婴幼儿食品源阪崎克罗诺杆菌的3种分型方法

阪崎克罗诺杆菌污染婴幼儿食品可能导致新生儿和婴幼儿脑膜炎、败血症和坏死性小肠结肠炎,对其健康造成严重威胁。采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点序列分型(MLST)和肠杆菌间保守重复序列PCR(ERIC-PCR)对分离于婴幼儿配方乳粉、米粉和辅食中的阪崎克罗诺杆菌进行分子分型,计算3种分型方法的辛普森多样性指数(DI)值,评价3种方法的分型效率,以便精确和快速开展阪崎克罗诺杆菌流行病学研究。PFGE、MLST和ERIC-PCR可分别将37株阪崎克罗诺杆菌分为35个PFGE基因型、28个ERIC-PCR型和23个序列(ST)型,分型结果的DI值分别为99.55%,96.40%和98.05%。3种方法对阪崎克罗诺杆菌均具有较高的分型能力,其中PFEG分型能力最高,分型效率最佳。     

婴幼儿乳粉和米粉中阪崎克罗诺杆菌的耐受性研究

以婴幼儿乳粉和米粉中分离到的15株不同基因型的阪崎克罗诺杆菌为材料,研究其对不同温度、酸碱度和微波的耐受性以及对枯草杆菌二联活菌颗粒(商品名:妈咪爱)和产乳酸菌素乳酸菌的敏感程度。采用平板计数法检测阪崎克罗诺杆菌在不同处理后的存活率,衡量菌株的耐受性;采用皿内抑菌法检测妈咪爱和产乳酸菌素乳酸菌对阪崎杆菌的抑制作用。结果表明:70℃处理20 min后,15株阪崎克罗诺杆菌的存活率均低于0.11%,对阪崎克罗诺杆菌的致死作用明显高于50℃和60℃(P0.01)。阪崎克罗诺杆菌经pH 4.0、pH 6.0和pH 8.0条件处理20 min后,部分菌株被致死,pH 4.0时的存活率明显低于其它2组(P0.01)。微波处理2min后,大部分供试菌株的死亡率超过99%,菌株间存活率无显著性差异(P0.05)。产乳酸菌素乳酸菌和妈咪爱对供试菌株均有一定的抑制作用,部分菌株对其的敏感程度具有极显著差异(P0.01)。结论:阪崎克罗诺杆菌的耐受性和敏感程度存在差异,采用适当的条件处理能有效防止阪崎克罗诺杆菌对婴幼儿食品的污染。     

杨凌及周边地区零售分割鸡肉中沙门菌污染状况及耐药和分型特征研究

目的研究陕西杨凌及周边地区零售分割鸡肉中沙门菌的污染状况及其药敏性、血清型和基于脉冲场凝胶电泳(PFGE)的基因型,为预警食源性沙门菌疾病暴发提供数据基础。方法采用GB 4789.4—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》对陕西杨凌及周边地区采集的188份零售分割鸡肉中沙门菌进行分离和鉴定,并进行血清学分型。采用PFGE方法确定沙门菌DNA酶切电泳图谱,使用BioNumerics软件聚类分析电泳结果,确定沙门菌基因型。结果 188份零售分割鸡肉中共有34份(18.1%)样品检出沙门菌,农贸市场样品沙门菌检出率(24.6%,29/118)高于超市(7.1%,5/70)。鸡腿、鸡爪、鸡脖和鸡肝样品中沙门菌检出率高于鸡肠和鸡胗。34株沙门菌中共检出10种血清型,其中科瓦利斯沙门菌最为流行,高于德尔卑沙门菌和鼠伤寒沙门菌等,差异有统计学意义(P0.05)。分离株均对磺胺异噁唑、氯霉素、头孢噻呋和环丙沙星耐药,对甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、萘啶酮酸、四环素、链霉素、氨苄西林和阿莫西林/克拉维酸的耐药率均在50%以上。34株沙门菌PFGE分型后可被分为11个簇,同一血清型菌株基本聚于同一大簇,同一时间、从相同市场采集的不同样品,其分离株PFGE型相似度均较高,表明分割鸡肉在加工或销售过程可能存在交叉污染。农贸市场分离菌株基因型多样性比较丰富。结论杨凌及周边地区零售分割鸡肉存在沙门菌污染,沙门菌血清型和基因型多样化,耐药菌株比例较高。     

沙门菌传代中(氟)喹诺酮类抗生素筛选株药敏性及相关基因突变和表达

目的研究在不同浓度(氟)喹诺酮类抗生素存在条件下,沙门菌在传代时得到的筛选株中与耐药性相关部分基因的变异和表达水平变化规律及其与耐药性间的关联性。方法使用含有一定浓度(氟)喹诺酮类抗生素的肉汤培养基对沙门菌进行培养,在含有相同浓度同类抗生素的平板上划线筛选突变株,微量肉汤稀释法测定筛选株的药敏性,聚合酶链式反应(PCR)结合DNA测序确定喹诺酮耐药决定区(quinolone resistance-determining region,QRDR)基因突变,实时荧光定量PCR(real-time qPCR)法检测外排泵AcrAB-TolC编码基因表达水平。结果沙门菌(ATCC 14028s)在含有不同代、不同浓度(氟)喹诺酮类抗生素的LB培养基中培养、筛选后,筛选株对抗生素耐受性均有不同程度增加。萘啶酮酸第5～7代筛选株gyrA突变,发生Asp87Tyr变异;环丙沙星第4～7代筛选株gyrA突变,发生Asp87Asn变异;加替沙星、左氧氟沙星和德拉沙星第1～7代筛选株gyrA中均未检出核苷酸突变。随着抗生素浓度增加,各抗生素相应筛选株中外排泵AcrAB-TolC编码基因表达水平较原始菌株增加,差异有统计学意义(P0.05),第7代菌株acrAB-tolC表达量间差异无统计学意义(P0.05)。(氟)喹诺酮类抗生素对不同代筛选株的最小抑菌浓度(MIC)与其对沙门菌(ATCC 14028s)的MIC值比值、gyrA突变、acrAB-tolC表达水平与抗生素作用浓度和筛选代数间呈正相关。结论在(氟)喹诺酮类抗生素作用下,沙门菌可通过QRDR基因突变及增加acrAB-tolC表达适应抗生素胁迫环境;新一代(氟)喹诺酮类抗生素作用于沙门菌时,菌株QRDR靶位点突变概率降低;多次重复作用后,菌株acrAB-tolC表达量虽然增加,但表达量间差异无统计学意义(P0.05),避免了因突变导致耐药性的进一步增强。     

小檗碱和绿原酸对质粒介导的耐药基因接合转移的影响

目的 研究小檗碱和绿原酸对质粒介导的耐药基因接合转移的影响及其可能的机制。方法 采用微量稀释法测定小檗碱和绿原酸对供试菌株的最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentrations,MICs）,使用临床实验室标准化委员会（Clinical and Laboratory Standards Institution,CLSI）发布的微量肉汤稀释法测定抗生素的MICs,膜接合法测定耐药基因转移水平,S1核酸酶脉冲场凝胶电泳（S1 nuclease pulsed-field gel electrophoresis,S1-PFGE）确定质粒谱,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR）检测接合转移相关基因的表达水平。结果 小檗碱对供试的6株多重耐药沙门氏菌和1株大肠杆菌的MICs均为1.25 mg/mL,绿原酸对其的MICs均为6.25 mg/mL,小檗碱的抑菌效果强于绿原酸。小檗碱和绿原酸分别连续诱导供试菌后,16种抗生素对原始株和诱导株的MICs变化程度不同,对 庆大霉素和四环素的抗性先增大再减小。小檗碱和绿原酸诱导所得的第2、4、6代子代菌株作为供体,与受体菌大肠杆菌EC600接合时,与原供试菌株相比,绿原酸诱导株的接合频率先增大再减小,小檗碱诱导株的接合频率主要是先减小再略有增大。小檗碱和绿原酸诱导未对原供试菌株携带的质粒产生影响,诱导显著调控了traX和pilL等15个接合转移相关基因的表达水平（P<0.05）,与接合频率的变化趋势基本一致。结论 小檗碱和绿原酸对质粒介导的耐药基因接合转移有一定的抑制作用,具有作为耐药基因接合转移抑制剂的潜力。     

项目管理在土木工程建筑施工中的应用研究

在土木工程建筑施工的过程中,无论是施工质量还是施工进度都与项目管理有着十分密切的联系。土木工程建筑施工通常具有较大的工程量和一定的复杂性,会涉及到多个领域的专业知识,所以需要具备科学的项目管理方式,才能够确保土木工程建筑施工质量达到预期的标准。根据不同建筑项目的特点,需要对所具备的资源进行优化整合,实现对工程的科学管理。通过项目管理,不但能够提升土木工程建筑的施工效率,同时也能够为建筑施工质量提供重要的保障,这对我国建筑行业的发展是非常有帮助的。本文首先对于项目管理的概念进行阐述,同时对于土木工程建筑施工中项目管理的重要性进行分析,从而对于土木工程建筑施工中的问题进行分析,最后对于项目管理在土木工程建筑施工中的应用进行研究。希望通过本文,能够为项目管理在土木工程建筑施工中的应用提供一些参考和帮助。     

MC尼龙在砼搅拌机上的应用

MC尼龙(铸型尼龙)是应用乙内酰胺催化聚合新技术发展起来的新型工程材料。由于制作简便,成本低,不需要复杂模具和昂贵的成型设备,能制作大型工件,切削性能良好,而且耐磨,抗冲击,耐疲劳,吸震消音,耐油耐水,化学性能稳定,机械强度比一般工程塑料高,已在冶金、国防、地质、矿山、食品、纺织、化工、造纸、印刷、造船、汽车、机车、医疗器械等各轻重工业部门得到广泛应用。 MC尼龙应用于建筑机械在我国近几年刚刚开始,经试验证明MC尼龙应用于建筑机械有下列主要优点:1.降低噪音,提高机     

商品灭菌乳中常见抗生素抗性基因的筛查与定性分析

探究了市售常见商品灭菌乳中四环素类、氨基糖苷类、β-内酰胺类等抗生素抗性基因(Antibiotic resistance genes,ARGs)的分布与带染特征。以12种市售常见商品灭菌乳为研究对象,用CTAB法提取预处理后样品中的总DNA;超微量分光光度计测量DNA纯度与浓度;PCR扩增ARGs;PCR产物测序后提交GenBank进行序列比对,分析ARGs的种类;使用SPSS软件对ARGs检出率、样品品牌、包装类型、产品类型等进行相关性分析。结果显示,灭菌乳中可同时检出多种ARGs,检出率较高的基因分别为str B(93.75%)、aad B (92.71%)、sul1(85.42%)、bla_TEM82.29%)和tet C(58.33%),未在35种ARGs中检出bla_VEB、bla_PER、bla_DHA、bla_CMY2和bla_GIM。商品灭菌乳的品牌、包装、产地和保质期与aad A、aad B、str A、str B等抗性基因检出率显著相关。市售商品灭...     

鸡肉源沙门氏菌血清型、药敏性及部分耐药基因研究

目的:研究432株分离于陕西省杨凌及周边城市零售鸡肉中沙门氏菌的血清型分布、药敏性及其与(氟)喹诺酮类抗菌药物抗性相关耐药基因的流行状况。方法:按照玻片凝集法鉴定血清型,使用临床和实验室标准协会推荐的琼脂稀释法测定沙门氏菌的药敏性,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法确定沙门氏菌中与(氟)喹诺酮类抗生素耐药相关基因。结果:432株沙门氏菌中除36株血清型未定外,其余396株沙门氏菌共涵盖37个血清型,其中鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium,检出率17.93%)、汤普森沙门氏菌(Salmonella thompsons,检出率12.88%)、埃森沙门氏菌(Salmonella essen,检出率8.84%)和婴儿沙门氏菌(Salmonellainfants,检出率6.57%)等血清型比较常见。沙门氏菌对磺胺异噁唑(耐药率89.81%)耐药最为普遍,对磺胺甲噁唑、萘啶酮酸、四环素、氨苄西林、氯霉素和阿莫西林-克拉维酸等抗生素的耐药率均在50%以上。aac(6’)-Ib-cr基因检出率(16.67%)最高,qnr B、qnr S和qnr A的检出率分别为10.19%、6.71%和1.62%,且该4种基因在不同血清型菌株中分布不同。菌株携带qnr和aac(6’)-Ib-cr基因越多,对(氟)喹诺酮类和氨基糖苷类协同耐药性越强。结论:陕西省杨凌及周边城市零售鸡肉源沙门氏菌的血清型种类繁多,耐药比较普遍。     

曳引机制动器式电梯轿厢意外移动保护装置制动性能模拟试验方法

指出当前传统的曳引机制动器式电梯轿厢意外移动保护装置制动性能试验方法存在风险较高、测试精度低等问题，提出了一种新的模拟电梯整梯系统转动惯量试验方法，为此研发了一种水平作业空间模拟试验装置。该装置由被测试驱动主机、拖动系统、控制系统3个部分组成，可以高效、无级调整地测试曳引机制动器制动性能。通过对比试验，验证了新的模拟试验方法的准确性。