双水相体系萃取粗状假丝酵母脂肪酶的研究

通过比较不同无机盐与PEG组成双水相体系对粗状假丝酵母脂肪酶的萃取效果,系统地研究了脂肪酶在PEG/(NH_4)_2SO_4双水相体系中的分配行为,考察了PEG:分子量、PEG浓度、(NH_4)_2SO_4浓度和体系pH对脂肪酶分配系数和萃取率的影响,并通过响应面分析法进一步优化了萃取条件.结果表明最佳萃取条件为:PEG2000浓度18.3%,(NH_4)_2SO_4浓度17.4%,pH8.0,室温条件下其分配系数可达到13.3,纯化倍数达到1.53,萃取率达到92.2%.     

超高效液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿配方奶粉中的高氯酸盐和氯酸盐残留

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法快速测定婴幼儿配方奶粉中高氯酸盐和氯酸盐残留量的分析方法。方法 样品经乙腈提取后, 再经乙腈饱和的正己烷净化, Acclaim TRINITYP1复合色谱柱(50 mm× 2.1 mm, 3 μm)进行分离。高氯酸盐和氯酸盐在优化后的色谱及质谱条件下, 采用负离子模式进行电离, 通过多反应监测(multiple reaction monitoring, MRM)模式对目标化合物进行测定, 使用内标法定量。结果 高氯酸盐和氯酸盐在各自线性范围内线性关系良好, 所得校准曲线线性相关系数均在0.999以上, 且精密度实验结果良好, 加标回收率在87.9%~109.5%之间。结论 本方法可以应用于婴幼儿配方奶粉中高氯酸盐和氯酸盐残留量的快速测定, 结果准确、可靠。     

假丝酵母脂肪酶催化底物水解的初步研究

通过与一种不同来源的脂肪酶作比较,研究了粗状假丝酵母诱变株z6产脂肪酶水解不同底物的相对酶活,包括对低级酯、脂肪酸甘油酯和天然油脂的水解.并对粗耿假丝酵母Z6产脂肪酶催化水解玉米油和大豆油反应中的pH值、温度、时间、油/水比、乳化剂用量和Ca2 浓度等因素进行了研究,得出pH值为7.5,温度为45℃,水解反应时间为21 h,油水比为1/10,乳化剂相对于油的浓度为4%,Ca2 浓度为75 mmol/L时,玉米油和大豆油都有较好的水解率.通过对该酶反应动力学进行研究得出其水解反应的米氏常数Km为12.25×10-3mol/L,最大反应速率Vmax为11.14μmol/min.     

粗状假丝酵母脂肪酶的分离纯化及水解乳脂的初步研究

从粗状假丝酵母诱变株发酵液中,经双水相萃取、丙酮沉淀、DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析和Phenyl-Sepharose FF疏水层析,得到电泳纯的脂肪酶,纯化倍数为20.81,活力回收率为19.8%,亚基相对分子质量约为56.6ku。研究了粗状假丝酵母脂肪酶水解天然乳脂的工艺条件,得出其水解乳脂适宜温度为45℃,缓冲体系pH值为8.0,反应21h,乳脂水解率达到最佳,并通过GC-MS分析鉴定了水解产物中主要的致香成分。