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目的:根据ATP核酸适配子与ATP结合的能力强于其互补核酸的原理,构建基于核酸适配子的高灵敏的ATP检测方法。方法:以ATP核酸适配子作为识别分子,对检测的捕获探针固定浓度、杂交时间、ATP反应时间、银染增强时间等进行优化,在优化的反应条件下,对其敏感性、特异性进行评价。结果:在优化的反应条件下,通过对不同浓度的ATP样本进行检测,发现ATP浓度在10-14M至10-9M 范围内时, ATP浓度的对数与灰度值的相对强度呈线性关系,相关系数为0.996。并且,在优化的反应条件下,该方法对ATP的检测具有较高的特异性。结论:所构建的基于核酸适配子的ATP检测方法具有灵敏度高、特异性高的优点,可为其他生物分子的检测提供新的思路。 相似文献
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目的:基于滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)结合免疫反应建立一种蛋白质的高灵敏检测方法。方法:根据双抗体夹心法原理,以链酶亲和素为桥梁,生物素修饰的单链寡核苷酸引物可以高亲和力地链接到生物素标记的免疫复合物上,建立蛋白质的滚环扩增技术检测平台,并将其用于血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth facmr,VEGF)的检测。结果:在优化实验条件下,对VEGF检测的灵敏度达到10fM。结论:与常规的酶标二抗体系ELISA法相比,本方法具有更高的灵敏度,适于低丰度蛋白质的检测,此方法的进一步完善将为疾病新的蛋白标志物的筛选以及临床诊断提供有力的工具。 相似文献
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先用由20个石脑油试样组成的样品集和相关软件建立石脑油的近红外光谱离线数学模型,后用建立的数学模型预测石脑油的族组成、馏程、密度等性能参数,还考察了模型的准确度和精密度.可采用甲苯验证波长的漂移情况,漂移范围应为±1 cm-1.仪器分辨率应为4 cm-1.推荐扫描次数为32次.用建立的数学模型预测某石脑油试样的族组成,20次扫描预测结果显示,数学模型的精密度能满足ASTM D 5443要求.用建立的数学模型预测20个石脑油盲样的族组成并与用PIONA多维色谱仪测得的结果进行对比,结果显示数学模型的准确度可满足ASTM D 5443,1319要求. 相似文献
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