二噁英半抗原中间体的合成研究

二噁英类化合物是一类重要的持久性有机污染物,它对环境及人体的危害引起了广泛关注。酶联免疫分析(ELISA)技术是实现高效检测环境中二噁英残留的重要方法,而酶联免疫分析的关键基础是半抗原的合成。对二噁英半抗原合成中的核心步骤进行了详尽地探索,确定了此类反应的最佳反应条件:常温、甲苯为溶剂、0.015 mol氢化钠为碱、催化剂15-冠-5-醚的加入量为n(15-冠-5-醚)∶n(4-氯-3-硝基苯甲醛)=0.02∶1。     

半抗原直接包被的四环素酶联免疫吸附分析法的建立

为建立更优的四环素（tetracycline,TC）酶联免疫吸附分析法（enzyme?linked immunosorbent assay,ELISA）,将TC 与蛋白质偶联制备人工完全抗原免疫BALB/c 小鼠,获得抗TC 的单克隆抗体（monoclonal antibody,MAb）。采用酸性高锰酸钾羧化酶标板,将TC 直接包被在酶标板上,并对ELISA 反应体系条件进行优化,构建一种半抗原直接包被的TC ELISA 检测方法。所制备的MAb 特异性良好,交叉反应率低。所构建的检测方法最低检测限IC10 值为0.306 ng/mL,半数抑制率IC50值为9.26 ng/mL,牛奶和水中加标回收率分别为96.46%～101.89%、96.84%～102.50%。与人工完全抗原包被的检测方法相比（IC10值：0.624 ng/mL,IC50值：28.24 ng/mL,牛奶和水中加标回收率分别为93.86%～105.12%、94.04%～105.56%）,检测灵敏度有明显提高,并可用于实际样品中TC 含量的检测,具备良好的应用前景。     

有机磷农药三唑磷半抗原合成与鉴定

以三氯硫磷、苯唑醇、6-氨基己酸为原料,采用3步反应合成三唑磷半抗原6-[O-乙基-O-(1-苯基-1H-1,2,4-三唑-3-基)硫代磷酰胺基]己酸,经质谱和1H-NMR鉴定表明,合成成功,为进一步制备三唑磷抗体奠定了基础。     

SPA用于丝素膜的生物改性研究

用生长因子RGD半抗原（GLY-ARG-GLY-ASP-SER-PRO-LYS)连接到卵清蛋白Ovalbumin(OVA)载体上诱发出了抗RGD抗体IgG，并用丝素溶液包埋SPA(Staphylo-coccal protein A，简称A蛋白或SPA)制成不溶性SPA丝素膜为材料，然后用诱发出的RGD抗体IgG结合到不溶性SPA丝素膜的表面，制成IgG-SPA丝素膜，再在其上结合粘附生长因子RGD，制成RGD-IgG-SPA丝素膜。利用这一丝素膜培养血管内皮细胞(Vas-cular Endothelial Cell，简称EC细胞)，用四甲基偶氮些盐比色方法(MTT法)检测细胞的生长增殖情况。结果表明，RGD-IgG-SPA丝素膜能有效促进EC细胞的生长。对不溶性SPA丝素膜和IgG以及IgG和RGD之间的生物结合力测定，表明其结合力远大于离解力。同时在细胞培养液中没有检测到丝素膜中SPA的渗漏。RGD-IgG-SPA丝素膜为其作具有的这些优良性质为血管支架打下了基础。     

环境荷尔蒙类物质2,4-二氯酚人工抗原的合成与表征

以环境荷尔蒙类物质2,4-二氯酚、对氨基苯甲酸等为起始原料,经重氮化反应合成了2,4-二氯酚半抗原。再经过混合酸酐法与载体蛋白BSA,成功合成了2,4-二氯酚人工抗原,为其免疫分析方法的建立提供了条件。产物经红外光谱、紫外光谱和核磁共振鉴定分析确定。     

溴氰菊酯人工抗原及多克隆抗体制备

以二溴菊酸和4-[(4-硝基苯)氧基[苯甲醛为原料经4步反应合成了溴氰菊酯半抗原1-氰基[4-(4-氨基苯)苯基]甲基-2,2-二甲基3-(2',2'-二溴乙烯基)环丙烷羧酸酯;用重氮化法将溴氰菊酯半抗原分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)相偶联制备免疫抗原和包被抗原,紫外吸收法估算偶联比分别为11:l和8:1;以BSA偶联物作免疫抗原免疫日本大耳白兔制备溴氰菊酯多克隆抗体,间接非竞争ELISA法测定两个抗血清效价分别为100000和80000,间接竞争ELISA法测定抗体特异性结果表明所制备的抗体测定溴氰菊酯的IC50值为0.16 mg/L,与其他供试农药的交叉反应率均≤1%.制备的溴氰菊酯人工抗原和多克隆抗体为研究建立溴氰菊酯农残免疫快速测定方法奠定了基础.     

农药人工抗原的合成研究进展

免疫分析法是以抗原、抗体的特异性识别和可逆性结合反应为基础,以抗体作为生物检测器而建立的一种灵敏、简便、快速的超微量分析方法。抗原的质量决定了抗体的特异性和亲和性,最终影响免疫分析的质量。在农药残留的分析中,建立免疫分析方法的关键是农药人工抗原的合成,包括半抗原的设计(强调连接臂的位置、长度、性质和功能基团的引入)、半抗原的合成、载体的选择、半抗原与载体的偶联方法和条件、最佳结合比的讨论、人工抗原的纯化与鉴定。     

克百威免疫半抗原的合成研究

以2，3－二氢－2，2－二甲基－7－7苯并呋喃酚为原料，在通光气条件下合成2，3－二氢－2，2－二甲基－7－苯并呋喃氯甲酸酯，该化合物与氨基己酸合成目标产物克百威免疫半抗原，2，3－二氢－2，2－二甲基－7－苯并呋喃基－N－（5－羧基戊烷）氨基、甲酸酯。     

免疫分析多残留同步法测定饲料中硝基呋喃类药物

目的建立酶联免疫吸附多残留同步法测定饲料中硝基呋喃类违禁药物残留的分析方法。方法采用5-硝基糠醛和对羧基苯肼反应合成含有硝基呋喃类共有结构的半抗原4-硝基呋喃甲醛-(4-羧基-苯基)-腙(4-nitrofuran formaldehyde-(4-carboxyl phenyl)hydrazon,NFHBA)。通过偶联载体蛋白牛血清白蛋白(albumin from bovine serum,BSA)后的免疫原NFHBA-BSA免疫新西兰大白兔,成功制备了特异性识别呋喃环位点硝基的多克隆抗体。结果该抗体对4种目前主要使用的硝基呋喃类抗生素药物:呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林、块喃妥因的检测半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别达5.2、64、26.6、4.2 ng/mL,饲料样品平均添加回收率均在80%-90%之间。结论该方法能达到产品检测要求,可用于饲料中硝基呋喃类药物多残留同步快速检测。