羊乳婴幼儿配方粉中牛乳成分鉴别与测定模型的建立

为实现羊乳婴幼儿配方粉中牛乳成分的快速分析，建立羊乳婴幼儿配方粉中牛乳的液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)鉴别与测定模型。样品经胰蛋白酶水解，采用高分辨四极杆静电场轨道阱串联质谱（Quadrupole-Orbitrap Mass Spectrometer, Q Exactive, Thermo Scientific）结合蛋白数据库，筛选特征肽段。选择具有代表性的羊全脂乳粉、牛全脂乳粉和羊乳清粉、牛乳清粉，然后分别按不同的比例进行混合，LC-MS/MS测定，得到牛β-酪蛋白与牛全脂奶粉的换算系数k1为2.8343，牛β-乳球蛋白与牛全脂奶粉的换算系数k2为1.6542，牛β-乳球蛋白与牛乳清粉的换算系数k3为27.8598，通过换算系数构建特征肽与牛全脂奶粉和牛乳清粉的定量模型。结果表明，牛β-乳球蛋白和牛β-酪蛋白在20~1000 nmol/L范围内，线性关系良好，R2>0.999；方法的检出限为1.9 g/kg，定量限为6.4 g/kg；日内精密度为3.2%~8.1%，日间精密度为3.4%~7.3%，准确度为99.0%~103.0%；经三家实验室验证，方法的精密度为1.7%~6.9%；方法准确度为91.5%~103.0%；重复性相对标准偏差（r%）为4.3%~5.1%，再现性相对标准偏差（R%）为4.7%~5.7%。该模型可分别对羊乳婴幼儿配方粉中牛乳清粉和牛全脂乳粉进行鉴别与测定，两者之和即为牛乳含量。该模型极大的简化了前处理，具有操作简便、快速、方法实用性强等优点。

Identification and quantitative model establishment for cow milk components in infant and young children goat formulas