广州地区贝类中人类杯状病毒感染调查研究

从2007年10月~2009年9月,在广州市水产品市场收集127个牡蛎、94个毛蚶、342个花蛤、265个带子,采用荧光定量PCR方法检测人类杯状病毒HuCV的感染,旨在为贝类的安全监控提供基础研究资料。研究结果表明:牡蛎的HuCV阳性检出率最高,为24.41%(31/127);毛蚶和带子样品中HuCV总阳性率分别为11.70%(11/94)和1.89%(5/265);而花蛤中未检出HuCV。牡蛎中存在着人类杯状病毒不同基因型的混合感染。结果还显示贝类中的HuCV感染一般在秋冬季节流行:在2007年10月～2008年2月和2008年10月～2009年2月期间,牡蛎中HuCV总检出率分别为23.08%(12/52)和35.85%(19/53);而在2008、2009年的3月~9月间,牡蛎中均未发现HuCV感染。     

白细胞介素7剪接变异体的克隆和序列分析

目的: 克隆白细胞介素- 7(IL-7) 剪接变异体,筛选出在IL-7开放阅读框内剪接变异体,为其生物活性的研究打基础。方法: 运用自行设计的IL-7引物, 采用逆转录聚合酶链反应(RT- PCR)技术, 分离正常培养的肝癌细胞株 HepG2、结肠癌细胞株HT29 IL-7 mRNA, 再对电泳所获条带进行克隆、测序和分析。结果: 肝癌细胞株 HepG2、结肠癌细胞株 HT29都能检测到IL-7 mRNA, 而且从培养癌细胞株分离出多条新带, 经亚克隆及测序, 证实这些条带是来源人IL-7 基因、但缺乏不同外显子的IL-7剪接变异体cDNA;通过和IL-7 cDNA比对分析,发现其中5个剪接变异体在IL-7开放阅读框内。结论: IL-7剪接变异体广泛存在于各种肿瘤细胞中。对其进一步的研究,将为癌症病人的免疫调节紊乱和临床免疫治疗提供新的研究方向。     

荧光定量PCR与常规PCR法检测GⅡ型札幌样病毒的比较

目的比较荧光定量PCR与常规RT-PCR法检测牡蛎中GⅡ型札幌样病毒的灵敏度与准确性,为该病毒检测提供适用的方法。方法采用荧光定量PCR和RT-PCR方法,分别检测牡蛎样品中的GⅡ型札幌样病毒。结果荧光定量PCR检测的灵敏度可达102拷贝/μl,札幌样病毒呈阳性的牡蛎有6例,阳性率为4.72%(6/127);RT-PCR的灵敏度为103拷贝/μl,札幌样病毒呈阳性的牡蛎有1例,阳性率为0.79%(1/127)。结论与RT-PCR方法比较,荧光定量PCR是更为敏感准确的方法,更适用于牡蛎中GⅡ型札幌样病毒的检测。     

HTPP-MDC原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

通过双酶切、连接、转化等方法将肝靶向穿膜肽-家蝇天蚕素（HTPP-MDC）融合基因克隆至原核表达载体pET32a（＋）上,构建重组表达质粒HTPP-MDC/pET32a。重组质粒转化E.coli BL21（DE3）后,以IPTG诱导,SDS-PAGE分析表明重组融合蛋白得到了可溶性表达,Western blot杂交证实了表达蛋白的抗原活性。为HTPP-MDC的生物学活性研究及产业化开发奠定了基础。     

抗菌肽抗氧化作用机制及其应用前景

抗菌肽作为一种具有抗微生物作用的生物活性肽而成为研究热点已经20 余年,研究发现部分抗菌肽不仅具有抗微生物的特性,更有抗氧化、抗衰老作用,目前认为其抗氧化作用机制包括：清除自由基,抑制脂质过氧化以及螯合金属离子等。本文综述近10 年抗菌肽抗氧化作用机制研究进展,及其在食品、化妆品、保健品方面的应用,并展望其应用前景。     

诃子超微粉的工艺优化及其对黄嘌呤氧化酶活性的影响

目的制备诃子超微粉进行粉体学性质检测,对其制备工艺进行优化。方法:以黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase,XOD)抑制率为评价指标,以球料比、冷冻时间、转速、球磨时间为影响因素进行单因素试验;在此基础上,正交实验试验优化诃子超微粉碎工艺。建立优化后的诃子超微粉的高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)指纹图谱,并与诃子超微粉进行对比。结果: 采用球磨法制备了诃子超微粉,诃子超微粉可显著改善普通粉的粉体学性质,降低药粉粒径;诃子超微粉最优制备条件为：球料比5:1、冷冻时间40 min、转速400 r/min、球磨时间1 h,优化后的超微粉粒径为22.4μm,5 mg/mL黄嘌呤氧化酶抑制率为69.10%。经HPLC分析,优化前后的二种诃子超微粉末指纹图谱主要成分基本一致,超微粉碎工艺未破坏诃子成分。结论:优化后的诃子超微粉抗黄嘌呤氧化酶活性更佳,为诃子超微粉在高尿酸血症中的应用提供了基础。     

蜂蜜对急性酒精中毒大鼠的解酒作用研究

目的:研究蜂蜜对急性酒精中毒SD大鼠的解酒作用及其对酒精代谢关键酶的影响。方法:用75%食用级无水乙醇按10m L/kg一次性灌胃法构建急性酒精中毒大鼠模型,以解酒护肝鼎久口服液为阳性药物对照,采用蜂蜜高、中、低3个浓度进行灌胃干预。以大鼠血清乙醇浓度、肝脏乙醇脱氢酶(Alcohol Dehydrogenase,ADH)和乙醛脱氢酶(Acetaldehyde Dehydrogenase,ALDH)、胃ADH和ALDH为考察指标。结果:与模型组比较,蜂蜜低、中浓度组大鼠血清乙醇浓度均显著降低(P0.05),蜂蜜高浓度组大鼠血清乙醇浓度极显著降低(P0.01),蜂蜜中、高浓度组极显著提高大鼠肝ADH和胃ALDH活性(P0.01),蜂蜜各浓度组可显著提高胃ADH和肝ALDH活性(P0.05或P0.01)。结论:蜂蜜能够通过提高肝脏和胃的ADH和ALDH活性从而显著降低大鼠血清乙醇浓度,具有明显的解酒作用。