耶氏酵母菌POX5基因的敲除

对于耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)中编码与γ–癸内酯合成相关的乙酰辅酶A氧化酶基因(POX1-POX5)中的POX5基因用Cre/loxP同源重组系统进行敲除。设计含有60个核苷酸与POX5基因的ORF两侧序列同源的长引物,以pUG6为模板构建带有Cre/loxP系统的敲除组件,之后转化耶氏酵母YL(Yarrowia lipolytica),通过PCR确定阳性克隆子。将质粒pSH65转入阳性克隆子,半乳糖诱导表达Cre酶以切除KanMX基因并经过PCR确认。最后在YPD培养基中连续传代培养丢失pSH65质粒,成功获得POX5缺陷型菌株。     

泡菜风味形成的原理

介绍泡菜发酵中乳酸菌所起的作用,分析泡菜风味形成的原理。首先探讨泡菜发酵所用的原料对泡菜风味所起的作用,然后介绍泡菜发酵过程中两种基本发酵途径,重点介绍发酵中间产物之间相互反应生成泡菜的风味组分。     

摄食低钠盐对三高病人局部基因网络模式的共同影响

应用局部基因网络模式(Local gene network pattern)研究摄食低钠盐在高血压、高脂血及高血糖三种疾病人群血液基因表达谱引起的若干共同差异.测试人群包含19个样本(8正常,11三高疾病),经过检测食用低钠盐前后的基因表达芯片,在监测的150个高血压候选基因中,有17个有明显表达,其中的14个发现可以通过明确的信号通路相互连通成包含约60个基因的局部基因网络.该局部基因网络相对于正常组在三高疾病组中的共同变化表现在4个基因上.结果表明,局部基因网络可在分子水平上研究营养因子对不同人群的营养效应.上述三高病人响应低钠盐的共同局部基因网络可以从方法学上作为进一步研发功能食品的基础,也为低钠盐作为针对三高人群的非药物保健因子在基因表达上提供了进一步研究所需的素材.     

乙醇对秀丽隐杆线虫寿命的影响及其分子机理

以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)作为模式生物,在其生长培养基中分别添加4、40、400 mmol/L的乙醇试剂,观察乙醇对线虫寿命的调控作用。通过检测对照组和喂食乙醇溶液实验组线虫体内寿命相关基因(age-1、pdk-1、akt-1、let-363)的表达差异,探究乙醇调控线虫寿命的分子机制。结果表明,喂食400 mmol/L乙醇可有效提高线虫寿命,分别将寿命中位数和平均寿命提高了11.76%和15.78%,且与对照组相比均具有显著性差异(P0.05)。利用实时荧光定量聚合酶链式反应检测基因表达,结果表明乙醇可能通过抑制age-1基因表达,引发胰岛素信号传导通路中一系列相应下游基因表达变化从而延长线虫寿命;雷帕霉素受体信号传导通路中let-363基因也因乙醇的摄入及胰岛素信号传导通路下游基因的抑制作用而表达下降,两者联合达到显著延长线虫寿命的作用效果。     

利用非培养技术研究古井贡酒大曲中的细菌群落结构

淡雅型白酒古井贡酒大曲中的微生物群落结构一直未在分子水平上得到解析。本文采用构建16s rDNA克隆文库的非培养方法对古井贡酒中温大曲和高温大曲进行细菌群落结构及其多样性研究。所有克隆菌株归为36个OUT,分别属于厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)和一些未培养菌类,其中厚壁菌门占多数。总体来说,中温大曲明显要比高温大曲细菌多样性更丰富一些。高温大曲的菌种相对比较单一,绝大多数为高温放线菌Thermoactinomyces sanguinis,而且仅存在于高温大曲中,占到高温大曲表面菌群的79.5%,高温大曲曲心菌群的98.5%。中温大曲的两个样本差距比较大。样本S1的优势菌为枝芽孢菌属(Virgibacillus sp.),占85.3%,另外还有少量的未培养菌类(12.9%)。中温大曲S2的细菌多样性比较丰富,优势菌属为乳杆菌属Lactobacillus(25.2%)、葡萄球菌属Staphylococcus(14.3%)、芽孢杆菌属Bacillus(13.4%)和各种未培养菌类(16.8%)。古井大曲中存在大量潜在新种,需要进一步鉴定。     

纳米生物机器人研究与进展

介绍了纳米生物机器人相关领域的研究概况,给出了本小组基于病毒的纳米生物机器人的概念模型,对其中的关键技术和方法进行了分析,总结了目前存在的主要难题和可能的解决途径,最后展望了纳米生物机器人未来的发展方向．     

纳米材料对DNA热变性行为的影响

在基因操作过程中经常需要对脱氧核糖核酸（DNA）进行高温处理,如在聚合酶链式反应PCR操作中就需要对模板DNA进行升降温的操作,因此,DNA的热变性行为是关系到一些基因操作效率高低的关键．琼脂糖凝胶电泳实验显示,1972bp的短链入DNA高温处理后在1000bp左右处出现额外一条下带,而且此条带经过37℃处理数小时即可恢复到1972bp,不像48000bp长链）LDNA那样在高温处理后出现弥散现象．另外,显著添加不同的纳米材料对下带出现的温度有明显的影响,意味着添加适量纳米材料可以改变DNA分子结构对温度的敏感性．所发现的下带可能具有尚未报道过的特殊结构．     

石中泥粉对混凝土性能的影响研究

通过净浆、砂浆试验排除了水泥、粉煤灰、矿粉及砂子造成坍落度快速损失的可能。通过混凝土中掺入不同比例的泥粉,考察了泥粉对混凝土坍落度、扩展度、含气量及强度的影响,结合荧光、XRD和总有机碳吸附试验分析了泥粉产生影响的原因。试验结果表明,聚羧酸减水剂主要被泥粉中蒙脱土大量吸附,使聚羧酸减水剂的塑化性能严重降低;泥粉的掺入使混凝土初始含气量有所降低,但对混凝土含气量的稳定较为有利;抗压强度的降低可能因为泥粉削弱了混凝土界面过渡区。     

低钠盐饮食对胰岛素信号通路相关基因网络状态的影响

研究低钠盐饮食对高血压与肥胖并发者血液中胰岛素信号通路相关基因表达的影响,初步找到表达发生变化的基因间相互关联的网络状态.选择3名高血压与肥胖并发者,分别对他们食用低钠盐前后的血样做胰岛素信号通路表达谱芯片,共6张.以每个受试者食用前所做芯片图做对照,找出其食用后表达发生变化的基因.在检测的144个基因中,得到2次以上重复一致的异常表达基因共26条:上调基因6个,下调基因20个.食用低钠盐对胰岛素信号传导通路中的Focal Adhesion通路和PI3K途径有直接的影响,上述结果从血液基因表达的层面和局部基因网络的角度提供了食低钠盐缓减胰岛素抵抗的初步证据.