肉制品中狗、狐、貂源性成分DNA检测试剂盒的制备

为快速检测肉制品中狗、狐、貂3 种常见犬型总科动物源性DNA成分,应用分子生物学技术分析种属基因组序列差异,建立并优化多重聚合酶链式反应检测体系,开发快速检测试剂盒。结果表明：快速检测试剂盒特异性良好,与常见肉类动物（猪、牛、羊、马、驴、鸡、鸭）源性DNA成分皆无交叉反应;灵敏度高,3 种靶标样品DNA质量浓度同时降至10－4 ng/μL,仍可准确检测;阳性条带经切胶回收、克隆转化、测序比对,与GenBank已登记的狗（MH105046.1）、狐（LT560065.1）、貂物种（KU145464.1）相似性为100%;对30 份模拟混合肉样进行鉴别检测,检测结果与预设混合情况完全相符;50 份市售样品中,狗肉样品中3 份出现掺假现象。     

基于Zigbee的无线热网监控系统研究

Zigbee是一种低成本、低能耗、全双工的无线通信协议。介绍了基于Z igbee的无线热网远程监控系统的研究背景、总体结构设计,阐述了Zigbee无线控制器实现的功能和软硬件结构以及上位机实现的功能。对目前热网监测系统中存在的问题提出了一种可行的解决方案。     

狗源性DNA检测试剂盒的研制与评价

本研究旨在研制一种快速鉴定肉制品中狗源性成份的DNA检测试剂盒,并对此试剂盒做出方法学评价。以改良SDS-PK法提取狗肉及掺假肉品种(狐肉、貂肉)基因组DNA,选择具有种属特异性的线粒体细胞色素B基因作为鉴定靶基因,应用Primer5.0设计特异性引物,建立狗源性DNA检测方法,组装狗源性DNA检测试剂盒,并进行特异性、稳定性及重复性评价。结果表明,本试剂盒可有效检测肉制品中狗、狐、貂源性成分,DNA提取效率高,仅0.05 g肉样即可提取浓度高于100 ng/μL的基因组DNA,OD_260/280处于1.80~2.00之间,最低检测限为10-4 ng/μL,所有检测步骤可在4.5 h内完成,操作简便,特异性高。试剂盒所采用试剂安全无毒,反复冻融20次后仍然有效,可于-20 ℃保存一年。随机抽取12份市售样品进行检测,有3份样本中存在狐、貂肉冒充狗肉现象,掺假率高达25%,该结果与长春食品药品检验中心检测结果一致。狗源性DNA检测试剂盒灵敏性高、特异性强,检测结果准确稳定,具有良好重复性,适用于狗肉快速定性检测。     

核糖核酸还原酶基因对虫草素的转录调控作用

检测和分析核糖核酸还原酶大亚基（RNR-LC）基因、小亚基（RNR-M2）基因在不同蛹虫草菌株中mRNA的相对表达量与虫草素含量的变化关系，探究核糖核酸还原酶在虫草素合成途径中的转录调控作用。检测不同蛹虫草菌株虫草素含量，采用荧光PCR技术对蛹虫草RNR-LC基因、RNR-M2基因表达的mRNA进行定量分析，并应用双内参基因对试验数据进行校正。以虫草素含量最低的野生蛹虫草组为对照，米基虫草组RNR-LC、RNR-M2基因的mRNA表达量分别是野生蛹虫草组的1.28倍和1.47倍，蚕蛹虫草组分别是其2.35倍和3.84倍。与对照组相比，RNR-M2 mRNA表达随虫草素的增加总体呈现升高的变化规律。两种基因在不同蛹虫草菌株中的相对表达量存在显著性差异（p<0.05）。RNR-M2基因在高虫草素菌株中存在明显的表达优势，而RNR-LC基因表达量与虫草素含量无明显变化关系，二者不存在协同调控作用。推测RNR-M2基因在虫草素合成途径中起着重要的正向调控作用。     

基于Cyt-B基因鉴定肉制品中鸭源性成分的研究

基于Cyt-B基因设计特异性引物,建立高效快速检测肉制品中鸭源性成分的方法。选取Cyt-B基因作为检测靶标,应用生物信息学技术设计各物种特异性引物,建立聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系检测肉制品中鸭源性成分,并将鸭特异性基因片段进行克隆和测序分析。该检测体系可以对鸭肉含量为1pg的肉制品实现稳定检测,灵敏度髙,特异性好。测序分析结果显示克隆的特异性基因序列与Genbank中相同物种(序列ID:EU755253.1)的核苷酸同源性达100%。该文建立的基于Cyt-B基因的PCR检测方法,可实现对肉制品中鸭源性成分高效快速的检测,既为肉类产品DNA鉴定试剂盒的研发提供试验基础,也有望对肉制品的市场监管和相关执法提供有力的技术保障。