中国明对虾凝血栓蛋白基因全长cDNA的克隆及其表达特征

获得了中国明对虾凝血栓蛋白(TSP)基因全长cDNA,该基因由2868个碱基组成,具有一个2763bp的开放阅读框,编码920个氨基酸,其中包含21个氨基酸组成的信号肽.中国明对虾TSP由四类不同的结构域组成,从N端开始顺序为几丁质结合结构域,EGF-like结构域,Type Ⅲ repeat和TSP carboxyl-terminal domain(TSP-C结构域).结构域分析发现,中国明对虾的N端不具有TSP N-terminal domain(TSPN结构域),但有一个几丁质结合结构域,其C端的Type Ⅲ和TSP-C结构域非常保守.该基因在弧菌感染后的对虾淋巴器官和肝胰脏中的表达量显著增加,并具有不同的时空表达趋势,提示中国明对虾TSP基因在免疫反应中具有重要作用.     

国产化CO_2烟丝膨胀生产线控制系统

该控制系统采用集散控制技术,实现了分散控制、集中监视和管理的工作模式。与其它控制设备相比,增强了操作、监视机能,画面丰富,能实现许多画面的“一触式”展开。增加了ＢＡＳＩＣ机能,具有报表打印及与上位机系统通讯的能力。增加了系统维护机能,具有自诊断功能。模拟信号的控制与监视由具有输入输出处理、补偿、运算、报警检查等机能的内部仪表实现。开关量的控制程序以顺序表的形式记述。按控制要求,在顺序表的条件信号、操作信号栏内填上Ｙ或Ｎ即可,在顺序表的执行中完成顺序控制任务     

中国明对虾线粒体MnSOD在大肠杆菌中的重组表达、产物纯化及活性测定

采用PCR方法扩增编码中国明对虾线粒体锰超氧化物歧化酶(MnSOD)成熟肽的基因,并克隆到大肠杆菌表达载体pCRR T7/NT TOPOR TA中进行体外重组表达.重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE3) pLysS后,经IPTG诱导表达产生包涵体形式的目的蛋白.对重组蛋白进行 LC-ESI-MS 分析的结果表明,融合蛋白的三个肽段与中国明对虾线粒体MnSOD 相应肽段完全一致.将重组蛋白通过金属螯合柱进行纯化,进而透析、复性,最后获得了活性高达2373U/mg的重组蛋白.中国明对虾线粒体MnSOD的成功表达,为深入研究其在中国明对虾免疫反应和抗氧化胁迫中的作用奠定了基础.     

毛细管电泳RT-PCR方法在中国明对虾抗菌肽基因表达定量检测中的应用

建立了毛细管电泳RT—PCR检测基因表达谱的方法,并利用实时定量PCR技术对此方法进行基因表达定量的可靠性进行了验证。利用此新方法研究了弧菌和白斑综合征病毒（WSSV）感染对中国明对虾抗菌肽（penaeidin）基因mRNA表达的影响。结果表明,弧菌感染后对虾肽基因表达变化可分为三个阶段：迅速下调,缓慢回升,持续稳定。WSSV感染后对虾肽基因表达的变化显示出与弧菌感染组不同的变化趋势：迅速下调,迅速回升,再次下降。     

中国对虾性别相关片段的初步研究

采用mRNA双随机引物差示技术分离中国对虾性别相关片段。然后利用这些引物组合对中国对虾的基因组进行了PCR检测，发现其中两对引物组合可以扩增出具有性别相关性的片段。     

智能化燃烧速度测定仪

YSZ—Ⅱ燃烧速度测定仪,采用单片微计算机进行控制。本文主要介绍该仪器的用途、性能及测量原理,微机测控系统的设计及硬件结构,软件设计及有关的程序流程图。     

中国明对虾蜕皮抑制激素在大肠杆菌中的表达与分离纯化

采用大肠杆菌表达系统对中国明对虾蜕皮抑制激素(MIH)进行了体外重组表达研究.重组蛋白以包涵体的形式存在于菌体中.尿素-SDS-PAGE分析表明,经1mmol/L的IPTG诱导4h后,重组蛋白获得了大量表达,在分子量为13 kD处有一条与预测大小一致的特异性蛋白条带;经金属螯合柱纯化后,得到了电泳纯的融合蛋白.Western blotting检测结果表明:重组表达的融合蛋白与兔抗刀额新对虾MIH的多克隆抗体特异结合,证实该融合蛋白为中国明对虾MIH.通过胶内酶切与LC-ESI-MS分析进一步证实融合蛋白的部分肽段与日本对虾MIH一致.MIH融合蛋白的成功表达为进一步深入研究其在中国明对虾蜕皮过程分子作用机制奠定了基础.