发酵麦麸阿魏酰低聚糖的纯化工艺及其心脏保护作用研究

以发酵麦麸阿魏酰低聚糖( Feruloylated oligosaccharides, FOs)粗提液为原料,研究Amberlite XAD-2 大孔吸附树脂结合Sephadex LH-20 葡聚糖凝胶对发酵麦麸FOs的纯化工艺和效果,同时考察分离纯化后发酵麦麸 FOs对斑马鱼心脏损伤的保护作用。结果表明：Amberlite XAD-2 大孔吸附树脂分离发酵麦麸FOs的最佳吸附条件为：上样液浓度4.0 mg /mL,上样液pH 4.0,上样体积40 mL,在此条件下吸附率可达83.76%;最佳的解吸条件为：乙醇浓度50%、洗脱体积15 mL,在此条件下解吸率可达94.80%。Sephadex LH-20 葡聚糖凝胶进一步纯化发酵麦麸FOs的最佳条件为：洗脱剂乙醇浓度25%,上样量1.25 mL,洗脱流速 0.3 mL/min,在此条件下,分离出的组分最多;紫外光谱分析表明纯化发酵麦麸 FOs中有阿魏酸的存在;纯化后发酵麦麸 FOs含量由粗提液的（1107.796 ± 52.18）nmol/g提高到（2217.38 ± 25.36 ）nmol/g,提高了2倍,纯化效果较佳;此外,经分离纯化后发酵麦麸FOs能有效缓解特非那定诱导的斑马鱼心率和降低斑马鱼心脏SV-BA间距,表明分离纯化后发酵麦麸 FOs具有良好的心脏保护作用。     

麦麸阿魏酸糖酯微生物发酵工艺优化及体外抗氧化和益生活性评价

以麦麸为原料,对固态发酵制备麦麸阿魏酸糖酯（Feruloylated glycosides,FGs）的工艺进行优化,并对其体外抗氧化及益生活性进行评价。以植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酿酒酵母为发酵菌种,采取单菌发酵和混菌发酵筛选最优菌种组合,考察接种量、发酵温度、发酵时间、料水比对麦麸FGs产量的影响,通过响应面试验设计优化发酵工艺。结果表明:以枯草芽孢杆菌:地衣芽孢杆菌:酿酒酵母=1:1:1发酵麦麸时,FGs产量最高;最佳固态发酵工艺条件为发酵温度42.5℃,发酵时间58.5 h,接种量10.7%,料水比1:1.16（g/mL）,在此条件下FGs产量为1273.18 nmol/g;抗氧化实验结果表明,DPPH自由基清除率高达87.42%（1 mg/mL）,羟基自由基清除率为33.68%（4 mg/mL）,还原力为1.078（4 mg/mL）。发酵麦麸FGs可有效促进嗜热链球菌和植物乳杆菌的增殖。综上所述,以枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和酿酒酵母混菌发酵制备的麦麸FGs有一定的抗氧化和益生活性。     

发酵麸皮水提物体内外抗氧化及心脏保护活性研究

为评价发酵麸皮水提物（fermented wheat bran water extract, FWBE）的生物活性,通过测定FWBE的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH）自由基和羟基自由基（·OH）清除率、还原力,评估其体外抗氧化活性。通过以2,2-偶氮二（2-甲基丙基咪）二盐酸盐（2,2'-azobis-2-methyl-propanimidamide, dihydrochloride, AAPH）诱导建立的斑马鱼体内氧化应激模型,测定其活性氧（reactive oxygen species, ROS）产生率、细胞死亡率及脂质过氧化程度,评价FWBE对斑马鱼体内抗氧化的作用。另以特非那定诱导建立斑马鱼心脏损伤模型,测定不同浓度的FWBE预暴露对特非那定诱导的斑马鱼静脉窦-动脉球间距（SV-BA间距）和心率的影响。体外抗氧化结果表明:FWBE溶液在浓度为4 mg/mL时对DPPH自由基和·OH清除作用可达79.40%及53.99%,还原力为1.11。体内抗氧化结果表明在最优浓度下可以缓解由AAPH诱导的ROS生成率、细胞死亡率和脂质过氧化程度（P<0.05）。FWBE预暴露后可显著缓解特非那定诱导引起的斑马鱼心率降低、SV-BA间距上升（P<0.05）,且随着FWBE浓度的升高其缓解作用逐渐增强。综上,FWBE具有较强的体内外抗氧化活性,且具有缓解心脏损伤的作用。