驼乳乳铁蛋白DPP-IV抑制肽的筛选验证及其防治糖尿病潜在作用机制探究

目的:结合生物信息学,从驼乳乳铁蛋白（Lactoferrin,LF）中筛选DPP-IV（Dipeptidyl peptidase IV,DPP-IV）抑制肽,并利用网络药理学探讨筛选肽段对糖尿病的潜在作用机制。方法:利用BIOPEP网站模拟酶切LF序列产生多条肽段,结合多肽数据库及分子对接筛选潜在的DPP-IV抑制肽,选择其中四条进行人工合成,验证其DPP-IV抑制活性,通过分子对接分析肽段与DPP-IV分子间相互作用方式,Lineweaver-Burk方法分析肽段抑制模式。选择抑制作用较强的GPQY进行网络药理学分析,预测其对糖尿病的潜在作用机制。采用Swiss Target Prediction和GeneCards数据库挖掘GPQY及糖尿病的作用靶点,String数据库获取蛋白与蛋白互作关系,Cytoscape 3.9.0软件构建PPI网络,DAVID数据库对靶点进行GO与KEGG通路富集分析。结果:筛选验证获得2条DPP-IV抑制GPQY和EACAF,其半抑制浓度（IC₅₀）值分别为348.27±16.11和1024.89±19.67 μmol/L,抑制模式分析表明GPQY为竞争性抑制,EACAF为混合型抑制。分子对接结果显示两条肽段通过氢键、疏水作用和静电作用与DPP-IV结合。由PPI网络筛选到GPQY有STAT3、MMP9、SRC、MAPK1等25个核心作用靶点,KEGG通路富集显示GPQY防治糖尿病通路涉及IL-17信号通路、肿瘤坏死因子（TNF）信号通路、肾素-血管紧张素系统、细胞凋亡等。 结论:驼乳LF是DPP-IV抑制肽的良好来源,由其获得的四肽GPQY可通过多靶点、多通路参与炎症反应,影响细胞增殖分化等多方面防治糖尿病及其并发症。     

Fe3O4@海藻酸钠-壳聚糖固定化乳糖酶技术及其酶学性质研究

以磁性Fe₃O₄@海藻酸钠-壳聚糖复合材料为载体，采用包埋法对乳糖酶进行固定化处理探究其酶学特性，并过傅里叶变换红外光谱(FTIR)和X-射线衍射仪(XRD)对效果进行表征。结果表明：各材料间相互作用稳定，固定化最佳工艺条件为海藻酸钠质量分数4.0%，壳聚糖质量分数1.0%,Fe₃O₄质量分数2.0%，游离乳糖酶质量分数3.5%,CaCl₂质量分数4.0%，处理时间60 min。固定化后，乳糖酶活性回收率达94.04%。固定化后乳糖酶pH稳定性和热稳定性均有提高，回收利用率高，储存稳定性和操作稳定性良好，在35℃下处理3 h即可使山羊乳中乳糖含量降低至0.5%以下，达到无乳糖水平，为工业化应用提供了技术支撑。