克雷伯杆菌O852产反式二氢香芹酮关键酶转化条件及超声提取工艺优化

本研究以Klebsiella sp. O852为研究对象,使用超声提取的方法对其进行细胞破碎,对其转化柠檬烯生成反式二氢香芹酮的关键酶所在位置及转化条件进行了研究。通过单因素实验研究了超声时间、料液比、振幅对细胞破碎的效果的影响。最终设计Box-Behnken中心组合试验确定了最优提取条件。结果表明,该酶是一种胞内酶。最佳培养时间为8 h,此时为细胞生长的对数中期。转化时间为4 h时,在磷酸盐缓冲液中获得的酶活最高。通过单因素及响应面试验,获得提取该酶的最优条件为,超声时间21 min,料液比1:13,振幅36%,在此条件下,得到的酶活为(40.97±2.02) U/g。本研究为进一步研究该酶的纯化及酶学性质的探究提供了参考。