人参皂苷F2干预Caspase级联反应抑制H2O2诱导的细胞凋亡

本研究探讨了人参皂苷F2对H_2O_2诱导人胚肾HEK-293细胞损伤的抗凋亡作用。利用试剂盒测定凋亡细胞Caspase-6和Caspase-9活性水平,应用WesternBlot检测凋亡细胞中Bcl-2凋亡家族(Bcl-2和Bax)与Caspase凋亡家族(CleavedCaspase-3和Cleaved PARP)的蛋白表达量。H_2O_2损伤细胞后,Caspase酶活力提高,促凋亡蛋白表达提高;1.25、5、20μmol/L F2预处理损伤细胞后,Caspase-6和Caspase-9活力呈浓度依赖性降低(p0.05),当F2浓度达到20μmol/L时,Caspase-6活性降低了6.83 U/mg protein,Caspase-9活性降低了5.88U/mgprotein;CleavedCaspase-3和CleavedPARP蛋白表达量显著低于损伤组(p0.05),随着F2浓度的升高,Cleaved Caspase-3表达量分别下降至280.90%、232.46%、185.26%,Cleaved PARP表达量随着F2浓度升高而降低至110.36%、85.85%、61.95%;F2高浓度组的Bcl-2/Bax比值(73.94%)较损伤组比显著提升(p0.05)。表明人参皂苷F2可以抑制凋亡蛋白Caspase的活性,降低Bax促凋亡蛋白与Caspase家族上、中、下游蛋白的表达,通过调控Caspase级联反应抑制H_2O_2刺激引起的细胞凋亡。     

矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对H_2O_2诱导细胞氧化损伤的保护作用

目的:研究矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)对人胚肾HEK-293细胞氧化损伤的保护作用。方法:通过检测细胞活力、活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)水平考察C3G对氧化损伤细胞的影响,并采用Western blot法和q RTPCR检测Nrf2和Keap1的蛋白表达量和m RNA表达量变化。结果表明:C3G预处理氧化应激细胞后,细胞活力显著高于H_2O_2损伤组(p 0.05),并呈浓度依赖性提高; H_2O_2损伤组的DCF荧光强于对照组,ROS相对含量增加到近2倍,1.25、5、20μmol/L C3G预处理后细胞荧光强度逐渐减弱,ROS相对量呈浓度依赖性降低; C3G预处理后细胞MDA水平呈浓度依赖性降低; 1.25、5、20μmol/L C3G处理后,Nrf2的m RNA表达和蛋白表达量均呈浓度依赖性上调,Keap1蛋白表达量显著低于H_2O_2损伤组(p 0.05),5和20μmol/L C3G对Keap1的m RNA下调作用明显。结论:矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对HEK-293细胞有保护作用,可降低细胞ROS和MDA水平,其作用机制可能是通过激活Nrf2/Keap1信号通路以抵抗H_2O_2导致的细胞氧化损伤。     

人参皂苷F2干预NF-κB通路抑制H2O2诱导的细胞凋亡

本研究通过测定人参皂苷F2对凋亡细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放率和线粒体膜电位的影响,运用qRT-PCR和Western blot检测F2对NF-κB凋亡信号通路中p65蛋白的影响。发现H2O2损伤细胞的LDH释放率较对照组的有明显提高42.72%;线粒体膜电位下降,损伤组的相对荧光值较对照组降低44.03%;NF-κB p65的蛋白和mRNA表达量分别为122.73%、1.66,明显高于对照组（p<0.05）。1.25、5、20 μmol/L F2预处理损伤细胞后,LDH释放率较损伤组显著降低（p<0.05）,分别降至82.71%、75.69%、69.61%;线粒体膜电位较损伤组显著提高,不同浓度F2的相对荧光值分别为：60.22%、62.76%、70.96%,（p<0.05）;随着F2浓度的升高,NF-κB通路中p65的蛋白表达分别下降到79.49%、71.92%、58.39%,（p<0.05）,mRNA表达下调至1.30、1.18、1.01,（p<0.05）。结果表明,人参皂苷F2能通过降低凋亡细胞的LDH释放率、升高线粒体膜电位、抑制NF-κB信号通路激活发挥抗凋亡作用,为人参皂苷抗氧化应激诱导的细胞凋亡提供实验依据。