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共表达HAC1基因对重组毕赤酵母分泌表达葡萄糖氧化酶的影响
引用本文:顾磊,张娟,堵国成,陈坚.共表达HAC1基因对重组毕赤酵母分泌表达葡萄糖氧化酶的影响[J].食品与生物技术学报,2016,35(2):113-122.
作者姓名:顾磊  张娟  堵国成  陈坚
作者单位:江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122; 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122,江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122; 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122,江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122; 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122,粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江南大学,江苏 无锡 214122; 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122
摘    要:通过增强不可折叠蛋白质响应(UPR)信号途径以及研究不同培养温度下的影响,来提高重组葡萄糖氧化酶在毕赤酵母中的分泌表达。影响毕赤酵母外源蛋白表达的因素,主要为内质网中的折叠速率以及不可折叠蛋白积累造成的胞内胁迫压力。通过共表达HAC1基因对不可折叠蛋白信号通路进行调控,摇瓶中改造菌株PP-G-HAC1胞外酶活达到161 U/m L,相比于原始重组葡萄糖氧化酶菌株提高了34%。进一步研究不同温度下过量表达HAC1基因对菌株的生长和分泌外源蛋白的影响,菌株PP-G-HAC1在3 L发酵罐中28℃培养,酶活达到1 008 U/m L,胞外重组蛋白质达到14.43 g/L,相比原始菌株在相同条件下提高了3.12倍。

关 键 词:重组毕赤酵母  葡萄糖氧化酶  不可折叠蛋白响应  HAC1基因

Effects of Co-Expression of HAC1 on Glucose Oxidase Production in Recombinant Pichia pastoris
GU Lei,ZHANG Juan,DU Guocheng and CHEN Jian.Effects of Co-Expression of HAC1 on Glucose Oxidase Production in Recombinant Pichia pastoris[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2016,35(2):113-122.
Authors:GU Lei  ZHANG Juan  DU Guocheng and CHEN Jian
Abstract:
Keywords:
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