生物转化法应用重组谷氨酰转肽酶合成L-茶氨酸

构建了一个高效表达大肠杆菌来源的GGT重组质粒pET28a-GGT并转化E.coli BL21 (DE3),工程菌株经0.2mmol/L IPTG,20℃诱导表达8h,粗酶液的酶活达到1.5U/mL,大约是出发菌株E.coli K-12的26倍.工程菌粗酶液以267mmol/L L-谷氨酰胺和2.0mol/L乙胺作底物,37℃、pH10.0条件下反应4h,L-茶氨酸的生成量达到26.9g/L,L-谷氨酰胺的转化率为57.8%.     

国产717阴离子树脂对酶法合成 L-谷氨酰胺的分离与纯化

目的:从酶法反应液中分离和纯化谷氨酰胺,并为工业化生产谷氨酰胺提供一定的依据;方法:根据谷氨酸和谷氨酰胺电离常数的差异,采用国产717强碱性阴离子Cl-型拄,经预处理.离交分离,浓缩结晶,75%乙醇洗涤并干燥;结果:反应液中谷氨酰胺总提取收率为60.3%,纯度为97%;结论:此方法能有效地降低纯化的成本,并维持较高得率和纯率.