的影响

为提高克雷伯氏肺炎杆菌厌氧发酵生产1,3-丙二醇的能力,在发酵过程中添加有机酸(OA),考察其对菌体生长、1,3-丙二醇及其他副产物合成的影响。实验表明:添加OA可促进菌体生长,加入质量浓度为0.2~0.5g/L的OA,菌体生长的菌液在590 nm处吸光度(OD)值比参照值高出30%;加入过量的OA(>1.0 g/L),则菌体生长受到抑制,OD值比参照值低37%;添加OA可促进单位细胞合成1,3-丙二醇,加入质量浓度为0.2~0.5g/L的OA,单位菌体的1,3-丙二醇质量浓度比参照高3.8%~17.5%;添加OA能提高甘油转化为1,3-丙二醇的转化速率,加入0.2~0.5 g/L的OA,甘油转化为1,3-丙二醇的最大转化速率达0.81 h-1。在15 L罐上批式发酵48 h,1,3-丙二醇最终质量浓度达42.9 g/L,甘油转化为1,3-丙二醇的平均转化率达64%。     

甘油发酵副产物对菌体代谢能力的影响

基于甘油厌氧发酵生产1,3丙二醇代谢过程中菌体生长、氧化与还原代谢支路相互耦联的特性,考察菌体代谢产生的各种副产物与菌体合成1,3丙二醇能力之间的关系。结果表明,副产物乳酸和1,3丙二醇的生成是负相关的,而乙酸和1,3丙二醇的生成是正相关的,小分子醇的产生对甘油转化率的影响较大。     

液相色谱法分离纯化固相合成的胸腺素α1

本文为以Fmoc(N^α－芴甲氧羰基）固相合成法制备的胸腺素α1粗品提出了一条实验室规模的液色谱法纯化路线，共分两步；第一步采用DEAE Sepharose Fast Flow填料进行了离子交换层析操作，分离除去粗品中的大部分杂质；第二步用制备型反相离效液相色谱（用C18色谱柱）进行最后的纯化。终产物纯度可达95％，生物活性符合实验指标。本文还对分离纯化路线中所用的操作条件进行了研究和优选。     

扶素康的固相化学合成

研究了36肽扶素康的9-芴甲氧羰基(Fmoc)法固相化学合成，包括Fmoc固相逐步化学合成和Fmoc固相片断缩合化学合成。在片段缩合中，研究了多肽片断的分段策略、片断缩合溶剂、片断缩合剂对片断缩合法合成扶素康质量的影响，确立了优化的片段缩合工艺条件为：将扶素康按残基1～10、11～20、21～25、26～36分作4段；以王树脂为固相载体；HATU /HOAt/DIEA为缩合剂(4倍过量)；DMF/DCM(1∶1)为反应溶剂；每步加入的全保护肽段为1.5倍过量；缩合及脱保护完成后以DCM为洗涤溶剂洗涤5次，进行固相片段缩合反应。该条件下合成的扶素康，粗品收率达67.31%，按标准曲线定量分析其纯度达38.75%。     

VIABILITY AND ACTIVITY OF MICROORGANISMS IN SUPERCRITICAL CO_2

INTRODUCTIONIn situremovalofinhibitoryproductsbysupercriticalfluidextraction (SCFE )hasdrawnmuchattentionrecently[1,2 ] SupercriticalCO2 (SCCO2 ) possessesmanyadvantagesoverorganicsolventsduetoitsspecialcharacteristicsandenvironmentalbenefits [1,3— 5] I…     

应用液相色谱法分离纯化固相化学合成胸腺素α1

By using ion-exchange preparative chromatography (IEPC) and reversed-phase high performance liquid preparative chromatography (RP-HPLPC)， thymosin α1 was isolated and purified from the crude product synthesized by the solid-phase peptide synthesis (SPPS) method. The purity of the final product reached 95% through ion-exchange chromatography on DEAE Sepharose Fast Flow chromatography and Delta-Pak^TM C18 purification after optimizing the chromatographic conditions. The capacity of purification process was 50mg/circle. The total yield was 36%. The technology is simple and reliable, and can be scaled up easily.     

多肽液相分段合成及其进展

本文综述了多肽的液相分段合成方法，这些合成方法是近年来多肽和蛋白质合成领域中的一种发展趋势.详细介绍了天然化学连接、化学区域选择连接、施陶丁格连接等方法，并对这些方法进行了比较，指出其优点及不足并提出改进办法.最后对多肽合成技术的发展做了进一步展望.     

低高径比喷射环流反应器结构的研究

在 ７０ Ｌ 低高径比釜式喷射环流反应器中,分别研究了单导流筒单喷咀、单导流筒多喷咀以及多导流筒多喷咀三种结构反应器的气液传质性能,得到了相应平均气含率和体积溶氧传质系数的关联式。研究结果表明多导流筒多喷咀是一种具有传质效率高、能耗低和便于放大的高效生化反应器。此外,还研究了 ８００ Ｌ多导流筒多喷咀结构反应器,得到体积溶氧传质系数关联式,其计算值和实验值吻合较好     

胶体金免疫层析法检测小分子物质

在过去的6年里，胶体金及免疫层析试剂越来越多的被用于快速检测上。这一简单免疫层析试剂给很多不同分析物提供了简便而又快速的方法，它的出现给很多工业带来了冲击。最近，胶体金免疫层析法检测小分子物质的报道日益增多，特别是对兽药和农药的检测。文章主要讲述了用于检测小分子物质的胶体金检测试纸的制备原理、检测原理、应用和进展。