氮掺杂多孔碳材料固定化木瓜蛋白酶研究

以碳酸钙微球作为模板剂、多巴胺为包覆剂,制备氮掺杂多孔碳材料,并将其用于木瓜蛋白酶的固定化。优化的固定化条件为p H6.5、酶浓度为4 g/L和固定化温度为50℃,测得酶的固定化量为1614.37 mg/g,酶最大的比活为2.22×10~4 U/g。与游离酶相比,固定化木瓜蛋白酶显示出提高的p H稳定性、热稳定性和储存稳定性。在70℃的温度条件下放置1 h后,固定化木瓜蛋白酶依然保留其初始活性的56.7%,而游离木瓜蛋白酶仅为11.5%。储存10 d后,固定化木瓜蛋白酶仍保留了其初始活性的72.9%,而游离蛋白酶在第10天时只剩余5%的活性。在重复使用5次后,固定化木瓜蛋白酶仍具有较高的酶活力。因此氮掺杂多孔碳材料作为固定化酶载体具有良好的应用前景。     

静电纺丝法制备ZnO构建酪氨酸酶生物传感器检测邻苯二酚

电化学生物传感器在环境监测、生物与食品分析等领域应用广泛。本文采用静电纺丝法制备了氧化锌微纳米纤维材料，并负载酪氨酸酶（Tyr）构建了检测邻苯二酚的生物传感电极。利用X射线粉末衍射（XRD）、扫描电子显微镜（SEM）表征了氧化锌微纳米纤维的形貌结构，采用循环伏安法（CV）和计时电流法（IT）优化了检测邻苯二酚的工作条件。结果表明，制备的Tyr/ZnO/CS/GCE生物传感电极具有良好的电化学性能，在反应过程中为扩散控制，对邻苯二酚的检测在5～50μmol/L的浓度范围内具有较好的线性关系，最低检测限为1.9041μmol/L，灵敏度为376.31μA/(mmol·L·cm²)，氧化锌的加入可增强酪氨酸酶的稳定性，在尿素、多巴胺和葡萄糖3种电化学活性相近物质存在的情况下仍对邻苯二酚的检测有较好的选择性，且具有良好的循环稳定性。     

Hf-ZnO酪氨酸酶生物传感器检测邻苯二酚

以四氯化铪(HfCl4)和硝酸锌为原料，通过水热法制得Hf掺杂氧化锌纳米材料(Hf-ZnO)，并将Hf-ZnO、酪氨酸酶(Tyr)和壳聚糖(CS)修饰在玻碳电极(GCE)上,制得Tyr/Hf-ZnO/CS/GCE生物电极。利用FESEM、DLS、XRD和XPS对Hf-ZnO的结构和性能进行表征。采用循环伏安伏安法(CV)和计时电流法(IT)对Tyr/Hf-ZnO/CS/GCE电极进行电化学测试。结果表明，Tyr/Hf-ZnO/CS/GCE电极在pH 5和-50 mV的低电势下对邻苯二酚有最佳检测能力，对邻苯二酚检测的线性范围是0.5~47 μmol/L，灵敏度为195 μA/(mmol/L)，检测限是0.1215 μmol/L(S/N=3)。此外，该生物电极的稳定性和重复性好，可有效避免尿素、多巴胺、抗坏血酸等与邻苯二酚电活性相近物质的干扰。     

猪肺血管紧张素转化酶纯化工艺中试放大研究

采用DEAE离子交换层析-超滤法纯化猪肺血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE),在小试工艺条件的基础上对DEAE离子交换层析进行中试放大。以ACE比活及酶活回收率为指标,考察工艺放大后的纯化效果,并进一步完善纯化工艺条件。结果表明,DEAE离子交换层析柱放大15倍后,最终得到的ACE比活为(1.05±0.04)U/mg,达到电泳级纯,与小试工艺的纯化结果无明显差异,酶活回收率为34.6%±0.3%,高于小试工艺。由此认为,猪肺ACE提取放大纯化工艺是可行的,且可提高纯化效率,该工艺为更大规模的纯化ACE奠定了基础。     

Hf-ZnO酪氨酸酶生物传感器检测邻苯二酚

以四氯化铪(HfCl_4)和六水合硝酸锌为原料,通过水热法制得Hf掺杂氧化锌纳米材料(Hf-ZnO),并将Hf-ZnO、酪氨酸酶(Tyr)和壳聚糖(CS)修饰在玻碳电极(GCE)上,制得Tyr/Hf-ZnO/CS/GCE生物传感器。利用FESEM、DLS、XRD和XPS对Hf-ZnO的结构和性能进行表征。采用循环伏安法(CV)和计时电流法(IT)对Tyr/Hf-ZnO/CS/GCE电极进行电化学测试。结果表明,Tyr/Hf-ZnO/CS/GCE电极在pH=5和–50 mV的低电势下对邻苯二酚有最佳检测能力,对邻苯二酚检测的线性范围是0.5～47.0μmol/L,灵敏度为195 mA/(mol/L),检测限是0.1215μmol/L (S/N=3)。此外,该生物电极的稳定性和重复性较好,可有效避免尿素、多巴胺、抗坏血酸等与邻苯二酚电化学活性相近物质的干扰。     

城市110kV变电站环境影响分析及治理

针对日渐突出的城市变电站在运行过程中产生电磁波、无线电干扰及噪声对周围居民的影响问题,依据国家及行业技术标准,对银川地区7座典型110 kV变电站的环保监测结果进行分析评价。结果表明:站界噪声超标是变电站对周围环境影响的主要因素,对其进行治理后,效果显著。     

柱前衍生化-HPLC测定罗非鱼中氨基酸的含量

广西是罗非鱼主产大区,对罗非鱼氨基酸测定,对实现罗非鱼的产业高值化有一定重要作用.建立反相高效液相色谱法测定罗非鱼肉中氨基酸含量的方法:采用XDB-C18色谱柱,以邻苯二甲醛(OPA)和9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC)为柱前衍生化试剂,柱温35℃,流动相为醋酸钠缓冲液、甲醇、水及乙腈.18种氨基酸在40min内得到了较好的分离.测定了罗非鱼鱼肉氨基酸的组成和含量,结果表明,罗非鱼鱼肉中含有至少18种氨基酸,其中8种必需氨基酸总含量达到了49.96％,是一种优质的蛋白资源.     

物流教学仿真实验室的实现

针对物流教学的特点,将虚拟仿真技术应用于其中.提出了实验室的系统架构设计,并对物流仓储实训的虚拟实现进行了阐述.虚拟仿真技术引入物流教学是对传统物流教学方法的革新.实践经验表明,虚拟仿真是解决物流教学难题的一种有效途径.     

等温滴定量热法测定酶催化反应的热动力学参数

采用等温滴定量热法（ITC）测定猪肺血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme,ACE）催化水解其体外模拟底物马尿酰-组氨酰-亮氨酸（Hip-His-Leu,HHL）反应的热动力学参数,考察了温度对动力学参数的影响。结果表明,该反应的摩尔水解焓ΔH_hydr为正值,是吸热反应,且随温度升高ΔH_hydr增大,等压比热容c_p为0.2126kJ/（mol·K）;ACE催化HHL的水解反应符合Michaelis-Menten机理,在实验温度范围内（298.15～313.15K）,米氏常数K_m随温度升高而减小,催化常数k_cat随温度的升高先增大后减少,在308.15K时达到最大值2.534s^-1。将该法与传统的初始速率法进行比较,传统法存在的局限性使测得的K_m相对偏大。同时使用ITC结合动力学分析测得ACE抑制剂药物依那普利拉为竞争性抑制剂,抑制常数K_I为12.1 nmol/L,与文献比较证明该法可用于抑制剂类型的判断,是一种开发ACE抑制剂的新方法。应用该方法确定活性多肽Arg-Tyr-Leu-Gly-Tyr（RY-5）为非竞争性抑制剂,抑制常数K_I为1.0 μmol/L。     

长蛇鲻鱼蛋白水解制备抗氧化肽工艺研究

抗氧化肽(具有抗氧化能力的肽)具有抑制自由基生成的作用,可通过酶水解蛋白质获得。以长蛇鲻鱼肉蛋白为原料,利用6种不同的商业化蛋白酶,水解长蛇鲻鱼肉蛋白,以1,2-二苦基-2-三硝基苯亚肼基(DPPH·)、没食子酚超氧自由基(O_2~—·)的清除和Fe~(3+)还原能力活性为指标,探讨不同酶水解时间下,不同蛋白酶的水解产物的抗氧化性能。结果表明,胰蛋白酶酶解产物水解度(DH)为13%时,对1,2-二苦基-2-三硝基苯亚肼基(DPPH·)、没食子酚超氧自由基(O_2~—·)清除和Fe~(3+)还原能力的活性最强,优化得到胰蛋白酶酶解长蛇鲻鱼肉蛋白的最佳酶解条件为:酶用量为8000 U/g、p H为7.0、温度为40℃、底物浓度为25 g/L,达到目标水解度(DH)=13%的水解时间为2 h,对1,2-二苦基-2-三硝基苯亚肼基(DPPH·)、没食子酚超氧自由基(O_2~—·)清除率,分别为91.61%、33.78%,且Fe~(3+)还原能力的活性很强。