| 耶氏酵母菌POX5基因的敲除 |
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| 引用本文： | 黄琳,刘常金,王芳,师慧敏,张治洲.耶氏酵母菌POX5基因的敲除[J].现代食品科技,2010,26(4):331-336. |
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| 作者姓名： | 黄琳 刘常金 王芳 师慧敏 张治洲 |
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| 作者单位： | 1. 天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津,300457
2. 天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津,300457;哈尔滨工业大学(威海)科学与工业技术研究院,山东威海,246209 |
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| 基金项目： | 新世纪优秀人才计划(2006)，哈工大人才引进启动资金，上海爱普香料有限公司资金合作项目 |
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| 摘 要： | 对于耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)中编码与γ–癸内酯合成相关的乙酰辅酶A氧化酶基因(POX1-POX5)中的POX5基因用Cre/loxP同源重组系统进行敲除。设计含有60个核苷酸与POX5基因的ORF两侧序列同源的长引物,以pUG6为模板构建带有Cre/loxP系统的敲除组件,之后转化耶氏酵母YL(Yarrowia lipolytica),通过PCR确定阳性克隆子。将质粒pSH65转入阳性克隆子,半乳糖诱导表达Cre酶以切除KanMX基因并经过PCR确认。最后在YPD培养基中连续传代培养丢失pSH65质粒,成功获得POX5缺陷型菌株。
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| 关 键 词： | 耶氏酵母 POX5基因 基因敲除 Cre/loxP系统 γ-癸内酯 |
Deletion of POX5 Gene from Yarrowia lipolytica |
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| HUANG Lin,LIU Chang-jin,WANG Fang,SHI Hui-min,ZHANG ZHi-zhou.Deletion of POX5 Gene from Yarrowia lipolytica[J].Modern Food Science & Technology,2010,26(4):331-336. |
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| Authors: | HUANG Lin LIU Chang-jin WANG Fang SHI Hui-min ZHANG ZHi-zhou |
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