内切壳聚糖酶在食品级壳寡糖酶法生产中的应用

研究1株曲霉JXSD-01发酵液中内切壳聚糖酶(eCSN)的纯化与功能,以寻求一种清洁的生产不含单糖的壳寡糖的方法。经分析,不含外切酶活性的eCSN蛋白酶比活力＞50U/mg,分子质量为25kD,酶的最适温度为63℃,最适pH6.5。经N末端测序,内切壳聚糖酶的N端序列为YNLPNNLKQ。eCSN用于天然大分子壳聚糖的生物降解,可获得分子质量在1000～3500D的寡糖聚合物,其中无单糖污染,达到国际食品级壳寡糖质量标准。     

绿原酸纳米脂质体制备与抑菌性分析

目的：研究绿原酸纳米脂质体制备及其抑菌性。方法：采用薄膜超声法制备绿原酸纳米脂质体,并用扫描电镜和粒度仪分析测定其形貌及粒径,考察膜材比、药脂比及超声时间对包封率的影响,最后对其体外稳定性和抑菌能力进行评价。结果：胆固醇与卵磷脂质量比1∶8、绿原酸与膜材质量比1∶10、超声时间15 min所制备的绿原酸纳米脂质体呈椭圆形,形态规整,粒径在110 nm左右,分散性良好,包封率和载药量最高分别达到87.5%和36%;紫外测试表明绿原酸被成功包覆在脂质体中;体外缓释实验表明,在24 h和14 d中绿原酸纳米脂质体均释放稳定;在抑菌实验中,绿原酸纳米脂质体与绿原酸和四环素相比具有更持久的抑菌能力。结论：采用薄膜超声法制备的绿原酸纳米脂质体具有很好的形貌和分散性能,也具有很好持续抑菌能力。     

壳寡糖功能特性研究进展

壳寡糖是一种2~10个氨基葡萄糖以β-1, 4糖苷键连接组成的碱性天然寡糖，通常由壳聚糖经化学、物理或酶法水解制备。壳寡糖具备多种重要的生物活性，如防治与代谢相关的糖尿病、高血脂症，抗肿瘤，缓解退行性疾病阿尔兹海默病、骨关节炎，提高免疫力等。已有许多研究者对其功能特性进行前期探索，获取大量有效数据，因此壳寡糖具备广阔的开发前景。本文专门对近年来壳寡糖功能特性研究及作用机理进行了论述，并分析了目前壳寡糖研究中存在的问题，以期为后续深入研究提供参考依据。     

新食品原料壳寡糖的酶法生产研究

目的针对高分子原料壳聚糖在食品工业应用中的两大难题——清洁生产与安全食用,研究了内切壳聚糖酶EC.3.2.1.132在新食品原料壳寡糖工业生产中的应用。方法通过广泛筛查,选育产酶活性高、性能稳定、具有单一内切模式的野生菌种。综合应用生物工程技术构建高效表达的基因重组工程菌,经优化发酵条件、建立简易纯化方法,获得了专一性内切壳聚糖酶。采用循环型清洁生产工艺用于新食品原料壳寡糖的工业化生产。结果从产酶量10 U/mL左右的野生型曲霉菌株Jxsd-01获得成熟基因,构建重组毕赤酵母工程菌表达体系,内切壳聚糖酶蛋白产量达到0.95 g/L。采用循环型清洁生产工艺酶法生产的壳寡糖含量高达98%,聚合度n=2~10,原料转化率95%以上,生产过程中无废水、废渣产生。结论内切壳聚糖酶应用于食品工业,实现新食品原料壳寡糖的工业化酶法生产,达到清洁、安全、高效的效果,具有应用推广的价值。