非酿酒酵母Nakazawaea ishiwadae GDMCC 60786产乙酸乙酯的诱变菌株筛选及其安全性评价

为提升Nakazawaea ishiwadae GDMCC 60786产乙酸乙酯的能力，通过物理诱变常压室温等离子体和化学诱变甲基磺酸乙酯、亚硝基胍筛选突变菌株。利用三丁酸甘油酯初筛、摇瓶发酵二筛和外加底物发酵三筛。同时，对突变菌株进行遗传稳定性、溶血性和耐药性体外安全性评价。结果表明：对出发菌株进行诱变处理，最终获得1株高产乙酸乙酯、遗传稳定性良好及体外安全性良好的突变菌株N5，将该诱变菌连续传代5次，得到乙酸乙酯含量的平均值为764.52 mg/L，葡萄糖转化率达到38.22%，与出发菌株相比，乙酸乙酯提高了1.90倍，葡萄糖转化率提高了25.03%。外加乙醇后，突变菌株N5乙酸乙酯质量浓度为1 426.81 mg/L；但外加乙酸后，该菌株不生长，并失去产酯能力，表明其对乙醇耐受性强于乙酸。同时发现24 h时，突变菌株N5的酯酶、乙酰辅酶A和醇酰基转移酶活性均达到最大值。本研究构建了一套适用于该菌株的诱变体系。