超声波对中性蛋白酶酶解谷朊粉影响的研究

以活性谷朊粉为原料,研究超声作用及超声功率对不同的底物浓度、酶浓度、反应温度、pH经中性蛋白酶水解的谷朊粉水解度的影响。结果表明,超声作用既不改变酶解反应的最适温度和pH,也不改变水解度与水解温度、pH、底物浓度、酶浓度之间关系曲线的变化趋势,但超声作用可明显提高水解度;200W的超声波对中性蛋白酶水解谷朊粉具有明显的促进作用。     

超声波对中性蛋白酶酶解谷朊粉影响的研究

以活性谷朊粉为原料,研究超声作用及超声功率对不同的底物浓度、酶浓度、反应温度、pH经中性蛋白酶水解的谷朊粉水解度的影响。结果表明,超声作用既不改变酶解反应的最适温度和pH,也不改变水解度与水解温度、pH、底物浓度、酶浓度之间关系曲线的变化趋势,但超声作用可明显提高水解度;200W的超声波对中性蛋白酶水解谷朊粉具有明显的促进作用。      

胰蛋白酶水解谷朊粉的酶解产物抗氧化性研究

研究了胰蛋白酶水解谷朊粉后酶解产物的抗氧化活性,在单因素实验基础上,运用响应面(RSM)对水解度、肽含量、还原力三个响应值进行分析,探讨酶解产物抗氧化活性最高的最佳水解条件。结果表明:各因素对提高水解度的重要性依次为pH>酶解时间>酶浓度>反应温度;最佳的实验条件为:谷朊粉浓度5%、酶浓度[E/S]29mg/g、pH10.5、反应温度45℃、反应时间2.7h,此时水解度21.4%,肽含量0.12mg/mL,还原力0.81,并通过实验验证了此结论。这说明小麦面筋蛋白经过胰蛋白酶水解后的酶解产物具有较好的抗氧化能力。      

酶解谷朊粉的研究进展

综述了近几年来酶解谷朊粉各方面的研究进展。通过酶法将谷朊粉改性,可以拓宽谷朊粉的应用领域,提高产品的附加值。     

微波处理对酶解谷朊粉的影响

以谷朊粉为原料,研究了微波预处理对中性蛋白酶水解谷朊粉水解度的影响。结果表明,微波作用不改变酶解反应的最适温度和pH,也不改变水解度与水解温度、pH、底物浓度、酶浓度之间关系曲线的变化趋势,但使谷朊粉酶解后的水解度提高了。在微波功率540W,作用时间120s的预处理后,中性蛋白酶水解谷朊粉的最佳工艺条件为:酶加量3%E/S,反应温度40℃,pH 8.0,底物量8%,水解时间2h,水解度为31.58%。     

谷朊粉酶解条件优化及其抗氧化活性

以溶解性为指标,采用单酶(Alcalase 2.4 L)和双酶(Alcalase 2.4 L+Flavourzyme 500 MG)2种方法水解谷朊粉,在单因素试验的基础上通过正交试验,优化了单酶和双酶水解的最佳条件,并分析了最优酶解条件下得到的2种产物的抗氧化活性、相对分子质量分布及其氨基酸组成。结果表明,单酶和双酶水解物的最大溶解性分别达到了61.38%和82.21%。水解物质量浓度为3.0 mg/m L时,单酶水解物的还原力、DPPH自由基、超氧阴离子、羟自由基的清除率分别达到0.81、71.82%、56.83%和70.82%,而双酶水解物相应的指标分别达到1.01、85.33%、74.84%和84.33%。结果表明,双酶水解不仅能提高谷朊粉的溶解性,而且也能明显提高其抗氧化活性。双酶水解物中小分子肽(分子质量1 500 u)和疏水性氨基酸的质量分数分别达到61.63%和33.74%,均高于单酶水解物,表明谷朊粉酶解物的抗氧化活性与小分子肽含量、疏水性氨基酸呈现正相关。     

谷朊粉酶解物对小鼠免疫功能的影响

研究了酶解谷朊粉小肽对小鼠免疫功能的影响.空白组饲粮中不添加谷朊粉或谷朊粉酶解物,对照组饲粮中添加未酶解的谷朊粉1 000 mg/(kg饲粮·d);Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组为试验组,饲粮中分别添加酶解谷朊粉500、750和1 000 mg/(kg饲粮·d),饲喂28 d后进行免疫指标测定.结果表明:Ⅳ组与其它各组相比,小鼠的SOD、GSH-PX、GLU、GPT、IgG、IgM、IL-2和IGF-I均提高显著,但IgA降低显著.添加酶解谷朊粉750 mg/(kg饲粮·d)对提高小鼠的免疫功能效果最佳.     

酶解谷朊粉-卡拉胶复合体系凝胶特性研究

采用物性仪研究了酶解谷朊粉-卡拉胶复合体系的胶凝条件和凝胶特性。结果表明,酶解谷朊粉为300 mg/mL时仍是松软的糊状形态,添加0.3%卡拉胶时凝胶成形较好;随着卡拉胶浓度或酶解谷朊粉浓度增加,凝胶的黏性和弹性持续提高,而硬度则在0.3%卡拉胶或250 mg/mL谷朊粉时达到最高点后逐渐下降;随着加热温度增加或加热时间延长,凝胶的质构特性均呈现先逐渐增加后又下降的趋势。综合分析可知,在酶解谷朊粉300 mg/mL、卡拉胶0.3%8、0℃加热30 min条件下形成的复合凝胶硬度(252.822 g)、黏性(128.112 g.s)和弹性(0.045)均达到了较高值。     

有限酶解对谷朊粉功能性质的影响

为了改善谷朊粉在水溶液中的分散特性,又保留其蛋白质大分子的功能性质,利用碱性蛋白酶对谷朊粉进行了有限水解,研究了谷朊粉的有限酶解条件对酶解物全成分的分散特性、乳化性、发泡性等功能性质以及水解度的影响。结果表明,酶解后谷朊粉在水中的分散性大大提高,而乳化能力和起泡特性则依底物浓度、酶解温度、加酶量和反应时间等因素发生不同的变化。综合评价结果可知,在谷朊粉浓度0.30 g/mL、酶解温度50℃、酶对底物的质量分数为0.75%、反应时间20 min条件下所得酶解物具有较好的功能特性,分散性为0.962,乳化能力为84.3 mL油/g蛋白,起泡性为52 mL。     

谷朊粉酶解条件的优化及其抗氧化活性的研究

以溶解性为指标,采用单酶(Alcalase 2.4 L)和双酶(Alcalase 2.4 L+Flavourzyme 500 MG)2种方法水解谷朊粉,在单因素试验的基础上通过正交试验,优化了单酶和双酶水解的最佳条件,并分析了最优酶解条件下得到的2种产物的抗氧化活性、相对分子质量分布及其氨基酸组成。结果表明,单酶和双酶水解物的最大溶解性分别达到了61.38%和82.21%。水解物质量浓度为3.0 mg/m L时,单酶水解物的还原力、DPPH自由基、超氧阴离子、羟自由基的清除率分别达到0.81、71.82%、56.83%和70.82%,而双酶水解物相应的指标分别达到1.01、85.33%、74.84%和84.33%。结果表明,双酶水解不仅能提高谷朊粉的溶解性,而且也能明显提高其抗氧化活性。双酶水解物中小分子肽(分子质量<1 500 u)和疏水性氨基酸的质量分数分别达到61.63%和33.74%,均高于单酶水解物,表明谷朊粉酶解物的抗氧化活性与小分子肽含量、疏水性氨基酸呈现正相关。     

超声波改性对小麦面筋蛋白溶解度影响的研究

研究超声波技术改变小麦面筋蛋白的功能特性。通过单因素试验,研究底物浓度、超声功率、超声时间及pH值对溶解度的影响,得出了最佳影响范围;根据中心组合一致精度的设计(Uniform precision)的中心组合试验设计原理对改性工艺进行优化,结果表明:当底物浓度为8.8%、超声功率为720W、超声时间为8min、pH值为8.5时,蛋白溶解度可达4.11mg/ml。     

超声波处理提高谷朊粉溶解度的工艺条件

以谷朊粉为原料,研究了利用超声波处理对谷朊粉溶解度的改善作用,通过pH值、离子强度、脉冲振幅、超声时间、脉冲on值和off值对谷朊粉溶解度的影响,确立了四因素三水平的正交试验,探讨了超声波处理提高谷朊粉溶解度的最佳条件。结果表明：各因素对提高谷朊粉溶解度的明显程度依次为脉冲振幅＞脉冲on值和off值＞超声时间＞pH值。正交试验分析表明,超声波处理提高溶解度的最佳作用条件为pH4.5、脉冲振幅60%、超声时间为120s、脉冲on值和off值分别为40s和20s。在最佳条件下,谷朊粉的溶解度为51.12mg/ml,与未处理时相比,溶解性提高到18.4倍,拓宽了谷朊粉的应用范围。     

酶法水解小麦面筋蛋白研究

分别采用Alcalase、Neutrase、Protamex、Flavorzyme、胃酶、木瓜蛋白酶对小麦面筋蛋白进行水解研究,结果表明,Alcalase能有效水解面筋蛋白,并确定其最佳水解条件:pH 9．0,温度60℃,底物浓度5％,酶浓度E/S为1％,即0．03AU/g蛋白,反应时间4hr左右,在此条件下,水解度可达 20％左右。     

Effect of Modified Wheat Gluten on Boiling Resistance Capacity of Pork Meatballs

The effect of the modified wheat gluten (MWG) extender, prepared by alcalase‐based hydrolysis and transglutaminase cross‐linking, on meatballs was analyzed in this study. Here, we studied the effect of MWG addition on the boiling resistance capacity of pork meatballs (MB‐MWG) at high temperature (100 °C) and increasing cooking time; meatballs with added soy protein isolates (MB‐SPI) and raw wheat gluten (MB‐WG) were used as references. The cooking loss, water‐holding capacity (WHC), and textural properties of meatballs were investigated. The results revealed that MB‐MWG showed lower cooking loss, which decreased by 49.16% compared to meatballs without added extenders when treated for 30 min. The WHC of MB‐MWG significantly increased from 80.68% to 95.42%. The hardness, springiness, and chewiness (textural properties) of MB‐MWG were also significantly increased by 97.05%, 6.68%, and 121.96%, respectively. The addition of MWG increased the cross‐linking in meatballs during the cooking process, as indicated by the higher G′. SDS‐PAGE indicated an obvious decrease in myosin heavy chain in MB‐MWG cooked for 30 min at 100 °C, which was attributed to the interaction of myofibrillar proteins in pork meat with MWG. The nuclear magnetic resonance T₂ relaxation time patterns indicated that MWG addition caused an increase in the bound water content, and decrease in the free water content, of meatballs. An analysis of the microstructures revealed that the MB‐MWG formed the most regular and compact network. Therefore, MWG could be used as an ingredient to facilitate the processing of meat products.     

超声波和糖基化复合改性对小麦面筋蛋白性质和结构的影响

采用超声波处理小麦面筋蛋白并经葡萄糖糖基化改性后,研究其溶解性和乳化性的变化,同时对改性小麦面筋蛋白的结构进行表征。结果表明,适当的超声波处理有利于小麦面筋蛋白的糖基化改性,40 k Hz、300 W超声波处理40 min的小麦面筋蛋白糖基化改性效果最为显著,其在等电点处的溶解性较对照组提高了82.15%,且乳化活性及乳化稳定性最高,分别达到56.82 m~2/g和36.27 min。适当的超声波处理使小麦面筋蛋白表面疏水性提高,而与葡萄糖接枝后,蛋白的表面疏水性降低。傅里叶变换红外光谱表明,小麦面筋蛋白以共价键的结合形式接入了葡萄糖分子,生成了糖蛋白。     

底物浓度对碱性蛋白酶水解面筋流变特性的影响

本文较系统地研究了Alcalase碱性蛋白酶催化不同浓度小麦面筋蛋白水解过程中酶解产物的表观现象、表观粘度、剪切应力和流变特性。研究结果表明:酶解体系中小麦面筋的浓度越高,p H值下降幅度越少,在反应刚开始的6 h内是p H值变化最明显的区间,固形物浓度越高的样品,越早进入变化平稳的阶段。随着固形物浓度的提升和酶解时间的延长,酶解液的水分活度有下降的趋势,且固形物浓度越大,水分活度下降幅度越大,下降速度越快。在整个反应过程中,各固形物浓度酶解物的表观粘度和剪切应力均会随着酶解时间的延长而不断下降;固形物浓度越大下降趋势越明显,且不同固形物浓度酶解液的表观粘度和剪切应力的大小始终保持40%32%24%16%8%。此外,研究发现Ostwald-dewaele模型可以很好的拟合碱性蛋白酶催化不同固形物浓度小麦面筋蛋白酶解液的流变特性。     

小麦面筋蛋白深度酶解过程中呈味物质变化趋势的研究

以麸皮和面粉制曲,利用米曲霉生长过程中产生的复合酶,对小麦面筋进行深度酶解,研究了产物的呈味变化趋势及酶解过程中蛋白质、氨基酸、总酸、总糖、肽的释放规律。酶解产物的鲜味、酸味随着酶解时间的延长不断增强,苦味、甜味不断下降。蛋白质回收率、氨基酸转化率、总酸在酶解的过程中逐渐增加,但是36h后增速均趋于平缓,总糖的含量不断下降。随着酶解时间的延长,大分子肽渐渐分解成小分子肽,主要表现为1000～5000u分子段的肽的含量减少和小于1000u分子段的肽的含量增加。     

超滤法分离富集谷朊粉抗氧化活性肽

为了研究谷朊粉酶解产物中发挥抗氧化活性的肽片段,采用截留不同相对分子质量的超滤膜对谷朊粉酶解产物进行初步分离富集,并通过测定各级多肽的亚铁离子螯合能力、对亚油酸的自氧化抑制能力以及对ABTS自由基的清除能力来评价其体外抗氧化能力.结果表明:抗氧化能力由弱到强依次为:大于10 000＜10 000～5 000＜小于5 000.对于相对分子质量在5000以下的组分,当质量浓度为0.2、0.4 mg/mL时,亚铁离子螯合能力是超滤前样品的2倍左右;对亚油酸自氧化的抑制能力在36 h后比其它相对分子质量片段的组分效果明显;而当质量浓度为4 mg/mL时,TEAC值达到1.45 mmol/L Trolox;并且由高效液相色谱法对其相对分子质量进行分析发现,小分子肽占了绝大部分,说明抗氧化肽主要集中在相对分子质量2 000以下.     

不同来源谷朊粉谷氨酰胺肽释放特性的比较分析

从国内谷朊粉生产厂家收集了12种商品谷朊粉,在对其进行基本组成分析基础上,研究了不同来源谷朊粉的酶解及谷氨酰胺肽释放特性。结果表明：所收集谷朊粉样品的蛋白质平均含量为77.59%,样品间差异较小（CV:2.68%）;淀粉含量差异较显著（CV:21.65%）;脂肪含量虽然较低（平均1.08%）,但样品间差异较大（CV:69.60%）;氨基酸组成中谷氨酸/谷氨酰胺平均含量较高,为412.58 mg/g蛋白,占总氨基酸组成的39.38%。综合考虑不同样品酶解产物中蛋白回收率、水解度及谷氨酰胺含量三个指标,以获得高谷氨酰胺含量的短肽为目的,最终确定1号（山东滨州）、9号（陕西宝鸡）、12号（河北邢台）样品为制备谷氨酰胺肽的理想原料,这三种样品的酶解产物中有效谷氨酰胺含量可达22%左右,水解度大于15%,蛋白回收率大于90%。