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为研究皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)中脯氨酰内肽酶(Prolyl endopeptidase,Hdh-PEP)的酶学特性与结构特性,利用基因工程技术重组并在大肠杆菌中高效表达了皱纹盘鲍PEP。原核表达的Hdh-PEP分子量为85 kDa,在pH2~6、温度20~60 ℃条件下,Hdh-PEP的表面疏水性明显升高。氨基酸序列同源性分析结果表明,Hdh-PEP催化结构域中有三个高度保守的氨基酸序列:Seq 1:K-D-G-T-K/R-I-P、Seq 2:Y-G-Y-G-G-F和Seq 3:I-R-G-G-E-Y/F。酶动力学研究表明,Hdh-PEP的米氏常数Km为5.32 μmol/L,催化常数kcat值为15.7 s?1。PEP的特异性抑制剂SUAM-14746和ZPP对Hdh-PEP酶活力具有强抑制作用,丝氨酸蛋白酶抑制(PMSF)对Hdh-PEP酶活力也有较大程度的抑制作用。本实验制备了高特异性抗Hdh-PEP多克隆抗体,可检测鲍鱼肌肉中天然PEP的存在情况。Hdh-PEP的体外高效表达和特异性多克隆抗体制备为后续深入研究Hdh-PEP的性质提供了重要参考。 相似文献
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为充分对比不同类型金刚石涂层刀具的切削性能,定制几种不同类型金刚石涂层刀具进行等静压石墨切削加工,并与WC硬质合金刀具和TiAlN涂层刀具的切削情况对比,分析不同类型金刚石涂层刀具的涂层形貌、切削寿命、加工后的表面质量以及切削力。结果表明:制备的金刚石涂层刀具的涂层形貌主要为纳米晶和微晶,其寿命是硬质合金和TiAlN涂层刀具的10倍以上,且几种不同类型的金刚石涂层刀具寿命差异较小;金刚石涂层表面的晶粒细化可以降低加工表面的粗糙度和切削力,涂层脱落是金刚石刀具的主要磨损形式。 相似文献
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水文数据是国家重要的基础信息资源,水文教据库是水文数据的载体和水文业务工作的重要基础设施。水文水资源数据是21世纪我国重要的基础信息资源和战略资源之一,数据共享项目的实施有利于政府宏观决策和科学研究、有利于加快国民经济建设与发展和水文水利信息化的进程,促进水文水资源信息为社会、国民经济建设、科学研究等提供服务。 相似文献
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水文信息采集作为水利和经济社会发展的基础工作,在经济社会发展中具有重要的作用,文章从几个方面分析工程建设对水文信息采集的影响,并提出受工程影响情况下水文信息采集的对策,以期提高水文信息采集的水平,充分发挥水文站网在经济建设中的重要作用。 相似文献
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