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采用盐析及Q Sepharose FF分离纯化酪蛋白胃蛋白酶水解物中的酪蛋白糖巨肽 总被引:3,自引:0,他引:3
本文探讨了利用了(NH4)2SO4分级沉淀、透析脱盐及Q—Sepharose FF层析分离纯化酩蛋白的胃蛋白酶水解物中的CGMP的工艺。结果表明:采用60%饱和度的(NH4)2SO4盐析,可从上清液中直接回收高纯度CGMP,得率为0.71%。低饱和度的(NH4)2SO4可有效脱除杂蛋白。脱盐粗提物CGMP Q—Sepharose FF层析条件为:pH8.5、20mmol/L Tris缓冲液平衡上样,用含0.3mol/L NaCl、20mmol、pH7.1的Tris缓冲液洗脱:浓缩物最大上样量为34.2mg蛋白/ml树脂。利用优化的工艺对水解液层析纯化,纯化产物得率约为2.19%(以酪蛋白汁),总结合态唾液酸回收率为87.4%(以酶解液中的唾液酸汁),糖基化度可提高到0.472以上。整个工艺路线简使、快捷、成本较低,适合工业化生产。 相似文献
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