复合蛋白酶水解黑豆粕制备多肽的工艺优化

为充分利用黑豆粕中的蛋白质资源,研究了复合蛋白酶水解黑豆粕制备多肽的工艺路线。从蛋白酶的筛选入手,考察了不同蛋白酶对黑豆粕水解效果的差异,并通过复配比例优化了最佳复合蛋白酶的组成。采用单因素试验及响应面试验确定了复合蛋白酶水解黑豆粕的最佳工艺条件。结果表明:最佳复合蛋白酶为胰蛋白酶、碱性蛋白酶与桔青霉蛋白酶按酶活比1∶3∶2复配;最佳工艺条件为加酶量5 670 U/g,底物蛋白质量浓度40 g/L,pH 9.55,水解温度50℃,水解时间6 h。在优化的工艺条件下水解黑豆粕,多肽得率可以达到82.44%。水解液中多肽的相对分子质量均在7.8 kDa以下,大部分多肽的相对分子质量小于3.3 kDa;多肽基本上保持了黑豆粕蛋白的氨基酸组成,具有较高的营养价值。     

动物蛋白水解复合酶的研究

以酶解牛骨蛋白为对象,研究动物蛋白水解复合酶的配制并考察其适应性.实验结果表明,由中性蛋白酶、胰蛋白酶、风味酶等3种酶按酶活性1∶3∶2组合配制而成的复合酶,其酶解动物蛋白效果高于单一酶.     

海藻酸钠-胰蛋白酶微球的制备及药物释放性能

通过离子凝胶法制备出球形完好的海藻酸钠-胰蛋白酶微球.红外分析表明,微球中凝胶基质通过海藻酸钠的-COO-与Ca2+发生静电作用交联形成.SEM观察显示微球中存在蛋格结构及孔洞.考察了不同因素对微球载药率、包封率和体外释药率的影响.结果表明,海藻酸钠水溶液浓度越高释药率越低,当海藻酸钠与胰蛋白酶质量比为4,海藻酸钠水溶...     

胰蛋白酶酶解制备卵转铁蛋白源抗菌活性肽条件的研究

卵转铁蛋白具广谱抗菌性,现已成为生物医学领域研究的热点。以"两步醇析法"获得的卵转铁蛋白为研究对象,经胰蛋白酶酶解制备抗菌活性肽,优化酶解条件,并研究其对大肠杆菌的抗菌作用。结果表明,制备卵转铁蛋白抗菌肽抑菌效果最好的试验条件为:p H值8.5,温度55℃,底物浓度30 mg/mL,酶与底物浓度比1∶300(U/mg),酶解时间1.5 h,在该条件下进行酶解,得到的抗菌肽抑菌率为89.152%。     

胰蛋白酶直接水解牛乳的技术参数优化

以胰蛋白酶直接对牛乳中酪蛋白进行水解,以水解后的口感和组织状态为测定指标,利用单因素试验确定出牛乳较理想的水解参数范围值：时间20～40min,水解温度40-60℃和酶质量分数0．08％-0．30％。再以此范围值作为二次回归正交试验的上限和下限,以水解度为指标,进一步确定出实验条件范围内的最优组合为：水解时间为26min,60℃,酶用量为0．295％,此工艺条件下牛乳水解的组织状态、口感和水解度都较理想,其水解度为12．53％。     

鹿肉蛋白水解物的生物活性研究

以鹿肉为原料研究其蛋白水解物的生物活性.采用双酶组合水解,即先用胰蛋白酶再用木瓜蛋白酶,两种酶均按各自最适条件进行水解.用MTT法测定结果表明,鹿肉蛋白水解物具有明显的促进非洲绿猴肾细胞(Vero)和小鼠成纤维细胞L929增值的活性.     

大豆胰蛋白酶抑制剂的提取纯化及其对凡纳滨对虾类胰蛋白酶的抑制作用

凡纳滨对虾的虾头中类胰蛋白酶活性高,死后自溶引起的组织软化大大降低了其商品价值。为了减少品质下降带来的不利影响,通过大豆胰蛋白酶抑制剂来抑制凡纳滨对虾的类胰蛋白酶从而达到提高品质的目的。首先,通过30%~80%硫酸铵沉淀、Q-Sepharose F.F阴离子交换层析和Sephacryl S-100凝胶过滤层析从凡纳滨对虾中提取了类胰蛋白酶,其分子质量为32.6 k Da。通过粉碎、脱脂、0.15 mol/L Na Cl提取,再进行热变性、超滤、Sephacryl S-100凝胶过滤层析纯化得到大豆胰蛋白酶抑制剂,该抑制剂分子量为16 k Da,得率为28.95%,纯化倍数达12.51,为电泳纯。实验结果表明,该抑制剂能抑制凡纳滨对虾类胰蛋白酶的活性,其抑制类型为不可逆抑制。     

超高压结合酶法消减南美白对虾虾仁的致敏性

以南美白对虾虾仁为原料,研究超高压结合酶法对虾仁致敏性的消减效果。将南美白对虾去头、尾、壳、肠线后,采用超高压法和超高压结合酶法消减其致敏性,用间接酶联免疫吸附法检测致敏性消减效果,确定消减条件。结果表明：采用超高压法处理最佳条件为压力600 MPa、温度40 ℃、保压时间30 min,此条件下消减率为45.66%;超高压结合胰蛋白酶法最佳条件为压力200 MPa、温度40 ℃、保压时间30 min、胰蛋白酶加酶量3 000 U/mg,此条件下消减率为95.27%。由此可见,超高压法对虾仁致敏性有消减作用,超高压结合酶法对虾仁致敏性消减的效果更好。     

白姑鱼胰蛋白酶的分离纯化及其性质分析

本研究从白姑鱼幽门垂组织中提取胰蛋白酶粗酶,然后经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析及Sephacryl S-200凝胶过滤层析等分离纯化技术,得到一种阴离子型胰蛋白酶（命名为：Trypsin A）,并对该阴离子型胰蛋白酶进行鉴定及性质分析。结果表明：Trypsin A的分子质量约为28 kD,其最适反应温度为50 ℃,能在低于65 ℃条件下保持稳定;最适pH值为9.5,酸碱耐受范围为pH 9.5～11.0;Western blotting分析表明,白姑鱼阴离子型胰蛋白酶可以与抗鲫鱼胰蛋白酶抗体反应,符合胰蛋白酶活性区域的高度保守性;丝氨酸类蛋白酶抑制剂对白姑鱼胰蛋白酶具有抑制作用。     

响应面法对大豆胰蛋白酶抑制剂粗提工艺的优化

目的：对大豆胰蛋白酶抑制剂粗提工艺进行优化。方法：以提取液pH值、热变性温度和硫酸氨饱和度作为影响大豆胰蛋白酶抑制剂提取率的因素,通过单因素试验选取因素与水平,根据Box-Behnken中心组合试验设计原理,在单因素试验基础上采用三因素三水平响应面分析法,依据回归分析确定各工艺条件的主要影响因素,以大豆胰蛋白酶抑制剂提取率为响应值作响应面分析。结果：胰蛋白酶抑制剂提取的最佳工艺条件为提取液pH5.1、热变性温度72.8℃、硫酸氨饱和度54.5%,在此条件下,胰蛋白酶抑制剂的提取率达到86%。结论：采用响应面分析法可以对大豆胰蛋白酶抑制剂粗提工艺进行优化。