Hydralazine逆转胃癌细胞株p16基因甲基化及增强其表达的研究

目的: 通过使用甲基转移酶抑制剂肼屈嗪(Hydralazine)作用于胃癌细胞株BGC-823,观察Hydralazine对MTS1/p16基因启动子区CpG岛甲基化、p16 mRNA、p16蛋白表达及细胞增殖的影响;分析p16基因启动子区CpG岛甲基化与p16基因表达两者间的关系,以此考察胃癌细胞株BGC-823 p16基因的失活机制是否与启动子区CpG岛甲基化有关。方法: 对体外培养的胃癌细胞株BGC-823进行分组实验,实验组加入水溶性的Hydralazine,浓度0、10、30、100 μmol/L,对照组不加Hydralazine,96 h 后对两组分别行甲基化特异性PCR法(MSP)、RT-PCR及Western blot检测,以观察p16基因甲基化状态、mRNA、蛋白表达的变化;应用6种不同浓度的水溶性Hydralazine(0、3、10、30、100、300 μmol/L)处理胃癌细胞BGC-823,72 h 后行MTT检测,以观察对细胞增殖的影响。结果: P16基因在胃癌细胞株BGC-823中,启动子区CpG岛呈高甲基化状态,mRNA及蛋白呈低水平表达。Hydralazine阻断甲基转移酶作用后,p16基因启动子区CpG岛呈去甲基化状态,Hydralazine浓度越高,CpG岛去甲基化越明显。Hydralazine阻断甲基转移酶作用后,用药后p16 mRNA表达较前明显增强(P<0.05)。Hydralazine阻断甲基转移酶作用后,用药后p16蛋白表达较前明显增强(P<0.01)。MTT检测到不同浓度的Hydralazine(0、3、10、30、100、300 μmol/L)对细胞增殖的抑制率差异有统计学意义(P<0.05),其量效关系反映出抑癌基因p16去甲基化程度越高,对胃癌细胞株BGC-823的增殖抑制越显著。结论: P16基因动子区CpG岛甲基化是p16基因失活的重要机制。     

水力喷射泵在埕岛西合作区块中的应用分析

水力喷射泵以其独特的抽油工艺特点,在埕岛西合作区块的稠油井、高含气井、较低产量井及测试井内大量使用。本文对水力喷射泵采油工艺,从地面流程配置及井下工具系统进行简单介绍,着重介绍其采油工艺原理。并逐一对埕岛西合作项目的现场应用情况进行介绍,使用情况表明,水力喷射泵采油系统在该油田具有很高的适用性。     

生长抑素和生长激素联合治疗胰腺炎与单用生长抑素对照研究的 Meta 分析

目的: 进一步了解生长抑素和生长激素联合治疗与单用生长抑素治疗胰腺炎的疗效差异。方法: 应用Meta 分析方法,对6 项研究生长抑素和生长激素联合治疗胰腺炎的病死率、并发症进行同质性检验和合并效应量的估计。结果: 病死率同质性检验:χ²=3.156,P>0.05,并发症同质性检验:χ² =1.210,P>0.05,均具有同质性,可以合并进行分析。病死率合并效应量的估计:OR_合并=3.164,R_合并95 %可信区间为1.390 ~ 7.200,OR_合并的检验:P<0.05,并发症合并效应量估计:OR_合并=3.209,R_合并95 %可信区间为1.747 ~ 5.900 。结论: 生长抑素联合治疗组的病死率低于单用生长抑素治疗组。联合治疗组疗效优于生长抑素单用组。     

RNAi抑制DNA甲基转移酶1的表达对胃癌细胞p16基因的影响

目的:运用RNAi（RNA interference）抑制胃癌细胞株BGC-823中DNA甲基转移酶1（DNA methylation transferase 1,DNMT1）基因的表达,当DNMT1基因沉默后观察p16基因的表达情况。 方法:以DNMT1的mRNA核苷酸序列,构建siRNA质粒1、2、3和阴性对照siRNA质粒b,胃癌细胞培养后经脂质体转染。对DNMT1基因行Q-PCR检测其mRNA表达水平及Western blot检测其蛋白表达水平,确认其表达下调后筛选出最佳干扰质粒。以同样的方法检测胃癌细胞最佳干扰组、阴性对照组和空白对照组的p16基因的表达情况,以确认抑制DNMT1基因表达后对胃癌细胞p16基因的影响。结果:RNAi可有效抑制胃癌细胞株BGC-823中DNMT1基因的表达。对转染后的胃癌细胞DNMT1基因检测mRNA及蛋白表达情况,结果显示,转染siRNA2的胃癌细胞中DNMT1的表达明显低于其他转染组、阴性对照组及空白对照组（P＜0.05）,由此筛选出最佳干扰质粒siRNA2。用同样的方法检测胃癌细胞最佳干扰组（siRNA2）、阴性对照组和空白对照组的p16基因表达情况。结果显示,最佳干扰组的mRNA（1.6727±0.2242）及蛋白（0.9227±0.0337）表达水平均高于阴性对照组（1.0025±0.0877）、（0.5440±0.0229）和空白对照组（0.4729±0.0940）、（0.4767±0.0774）（P＜0.05）。结论:用RNAi可以抑制胃癌细胞DNMT1基因的表达从而使p16基因去甲基化,使p16基因恢复表达。     

MEGADRIL油基钻井液在埕岛西合作区的应用

为解决埕岛西合作区水基钻井液钻井过程中存在的泥包钻头,进尺慢,起下钻不顺畅等问题,中石化北京埕岛西项目从2011年开始在海上钻井作业中使用油基泥浆体系,截止2018年总共钻井27口,累计进尺57756米。成功解决了定向段的井眼坍塌问题并保护了储层。应用过程中机械钻速提高明显、井眼规则、套管下入顺利、固井质量优,实现了提速提效。采取零排放、循环再利用措施,既降低了钻井液成本又保障了海洋作业区钻完井施工环境保护。证明了油基泥浆在埕岛西区块钻井中使用的可行性和优越性。     

脉冲中子-中子(PNN)测井技术

脉冲中子中子(PNN)测井技术在不洗井、不关井条件下,可实现过套管或过油管的储层监测,即通过测量地层中热中子数量随时间的变化关系,用特有的处理手段和解释方法,求取含油饱和度等多种地层参数。PNN测井系统由井下仪器部分(包括中子发生器短节、中子探测器短节、自然γ短节和通讯短节)、地面数据采集部分及解释软件包部分组成。胜利油田某高含水油井的应用表明,PNN测井技术有助于分析高含水低矿化度油层水淹情况,指导油井采取挖潜措施,措施后该井日增油4t,水的质量分数下降6.2%。     

冲击造型时压缩空气排放口面积的确定

本文推导出影响冲击造型效果的气流排放口尺寸的公式，从而为冲击造型机的设计及气压头有关参数的确定，提供了参考。     

基于DSP技术的超声波钻井液测漏仪的研究

研究超声波钻井液测漏仪的校准装置和井下测试方法,以TMS320VC33浮点数字信号处理器作为井下仪器的核心器件,对两只性能相同的超声波传感器进行实时对发和对收控制,并完成流速测量、流速计算等数据处理、存储与回放。研制井下仪器的同时,还研制了配套的地面软件,可自动生成流速与深度关系曲线。通过研究,提高了流速测量精度,解决了传统的温度测量法和转子测量不准确、故障率高的问题。试验和使用结果表明,所研制的超声波钻井液测漏仪性能良好,测量结果准确。     

用VB语言设计数字滤波器

介绍在Visual Basic6.0环境下,利用VB所提供的控件进行数据的输入和数据的图形化输出显示,并介绍如何用VB执行一种算法。     

大鼠重症急性胰腺炎ENA-78的表达及生长抑素的干预作用

目的: 探讨趋化因子上皮中性粒细胞活化蛋白-78(ENA-78)在重症急性胰腺炎(SAP)大鼠早期发病机制中的作用,并观察生长抑素对ENA-78表达的影响。方法: 采用 3.5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射制备SAP大鼠模型。SD大鼠随机分为假手术(SO)组、SAP 3 h、6 h、12 h 组和生长抑素(SST)干预 3 h、6 h、12 h 组。检测血清淀粉酶、胰腺髓过氧化物酶(MPO),光镜下观察胰腺病理组织学改变,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测胰腺组织中ENA-78mRNA的表达,同时采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清ENA-78的水平。结果: 与SO组相比,SAP组大鼠胰腺组织ENA-78 mRNA表达显著上调,并随SAP的加重ENA-78 mRNA表达逐渐增加(P＜0.05 或 P＜0.01); SAP各组大鼠血清中ENA-78水平明显高于SO组,并随SAP的加重逐渐增高(P＜0.01);胰腺组织ENA-78 mRNA的水平与胰腺的病理损伤呈正相关(r=0.888,P＜0.01);而经生长抑素干预后,SAP大鼠胰腺组织ENA-78 mRNA和血清ENA-78的水平明显下调。结论: ENA-78可能在SAP发生、发展过程中发挥重要作用;生长抑素可能通过抑制趋化因子ENA-78表达从而缓解SAP。