对抗氯霉素单克隆抗体4D10特性鉴定研究

目的对抗氯霉素单克隆抗体4D10进行纯化与特性鉴定，以获得可用于检测氯霉紊残留试剂盒的单克隆抗体。方法用两步硫酸铵法和G蛋白亲和层析法纯化单克隆抗体，用间接酶联免疫吸附试验、竞争ELISA等方法测定抗体效价、特异性、敏感性与亲和性以及抗体与其它氯霉素结构类似物的交叉反应率。结果纯化后抗体的纯度高达95％，对抗体进行相关性质的鉴定得出：4D10效价为1：2．56×105，其亲和力常数可达2×108M-1，该抗体与CAPBSA，CAPOVA有反应，与BSA、OVA无反应。与氯霉素琥珀酸钠、氯霉素反应，而与其它氯霉索结构类似物无交叉反应。结论抗氯霉索单克隆抗体4D10效价高、特异性强、亲和力高，可利用该抗体制备检测氯霉索残留的ELISA试剂盒。