| 重组大肠杆菌γ-谷氨酰转肽酶的pET载体的选择及乳糖诱导作用的初步研究 |
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| 引用本文： | 胥俊峰,贾晓鹤,张正平,殷志敏.重组大肠杆菌γ-谷氨酰转肽酶的pET载体的选择及乳糖诱导作用的初步研究[J].食品工业科技,2008(1):80-83. |
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| 作者姓名： | 胥俊峰 贾晓鹤 张正平 殷志敏 |
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| 作者单位： | 南京师范大学生命科学学院,江苏省分子医学生物技术重点实验室,江苏南京,210046 |
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| 基金项目： | 教育部资助项目
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江苏省教育厅重点项目 |
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| 摘 要： | 采用PCR技术以E.coliK-12基因组DNA为模板扩增出γ-谷氨酰转肽酶基因,克隆至原核表达载体pET28(a)和pET32(a)中,经测序鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3),借助SDS-PAGE分析方法,对于用乳糖诱导,由T7 lac启动子控制的重组目的产物蛋白的表达规律进行了优化研究.在对诱导条件进行优化控制的前提下,分析比较了乳糖诱导pET28(a)/]-ggt和pET32(a)/γ-ggt两种重组质粒表达大肠杆菌γ-谷氨酰转肽酶蛋白的可溶性及酶活.实验结果表明,对于T7lac启动子控制的重组目的产物,乳糖作为诱导剂也可以起到很好的诱导表达效果,低温培养下,乳糖诱导pET32(a)/γ-ggt重组质粒表达γ-谷氨酰转肽酶具有更高的蛋白可溶性和酶活. 杆茵BL21(DE3),借助SDS-PAGE分析方法,对于用乳糖诱导,由T7 lac启动子控制的重组目的产物蛋白的表达规律进行了优化研究.在对诱导条件进行优化控制的前提下,分析比较了乳糖诱导pET28(a)/]-ggt和pET32(a)/γ-ggt两种重组质粒表达大肠杆菌γ-谷氨酰转肽酶蛋白的可溶性及酶活.实验结果表明,对于T7lac启动子控制的重组目 产物,乳糖作为诱导剂也可以起到很好的诱导表达效果,低温培养下,乳糖诱导pET3
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| 关 键 词： | γ-谷氨酰转肽酶 克隆 pET28(a) pET32(a) 乳糖 诱导表达 重组质粒表达 转化大肠杆菌 谷氨酰转肽酶 原核表达载体 的选择 乳糖诱导 诱导作用 优化研究 expressions Comparison inducer lactose plasmids 培养 低温 表达效果 诱导剂 结果 实验 酶活 |
| 文章编号： | 1002-0306(2008)01-0080-04 |
| 修稿时间： | 2007年6月6日 |
Comparison expressions ofγ-glutamyl transpeptidase in Escherichia coli from two pET plasmids using lactose as inducer |
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| XU Jun-feng,JIA Xiao-he,ZHANG Zheng-ping,YIN Zhi-min.Comparison expressions ofγ-glutamyl transpeptidase in Escherichia coli from two pET plasmids using lactose as inducer[J].Science and Technology of Food Industry,2008(1):80-83. |
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| Authors: | XU Jun-feng JIA Xiao-he ZHANG Zheng-ping YIN Zhi-min |
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