健康成人粪便中双歧杆菌的分离鉴定及其发酵乳体内特性研究

为筛选具有潜在益生功能的双歧杆菌,采用MRS培养基,结合菌落形态观察和16S rDNA基因序列同源性分析,从上海地区健康的成人粪便中分离鉴定双歧杆菌,通过7 L发酵罐发酵试验筛选优良菌株,并利用其制备发酵乳,对发酵乳的体内特性进行研究。结果表明,分离并鉴定到3株长双歧杆菌（Bifidobacterium longum）（编号为P-1、P-2和P-3）,其中菌株P-2制备的发酵乳在稳定期活菌数最高,遗传稳定性好,被确定为优良菌株,并被命名为DD98。菌株DD98制备的发酵乳能显著增加小鼠胃肠道内有益菌、减少有害菌的表达（P＜0.05）,具有调节肠道菌群的作用。此外,能维持小鼠正常的体质量、血常规指数,有利于小鼠脏器的生长。     

富硒长双歧杆菌DD98菌株的黏附特性及黏附机制初步研究

利用Caco-2细胞作为体外黏附模型,通过细菌黏附率评价一株新的长双歧杆菌菌株DD98(Bifidobacterium longum DD98,DD98)富硒前后的黏附能力,测定细菌自动聚集能力与表面疏水性,采用荧光定量PCR技术检测细菌表面Tuf蛋白mRNA表达量差异。结果表明,与DD98相比,富硒DD98(Selenium-enriched Bifidobacterium longum DD98,Se-DD98)黏附于Caco-2细胞的数量从(39.12±17.57)CFU/100 cells上升到(581.17±62.79) CFU/100 cells,Se-DD98对Caco-2细胞的黏附能力极显著升高(p0.01)。相比DD98,Se-DD98自动聚集能力略有上升,且其表面疏水性从5.12%±0.16%上升到20.25%±2.14%,极显著性升高(p0.01);荧光定量PCR结果表明,与Caco-2细胞共孵育2 h后,Se-DD98菌体表面Tuf黏附蛋白表达显著上调(p0.05)。表明DD98经富硒培养后,黏附能力显著提升,其黏附能力的增强可能与细菌表面Tuf黏附蛋白的改变有关。     

富硒长双歧杆菌DD98菌株对伊立替康所致小鼠腹泻及肠道菌群的影响

本研究建立伊立替康所致腹泻小鼠模型,通过长期灌胃富硒DD98(Selenium-enriched Bifidobacterium longum Se-DD98)菌株(一株新的长双歧杆菌菌株),评价其对伊立替康所致腹泻及肠道菌群的影响。正常对照组和伊立替康组小鼠每天灌胃无菌蒸馏水,实验组小鼠每天灌胃低剂量(活菌数1×108 CFU/kg)、高剂量(活菌数1×109 CFU/kg)Se-DD98菌液,除正常对照组外其他各组在第17 d腹腔注射伊立替康,实验周期为24 d。测定小鼠体重,小鼠腹泻等级,免疫指标,肠道菌群以及回肠组织结构。结果表明:与伊立替康组比较,Se-DD98低、高剂量组小鼠体重显著增加(P<0.05);腹泻等级显著降低(P<0.05);高剂量组白细胞数目显著增加(P<0.05),低、高剂量组脾脏指数和中性粒细胞数目均显著增加(P<0.05),说明Se-DD98具有调节免疫功能的作用。同时,低、高剂量组大肠杆菌、梭菌和拟杆菌含量均比正常组和伊立替康组显著减少(P<0.05),而双歧杆菌含量显著增加(P<0.01)。此外Se-DD98低、高剂量均能减轻伊立替康导致的肠道粘膜、细胞和腺体损伤。上述结果表明Se-DD98可能通过调节肠道菌群和保护肠道粘膜发挥缓解伊立替康导致的腹泻的作用。提示Se-DD98在辅助治疗伊立替康所致的腹泻等方面具有潜在应用前景。     

长双歧杆菌DD98对2型糖尿病及肥胖小鼠的改善作用

研究长双歧杆菌DD98对高脂诱导的2型糖尿病及肥胖小鼠症状的缓解作用。糖尿病实验:采用C57BL/6N小鼠,将其随机分为正常对照组给予普通饲料;模型对照组,长双歧杆菌DD98干预组,空白培养基干预组给予高脂饲料,每组6只。4周后,链脲佐菌素(STZ)注射建模,给予受试物3周,实验结束后进行口服糖耐量实验和指标检测。与糖尿病模型组和空白培养基干预组相比,DD98干预组小鼠空腹血糖值(18.66±1.84 mmol/L)显著降低,并且DD98干预组小鼠葡萄糖耐量、血清和肝脏脂质水平(TG、TC、LDL-C)均得到显著改善。肥胖实验:采用C57BL/6N小鼠,将其随机分为正常对照组给予普通饲料;模型对照组,长双歧杆菌DD98干预组,空白培养基干预组给予高脂饲料,每组6只。同时给予受试物5周,进行指标检测。与高脂饲养组和空白培养基干预组小鼠相比,DD98干预组小鼠空腹体重值(20.89±2.51 g)、脏器指数、血清和肝脏脂质(TG、TC、LDL-C)水平均显著降低,肝脏脂质堆积情况得到明显改善。因此,长双歧杆菌DD98可以有效缓解2型糖尿病和肥胖症状,进一步改善由2型糖尿病和肥胖引起的血脂紊乱以及肥胖引起的轻度肝损伤。     

利用高速逆流色谱对一株内生真菌代谢物中抗肿瘤活性物质的分离

利用高速逆流色谱法对一株内生真菌活性代谢产物进行了分离.两相溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(体积比为1:3:3:3),固定相为系统上相,下相为流动相.从内生真菌的代谢物中分离得到一抗肿瘤细胞活性组分.经高效液相色谱分析,其纯度大于99%以上.其化学结构由ESI-MS、1H NMR和13C NMR确认为Cytochalasin N.     

富硒长双歧杆菌优势菌株的高通量选育

运用96孔深孔板微型化培养和酶标仪快速检测，建立富硒长双歧杆菌（Bifidobacterium longum）优势菌株的高通量筛选方法。通过高通量筛选获得的富硒长双歧杆菌优势菌株XBL-30，具有很好的硒蛋白转化能力。在7 L罐中添加一定浓度的亚硒酸钠，优势菌株XBL-30的硒蛋白转化率从原始菌株的60%提高至85.3%，菌株多次传代后，硒蛋白转化率均能稳定在85%。该研究建立的高通量筛选方法不仅简单，快速，成本低，而且对其他微生物菌株的高通量筛选具有一定的参考价值。     

生物转化与药物开发

在过去的30多年中，微生物转化或酶转化技术在有机化学合成领域中的尝试使不仅在理论研究的同时，在实际应用方面都取得了长足的进步。许多化学合成工艺相当复杂的药物、食品添加剂、维生素、化妆品和其它一些精细化工产品合成过程中的某些重要反应，目前已经能够用微生物或酶转化技术得以替代。     

富硒长双歧杆菌DD98对X射线所致放射性肝损伤小鼠的保护作用

本研究旨在讨论富硒长双歧杆菌DD98(Selenium-enriched Bifidobacterium longum DD98,Se-DD98)对X射线所致发射性肝损伤小鼠的保护作用。雄性SPF级balb/c小鼠随机分为5组:正常对照组、辐射对照组、Se-DD98高剂量组、Se-DD98低剂量、DD98对照组,连续给药28 d并监测体重。第29 d采用X射线全身照射,实验结束后进行指标检测。与辐射对照组的体重(24.44 g)和肝脏指数(4.49%)比较,Se-DD98高剂量组体重(26.96 g)及肝脏指数(5.10%)显著改善、血清肝功能指标(ALT、AST)和体内氧化压力水平(MDA、LDH)显著降低,抗氧化酶活力(CAT、SOD、GSH-Px)显著升高。实时荧光定量PCR结果表明,Se-DD98高剂量组肝脏中Sod1(3.58)和Gpx1(7.14)表达显著上调,分别上调16.41、10.19倍,促炎因子IL-1β表达(2.16)显著下调1.61倍,抑炎因子IL-10(7.09)显著上调1.40倍。此外,Se-DD98高、低剂量组均能减轻X射线所致的肝脏损伤。最后,Se-DD98高剂量组各项指标与正常对照组相比差异不大,与辐射对照组差异显著。因此,富硒长双歧杆菌DD98可以通过减少氧化压力水平、增强抗氧化酶活力及抑制组织炎症来缓解X射线所致的小鼠放射性肝损伤。     

生物转化与药物开发

在过去的30多年中，微生物转化或酶转化技术在有机化学合成领域中的尝试，不仅在理论研究而且在实际应用方面都取得了长足的进步。许多化学合成工艺相当复杂的药物、食品添加剂、维生素、化妆品和其它一些精细化工产品合成过程中的某些重要反应，目前已经能够用微生物或酶转化技术得以替代。在许多国外文献中经常能够看到的描述这种技术的名词有：microbial transformation，microbial conversion，biotransformation，biotransconversion和enzymation等。     

建筑物冷热电联产联动控制策略

建筑物冷热电联产系统是通过建筑物中制冷、制热、低品位热能回收利用和热量储存等多个不同的能量转换和能量运行系统进行联动控制,以实现能源高效率利用.分别给出了夏季和冬季运行联动控制方案,以及吸收式冷温水机的冷却水回收利用控制策略.工程案例表明,某大楼中央空调系统改造并运行1年,采用板式换热器、水源热泵机组与智能控制器相结合,有效地利用具有低位热能的冷却水,实现冷却水输出总量减排30%~50%,系统节能40%~50%.