游离胆备醇酶传感器的研制

本文初步研制了一种测定游离胆固醇的酶传感器。该传感器用于流动注射法的最佳工作条件:磷酸盐缓冲液作载液(pH=6.3,0.1mol/L),流动速度为0.5mL/min,温度为27℃,检测限为0.15mg/mL～1.14mg/mL,线性响应范围0.25～1.00mg/mL,斜率0.08μA·mL/mg,响应时间为0.5～2.0min,工作寿命15d。已将该传感器用于样品分析,取得初步满意的结果。     

D-氨基酸氧化酶的研究进展

D-氨基酸氧化酶(DAAO)是一种以黄素腺嘌呤(FAD)为辅基的典型的黄素蛋白酶类.DAAO可氧化D-氨基酸生成相应的酮酸和氨.介绍了D-氨基酸氧化酶的研究现状,包括在自然界的分布、生理功能、生物学特性、催化机理、基因克隆和序列分析以及基因表达.     

多酚氧化酶催化单宁的氧化聚合反应研究

研究了多酚氧化酶催化单宁的氧化聚合反应情况 ,探索了反应条件及 7种化合物对酶活性的抑制效果 ,对产物进行了红外光谱和紫外光谱测试 ,相对粘度法测定了产物的分子量。结果表明 ,反应的最佳条件是pH为 5 .2 9,温度为 3 0℃ ,在所用抑制剂中 ,硫酸铜的抑制作用最强 ,与单宁酸的IR图相比 ,产物的 -OH吸收带变窄 ,在 12 60cm-1处吸收峰增强 ,而紫外吸收无变化。产物平均分子量为 3 5 41,说明多酚氧化酶能催化单宁的氧化聚合     

链霉菌LD048硫化物氧化酶的催化机理及酶学特征

对硫化物氧化新菌株链霉菌LD048硫化物氧化酶的催化机理研究表明S2-在硫化物氧化酶的作用下首先被氧化为S2O2-3,然后生成SO2-3,最后产生末端产物SO2-4;O2对细胞生长是必须的,同时是反应过程中的电子受体.酶学特征研究说明酶的最适反应温度为大于35℃,在80℃维持4 h酶活仍能完全保留;酶的最适反应pH为8.0;金属Mn2+是酶活性的有效促进剂,在实验浓度范围内酶活提高达35.6%;酶促反应的最适底物浓度为6.0 mmol/L.     

过氧化氢在生成戊二酰-7-氨基头孢烷酸过程中的影响

头孢菌素C(CPC)在D-氨基酸氧化酶为催化剂的情况下,与O2反应生成α-ketoadipyl-7-ACA,再与过氧化氢反应生成戊二酰基-7-氨基头孢烷酸(Gl-7-ACA).在此反应中生成的α-ketoadipyl-7-ACA是造成目标产物收率低的关键因素之一.通过加入适量的双氧水可以使剩余的α-ketoadipl-7-ACA转化为Gl-7-ACA,从而使裂解的收率提高5%.     

基于金纳米-植酸胶束混合组装的过氧化氢传感器的电化学研究

采用混合组装技术,利用植酸胶束(IP6micelles)的磷酸酯键络合辣根过氧化物酶(HRP)和金纳米粒子(GNPs),形成了具有生物亲和性的纳米复合材料,保持了辣根过氧化物酶的生物活性,并利用金纳米粒子的高电子密度、介电特性和催化性能,实现了HRP与玻碳电极(GCE)表面的直接电子转移。Nafion膜的滴加能提高电极的选择性和稳定性。实验过程中借助紫外-可见吸收光谱和透射电子显微镜进行表征,实验结果证明:GNPs的高导电和高催化性能,结合植酸胶束的优良生物相容性和对酶的高负载量的特点,使得吸附在其上的HRP保持活性,制备的生物传感器能对H2O2进行电催化还原。Nafion/HRP-IP6micelles-GNPs/GCE对H2O2的线性浓度范围为5×10-7～1.15×10-5mol/L(线性相关系数r=0.993,n=9),最低检测限为0.1μmol/L(信噪比S/N=3),米氏常数为0.002 4 mmol/L。     

NADH氧化酶研究进展

NADH氧化酶作为一类催化NADH和氧气进行氧化反应的酶类,不仅在微生物氧化应激反应中起重要的生理作用,而且是人工调控微生物代谢流向研究中的调控热点;另外,它在氧化态辅酶NAD+再生方面表现出巨大的应用潜力.作者综述了NADH氧化酶的分类和结构、反应机制、分离纯化及应用进展.     

中药提取物中黄嘌呤氧化酶抑制剂的筛选

用带有酶动力学分析软件的紫外分光光度计,测定多种中药提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制活性.测定波长为294 nm,黄嘌呤氧化酶1.14 units/mL.筛选在体外能抑制黄嘌呤氧化酶活性的中药提取物,并比较了它们的抑制活性.结果表明枳椇子乙醇提取物、高良姜乙醇提取物和葛花乙酸乙酯提取物对黄嘌呤氧化酶显示出较强的抑制活性;说明上述3种提取物是抑制黄嘌呤氧化酶的活性部位,可进一步分离纯化得到有效化合物.     

赤霉素GA3对小鼠机体氧化-抗氧化系统平衡的影响

选择昆明种小鼠为试验动物,以超氧化物歧化酶、谷胱苷肽过氧化物酶活性及丙二醛含量为观察指标,研究赤霉素GA3在剂量（197,394和788 mg/kg）暴露条件下,小鼠脾脏、肝脏和心脏组织是否发生氧化应激.结果表明,394和788 mg/kg每千克体重bw剂量组脾脏超氧化物歧化酶、谷胱苷肽过氧化物酶活性有所下降,与对照组相比,分别降低了21.01%,29.02%和23.36%,35.03%,与对照组相比差异显著;肝脏超氧化物歧化酶、谷胱苷肽过氧化物酶活性分别降低了9.01%,13.05%和12.81%,16.17%,与对照组相比差异显著（P〈0.05,P〈0.01）.同时赤霉素GA3处理后丙二醛含量显著升高,394,788 mg/kg bw剂量处理组脾脏和肝脏分别升高了19.06%,23.61%和22.33%,26.39%,与对照组相比差异显著（P〈0.05,P〈0.01）;肾脏超氧化物歧化酶、谷胱苷肽过氧化物酶活性有所上升,与对照组相比,分别上升了22.34%和40.20%,丙二醛含量有所下降,与对照组相比分别下降了35.93%和30.05%;另外,赤霉素GA3处理后,对心脏的氧化应激作用与对照组相比差异不显著.表明赤霉素对小鼠不同组织器官的氧化应激表现不同,对肝脏、脾脏有氧化损伤作用,对心脏作用不明显.