拟南芥CRY1基因C末端导入甘蓝型油菜的遗传及表达

通过卡那霉素抗性鉴定,对甘蓝型油菜westar转基因后代T2代株系进行了研究.结合PCR检测及序列比对验证,对拟南芥CRY1基因C末端导入甘蓝型油菜后的遗传表现进行了分析,并利用GUS染色和花色素苷积累量的比较,对CRY1基因C末端在转基因油菜中的表达进行了研究.结果表明:转化的外源目的基因多数以嵌合形式,少数以单拷贝和嵌合的混合形式整合到转基因油菜的基因组中;目的基因能稳定地遗传给后代,株系间遗传传递率为62.5%;T2代的遗传行为少数呈现孟德尔遗传,多数呈现非孟德尔遗传现象;拟南芥CRY1基因能在转基因油菜中表达,但也出现了沉默现象.     

拟南芥原卟啉原氧化酶三维结构理论模拟

原卟啉原氧化酶（ｐｒｏｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎｏｇｅｎｏｘｉｄａｓｅ，ｐｒｏｔｏｘ）（ＥＣ１３３４）是植物体内正常生物生理过程中的独特酶，其主要作用是有序地将其底物原卟啉原Ⅸ（ｐｒｏｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎｏｇｅｎⅨ，ｐｒｏｔｏｇｅｎⅨ）氧化成原卟啉Ⅸ（ｐｒｏｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎⅨ，ｐｒｏｔｏⅨ），后者将进一步参与叶绿素的生物合成过程。当由于某种原因造成原卟啉原氧化酶缺乏时，将引起原卟啉原Ⅸ过量积累及自动失控性氧化，而引起原卟啉Ⅸ的过量积累。原卟啉是一种光敏剂（ｐｈｏｔｏｓｅｎｓｉｔｉｚｅｒ…     

DRM1,DRM2参与拟南芥愈伤组织的形成

通过体视显微镜、半薄切片、扫描电子显微镜观察拟南芥DNA从头甲基化酶DRM1,DRM2的双突变体drm1/drm2在愈伤诱导培养基上所诱导的愈伤组织,结果发现:与野生型相比,其种子和根、叶、叶柄等外植体,均具有在同等条件下愈伤组织增多,分裂旺盛的表型。编码拟南芥DNA从头甲基化酶DRM1,DRM2的基因DRM1,DRM2的表达水平也与生长素、细胞分裂素等外源激素浓度相关,由此推测外源激素浓度影响DRM1,DRM2的表达。暗示了DRM1,DRM2可能参与了拟南芥愈伤组织形成过程。     

低能离子束对拟南芥诱变效应的研究

依据不同生态型的拟南芥接受不同剂量、不同能量以及不同类型离子的注入，种子成苗率受到的影响程度的不同，选定适合于拟南芥诱变、转化的离子能量和剂量。然后结合RAPD方法检测了离子注入拟南芥种子在当代和后代中引起的变异情况，结果是离子束在当代中可引起DNA水平上丰富的变异，突变频率较高，并且某些变异条带可传递至后代。     

小草拟南芥--保护生物多样性

拟南芥小史 远在战国时期,我国哲学家庄子在<庄子·逍遥游>中曾将"芥舟"哈作小舟;唐代经文学家陆德明在<经典释文>中说:"芥,小草也".     

单壁碳纳米管对固体培养拟南芥的影响

本试验用含有浓度为6．25μg／mL、12．5μg／mL、25μg／mL、50μg／mL单壁碳纳米管的1/2MS固体培养基培养拟南芥,分别测定固体培养基所培养的拟南芥的叶片在第10天、15天、20天、25天的SOD酶和POD酶活性。结果表明不同浓度的修饰后的单壁碳纳米管能够刺激拟南芥叶片,对拟南芥叶片SOD酶和POD酶活性均产生明显影响。     

黑芥子酶提取及活性测定方法的改进

以拟南芥为材料,对以往黑芥子酶的提取方法和活性测定方法进行了改进,通过实验优选出最佳的提取和活性测定条件.改进后的方法提取样品量只有150 mg,提取缓冲溶液1 mL,离心回收上清作为酶液;3 mL反应体系溶液(含0.2 mmol/L黑芥子硫苷酸钾)置于1 cm光路石英比色杯中,37℃条件下平衡后,向反应体系溶液中添加150μL酶液,预反应3min,而后在227 nm波长下测量吸光度5 min(反应时间),计算酶活.改进后的方法取样量小,操作较为简便,适于较多样品的平行测定.     

拟南芥抗氧化突变体筛选条件的建立

[目的]建立筛选拟南芥抗氧化突变体的条件.[方法] 将灭菌的野生型拟南芥种子播种于MS培养基上,4 ℃层化2 d,并于23 ℃培养室中垂直放置培养4 d后,将幼苗转移至含有不同浓度的甲基紫精(MV)胁迫培养基中,倒置培养,比较不同MV浓度下根的弯曲生长情况,以根停止弯曲生长的MV浓度作为抗氧化胁迫突变体的筛选条件.[结果]野生型拟南芥幼苗的根在MV浓度为0.7 μmol/L时受到明显抑制,停止生长;在MV浓度低于0.7 μmol/L时能正常生长或被轻微抑制.[结论]确定筛选抗氧化突变体的MV浓度为0.7 μmol/L.     

拟南芥肌醇- 1-磷酸合酶类蛋白基因的克隆表达

以野生型拟南芥总RNA为模板,逆转录PCR反应获得拟南芥肌醇-1-磷酸合酶类蛋白基因cDNA（AtMIPS1）,开放读码框为1533bp,编码510个氨基酸．与已报道物种MIPS基因氨基酸序列比较分析表明,AtMIPS1与植物MIPS基因的氨基酸同源性和相似性较高达86％-90％与95％-96％,并含有MIPS基因的保守区域“334SYNHLGNNDG”．将该cDNA序列不改变阅读框架克隆到pET28a（＋）原核表达载体上,SDS—PAGE结果表明：在0．12g／LIPTG诱导2h的条件下得到最佳的蛋白表达效果,AtMIPS1的成功表达为其功能研究打下基础．     

α粒子注入对拟南芥胚根生长及向重力性的影响

本研究用分子探针、外源过氧化氢、活性氧猝灭剂和测量根长等实验方法,研究了α粒子注入拟南芥胚引起拟南芥根弯曲的原因.研究表明,在0-100 Gy辐照范围内,α粒子注入拟南芥胚引起的根弯曲与剂量呈正相关(r=0.98),1Gy、10Gy、100Gy处理的拟南芥幼苗根的弯曲度分别为13.3°、28.7°、69.1°,非照射对照为12.5°.当剂量为100Gy时,根呈"S"形弯曲,根的向重力性降低,根生长受到抑制.活性氧在根部的产生率检测表明,100Gy α粒子处理的根尖较对照有较亮的活性氧显色.适当浓度的活性氧猝灭剂处理,可以使α粒子注入引起的根长及向重力性得以恢复,且外源过氧化氢能够诱导拟南芥根弯曲加重.该研究显示,α粒子注入拟南芥胚引起的根长及向重力性变化是活性氧介导的.