高效液相色谱法测定预混合饲料中的25-羟基维生素D3

为测定预混合饲料中25-羟基维生素D3含量,建立并优化了高效液相色谱法(HPLC)。采用色谱柱为Thermo AQUASIL-C_(18)(100mm×3.0mm,3μm),流动相为甲醇和水,梯度洗脱,进样量为50μl,检测波长为264nm。25-羟基维生素D_3在(0.05～25)μg/ml线性良好,相关系数为0.999 8,检出限为0.2mg/kg,定量限为1mg/kg。方法批内回收率在72.2%～104.2%,相对标准偏差(RSD)在1.0%～5.3%;批间回收率在75%～103%,RSD在1.3%～4.4%。本方法快速简便,应用于实际样品检测,结果满意,适用于预混合饲料中25-羟基维生素D3的测定。