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实验采用PCR法获得CD1d基因片段,将其插入慢病毒pReceiver-Lv201载体(带GFP荧光)中获得EX-S0249-LV201重组质粒,经转染试剂EndoFectin-Lenti转染到293T细胞中获得慢病毒LP-S0249-LV201,用包装获得的慢病毒感染胰腺癌Panc-1细胞,在不同时间段用倒置荧光显微镜观察绿色荧光,并用反转录酶聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法验证获得的表达细胞株.实验结果显示经RT-PCR和Western blotting检测证实慢病毒LP-S0249-LV201 转染至Panc-1细胞株后,该细胞株表达CD1d基因和蛋白,成功建立了稳定表达CD1d基因的Panc-1细胞系,为进一步研究CD1d基因在胰腺癌免疫基因治疗中的作用奠定基础. 相似文献
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在施工过程中,对造价的全过程控制对一个企业乃至整个建筑行业来讲,起着相当重要的作用.施工造价全过程控制对项目成本起到精确管理和监控作用,能够有效地反映工程经济技术指标,能帮助及时发现和规避风险.文章将对房屋建筑施工过程中预算编制流程及所遇到的问题进行简要探讨,包括如何根据施工现场实际情况处理索赔签证等. 相似文献
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