带鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽制备及工艺优化

目的 制备带鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽, 研究含肌肽类活性肽的带鱼提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用。方法 以带鱼为原料, 通过超声辅助酶法制备带鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽, 高效液相色谱法测定肌肽类活性肽的含量。结果 以肽粉得率和黄嘌呤氧化酶抑制率为指标, 筛选得到碱性蛋白酶为最佳反应用酶。以单因素实验为基础, 通过Box-Behnken响应面分析法, 以水解度、黄嘌呤氧化酶抑制活性、肌肽及鹅肌肽含量为响应值, 优化得到酶解最优条件: 酶解时间5 h, 超声时间21 min, 酶解温度49℃。在此条件下, 得出水解度21.90%、黄嘌呤氧化酶抑制率52.03%、鹅肌肽含量0.66%和肌肽含量为0.15%, 与回归理论模型基本符合。在最优酶解方案的基础上, 将酶解液进一步分成不同组分, 可得到肌肽类活性肽含量升高, 抑制活性变大。结论 肌肽类活性肽对黄嘌呤氧化酶活性的抑制有着积极的作用, 这为工业化利用带鱼制备黄嘌呤氧化酶抑制肽提供理论及指导。     

马鲛鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽的制备 工艺优化及抗氧化活性研究

目的 探究马鲛鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽制备的最佳条件及其抗氧化活性。方法 以马鲛鱼为原料，黄嘌呤氧化酶抑制肽采用超声辅助酶法制备，并筛选最佳反应用酶；以单因素实验为基础，通过Box-Behnken响应面分析法，以黄嘌呤氧化酶抑制活性为响应值，优化得到酶解最优条件。通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)自由基清除等方法测定膜分离物的抗氧化活性；肌肽和鹅肌肽的含量测定采用了高效液相色谱法。结果 最佳反应用酶为复配的中性蛋白酶与复合蛋白酶，总加酶量0.3%（中性蛋白酶∶复合蛋白酶=1:1, m:m）。优化所得的最佳酶解条件为：酶解温度50℃，加酶量为0.2%，pH为7.0。在此条件下黄嘌呤氧化酶抑制率37.49%，与回归理论模型基本符合。3个组分的膜分离物中，相对分子量小于1 kDa的酶解产物的抗氧化性能力最强。马鲛鱼中鹅肌肽的含量为1.558 mg/g，而肌肽含量则为0.10 mg/g。结论 马鲛鱼制备及工艺优化所得的黄嘌呤氧化酶抑制肽对黄嘌呤氧化酶有较好的抑制作用，为工业化制备马鲛鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽提供了数据基础和理论依据，肌肽和鹅肌肽的含量测定为分离纯化马鲛鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽试验奠定了基础。。