二重LAMP检测鸡蛋污染致病菌 |
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引用本文: | 赵军,陈泽平,李桢,宋小宁,李玉锋.二重LAMP检测鸡蛋污染致病菌[J].食品工业科技,2016(4):107-110,116. |
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作者姓名: | 赵军 陈泽平 李桢 宋小宁 李玉锋 |
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作者单位: | 西华大学食品与生物工程学院 |
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摘 要: | 为快速检测污染鸡蛋的致病菌,实验从鸡蛋蛋体表面得到2株菌X1、X2,结合16S r RNA克隆及质粒测序分子方法对2株菌分类分析,发现2株菌X1和X2分别为:蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus NC7401(AP007209)、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus(AP003088)。针对两种菌的nhe、nuc基因具有较强的保守性,设计2套环介导等温扩增(LAMP)引物。先进行反应体系优化,得到25μL LAMP反应体系最适温度为60℃、最适Mg SO4添加量为1.5μL,引物最适量为2.0μL。再进行二重LAMP鉴定2株污染鸡蛋的致病菌,发现目的菌X1和X2的特异性扩增结果为阳性,其他9株非目的菌扩增结果为阴性,其灵敏度检测限达10 fg/μL。此二重LAMP检测法有快速、特异、灵敏的特点,可快速检测食源性致病菌。
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关 键 词: | 鸡蛋 致病菌 16S rRNA 环介岛等温扩增技术 快速检测 |
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