杏仁种皮黑色素对果蝇的紫外辐射保护作用

以果蝇西农12和果蝇中农e为实验模型,对果蝇进行紫外辐射处理后,在添加杏仁种皮黑色素的培养基中进行培养,通过测定果蝇繁殖力、寿命、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量、蛋白质量浓度、总抗氧化能力(T-AOC)等指标来研究杏仁种皮黑色素的抗紫外辐射活性。结果表明:紫外辐射组与对照组相比,两品系果蝇的繁殖力、寿命、总抗氧化能力显著降低,蛋白质量浓度、超氧化物歧化酶活力呈现先增后降趋势,丙二醛含量显著升高。当添加杏仁种皮黑色素质量浓度范围为0.02～0.2mg/mL时,与2min UV组相比,能显著提高两品系果蝇的繁殖力,但所设添加黑色素的实验组中相间组的果蝇繁殖力没有达到显著水平;与5min UV组相比,添加黑色素能显著提高两品系果蝇的寿命、蛋白质量浓度、总抗氧化能力、SOD活力,降低MDA含量。杏仁种皮黑色素对果蝇具有抗紫外辐射保护作用。     

响应面试验优化超声波辅助提取山杏种皮黑色素工艺及其抗氧化活性

以山杏种皮黑色素得率为考察指标,在单因素试验的基础上采用Box-Behnken方法,通过响应面设计优化超声波辅助提取山杏种皮黑色素的工艺,并对山杏种皮黑色素的自由基清除能力、螯合金属离子能力、抗脂质过氧化等抗氧化活性进行了测定。结果表明,提取温度、料液比、NaOH浓度这3 个因素对提取效果均有显著影响（P＜0.05）,超声波辅助提取山杏种皮黑色素的最优工艺为NaOH浓度0.33 mol/L、料液比1∶10（g/mL）、提取温度63.07 ℃,山杏种皮黑色素得率可达4.14%。山杏种皮黑色素具有较强的螯合金属离子的能力,对羟自由基也有一定的清除作用,能显著抑制大鼠肝脏自发性以及H2O2和Fe2＋-VC诱导的脂质过氧化反应,但铁还原能力、体外清除1,1-二苯基-2-苦肼基（DPPH）自由基和2,2’-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐自由基（ABTS＋·）的能力较弱。     

酶法辅助提取山杏种皮黑色素工艺优化及其稳定性

以山杏种皮为原料,以黑色素得率为指标,对碱性蛋白酶、纤维素酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶4 种酶辅助提取山杏种皮黑色素的效果进行比较分析,筛选出酶解效果较好的胃蛋白酶。再通过单因素试验和正交试验,优化胃蛋白酶辅助提取山杏种皮黑色素的最佳工艺,最后对山杏种皮黑色素的稳定性进行系统的分析。结果表明,在酶解温度32 ℃、酶解pH 2.0、加酶量90 000 U/g、酶解时间5 h的条件下进行胃蛋白酶辅助提取的效果较好,黑色素得率达到7.4%。山杏种皮黑色素在碱性介质中稳定,金属离子Cu2＋、Fe2＋和Fe3＋对其稳定性有影响,而氧化剂、还原剂、蔗糖和柠檬酸对其稳定性无影响。     

杏仁种皮黑色素抑制晚期糖基化末端产物(AGEs)的研究

建立牛血清蛋白-葡萄糖(BSA-Glucose)、牛血清蛋白-果糖(BSA-Fructose)和牛血清蛋白-丙酮醛(BSA-Methylglyoxal)的美拉德模拟反应体系,在体系中添加不同浓度的杏仁种皮黑色素,氨基胍(AG)作为阳性对照,37℃下反应,以荧光强度(Ex=370 nm,Em=440 nm)表示晚期糖基化末端产物(AGEs)含量,分析BSA-Glucose体系中蛋白质巯基、羰基含量变化,通过反相高效液相色谱/二极管阵列法(RP-HPLC-DAD)分析杏仁种皮黑色素对丙酮醛(Methylglyoxal,MGO)的清除效果。结果表明,杏仁种皮黑色素对BSAGlucose、BSA-Fructose、BSA-Methylglyoxal体系中AGEs的形成均有显著的抑制作用(P<0.05),抑制率最高分别达到73.81%、42.22%、38.57%。杏仁种皮黑色素能显著升高BSA-Glucose中蛋白质巯基含量(P<0.05),对MGO也具有清除作用,清除率随着时间的延长而升高,当反应24 h时,清除率达到最高,为63.54%。