基于二氧化锰纳米片和核酸外切酶I构建荧光适配体传感器检测氯霉素

为创建食品中氯霉素的新型快速检测方法,以二氧化锰纳米片淬灭适配体的荧光,核酸外切酶I酶切放大荧光信号,构建了检测氯霉素的适配体传感器。结果表明:在适配体浓度50nmol/L,二氧化锰质量浓度0.05mg/mL,核酸外切酶用量0.4U/μL,酶切时间50min的最佳荧光检测条件下,线性范围为0.1~80.0nmol/L,检出限为0.08nmol/L。构建的检测方法具有操作简单,检测灵敏度高的优点,并实现了在食品样品中的准确检测。     

基于金属有机框架复合材料的适配体传感器在 真菌毒素检测中的应用研究进展

联合国粮食及农业组织数据显示, 全球约有25%的粮食及其食品受到了真菌毒素污染, 因此, 对真菌毒素的快速和现场检测至关重要。近年来, 基于金属有机框架(metal organic frameworks, MOFs)复合材料的适配体传感器发展迅速, 在简化检测流程、增加灵敏度、提高特异性、降低检出限以及缩短检测时间等方面展现出显著优势。MOFs作为传感器研究中的新兴材料, 具有高孔隙率、大比表面积、丰富的金属位点、可控的孔径、良好的生物亲和性以及易于功能化修饰等特性。本文综述了MOFs的合成方法及其复合材料的分类, 重点介绍了基于MOFs复合材料的适配体传感器在检测食品中各类真菌毒素的应用, 并对适配体传感器的未来发展与前景应用进行了展望, 以期为食品中各类真菌毒素适配体传感器的开发提供有价值的参考。     

基于金属有机框架的荧光适配体传感器检测红酒中黄曲霉毒素B1

该文利用金属有机框架（Metal-organic Framework,MOF）材料和荧光标记的核酸适配体构建一种基于光诱导电子转移的荧光适配体传感器用于黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1,AFB1）的检测。MOF材料为氨基功能化的奥斯陆大学66（Amino-functionalized University of Oslo 66,UiO-66-NH2）,标记有四甲基罗丹明（Tetramethylrhodamine,TAMRA）荧光团的核酸适配体（TAMRA-aptamer）通过π-π堆积作用吸附于UiO-66-NH2表面,由于光诱导电子转移使TAMRA-aptamer的荧光猝灭。加入目标物AFB1后,核酸适配体与AFB1特异性识别并结合,使核酸适配体从单链结构转变为稳定的内环结构。由于内环结构与UiO-66-NH2之间的结合能力较弱,光诱导电子转移被阻断,TAMRA-aptamer荧光恢复。该荧光适配体传感器用于AFB1检测,在1.00~100.00 ng/mL范围内荧光信号强度与AFB1浓度具有良好的线性相关性,相关系数的平方（R2）为0.994,检测限为0.50 ng/mL。该方法用于红酒中AFB1的测定,样品添加回收率为90.00%~101.00%。该方法操作简便、成本低、选择性好、灵敏度高,可用于红酒中AFB1的快速检测。     

鱼肉和鹅肉中氯霉素的比色适配体传感器快速检测

本文提出了一种新颖的比色适配体传感器用于快速检测鱼肉和鹅肉中氯霉素(Chloramphenicol,CAP)。本方法的建立是基于核酸适配体特异性结合目标物的高选择性能和氧化钯纳米颗粒(Pd O)标记聚合酶螯合物(En Vision,EV)的双重信号放大效应,它能特异性、灵敏性地快速检测样品中痕量氯霉素。EV上含有大约100个辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP),它能够高效催化底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)产生颜色变化,并且Pd O在一定程度上也能催化TMB出现蓝绿色,因此该方法可达到双重放大效果。同时,通过测定TMB吸光度的变化能对应计算真实样品中的氯霉素含量。结果表明,在最佳实验条件下,该方法具有较高的检测灵敏度并在0.02~150 ng/m L范围内具有良好的相关性,检测下限是0.01 ng/m L。此外,该方法已经成功地应用于分析鱼肉和鹅肉样品中的氯霉素,其结果与传统的酶联免疫吸附测定(ELISA)方法相一致。     

纳米生物传感器在氯霉素检测中的应用

利用pH 敏感的荧光指示剂F1300 可以量化ATP 合酶活性的特点,构建生物传感器,开发灵敏、特异、快速的氯霉素残留检测方法。将pH 变化敏感荧光物质F1300 标记到色素体(chromatophore)的内表面,然后,将β亚基抗体- 生物素- 链亲和素- 生物素- 氯霉素抗体系统连接到色素体上F0F1-ATPase 的β亚基上,该检测体系能与氯霉素相连接。采用微弱发光检测仪检测荧光值,根据荧光值确定氯霉素浓度。样品中氯霉素浓度越高表现出的总荧光值越低,反之亦然。该方法的检测限为1 × 10 － 11mg/mL,且检测操作仅需35min,能快速、高灵敏地检测氯霉素,具有很好的应用前景。     

基于核酸适配体检测动物性食品中氯霉素残留的研究进展

氯霉素是一种禁用于食品动物的广谱抗生素,建立对其残留的快速检测尤为重要;核酸适配体作为新型生物识别元件,稳定性好且易合成,结合核酸适配体对氯霉素进行残留检测是继传统抗体检测之后又一新的突破方向,因此具有良好发展前景。在此综述了近5年基于核酸适配体检测动物性食品中氯霉素残留的研究进展,主要包括比色分析法、荧光分析法、化学发光分析法、表面增强拉曼散射检测法以及电化学生物传感器法等,发现当前适配体在氯霉素残留检测领域缺乏系统深入研究,相关检测应用难以同时兼顾简单快速和灵敏准确的检测需求,特此比较和讨论不同分析方法,并分析其优缺点及发展趋势,以期为动物性食品中氯霉素残留的高效监管提供有益参考。     

基于核酸适配体和G-四链体免标记荧光分析法检测氯霉素

目的 基于核酸适配体和G-四链体(G-quadruplex,G4)结构建立一种免标记荧光分析法检测氯霉素(chloramphenicol, CAP)含量,应用于化学分析、环境检测、食品安全等领域。方法 G4探针和适配体(aptamer,AP)在Tris-HCl缓冲液中合成,由于G4探针与适配体的结合抑制了G4的形成,N-甲基卟啉二丙酸IX(N-methylmesoporphyrin IX, NMM)染料无法被G4结构增强,荧光强度较弱,加入CAP竞争结合适配体,使得G4探针结构改变,通过荧光强度产生的变化分析样品中的CAP含量。围绕G4检测探针进行系列优化,包括探针序列、Tris-HCl缓冲液体系中钾离子和镁离子浓度、G4探针浓度与AP浓度比例。结果 当CAP质量浓度在1～10ng/mL时,体系的荧光强度增长值(Y)与CAP质量浓度(X)呈线性关系,线性方程为Y=59.091X+1.733(r2=0.9939)。根据3倍相对标准偏差(3σ/K,n=11)计算该方法 检出限,为0.518ng/mL。本方法 对卡那霉素、链霉素和庆大霉素无荧光响应,具有良好选择性和特异性。结论 本方法 重复...     

Fe3O4@Au-Cu/金属有机框架纳米酶电化学传感器检测食品中亚硝酸盐

目的 基于类酶活性的自组装材料构建金属有机框架（Fe3O4@Au-Cu/MOF）实现食品中亚硝酸盐的检测。 方法 采用透射电子显微镜和傅里叶红外光谱对合成的Fe3O4@Au-Cu/MOF进行表征。利用循环伏安法,通过改变Fe3O4@Au-Cu/MOF添加量、温度、扫描速率以及pH值进行单因素和正交实验。根据最优体系对1~100 mmol/L的亚硝酸盐进行检测,绘制工作曲线,进行抗干扰实验和实际样品检测。 结果 合成的Fe3O4@Au-Cu/MOF具有催化活性高、暴露活性位点多和孔隙率高等优势。当Fe3O4@Au-Cu/MOF添加量为0.0075 g,温度为40°C,扫描速率为0.08 V/s,pH值为7时为最优检测体系。工作曲线为y=0.36118x+15.57962,R2=0.99603,检测限为1.6 μmol/L (S/N=3),具有较强的抗干扰性。在实际样品检测中,回收率为98.78%~102.58%,RSD小于4%。 结论 与现有方法相比,合成的Fe3O4@Au-Cu/MOF催化过H2O2产生氧化活性物质,促进亚硝酸盐氧化,增加体系中电荷移动的能力更强。该方法构建的电化学传感器具有可靠、方便、灵敏和成本低等特点,为食品中亚硝酸盐的检测提供了一种新的思路。     

基于新型金属有机框架模拟酶的电化学检测食品胆固醇体系的构建

基于金属有机框架具有模拟酶的特性,构建实时检测胆固醇电化学传感器。采用自组装的方法制备出新型的复合金属有机框架模拟酶(Fe₃O₄@Au/MOF)纳米粒子,其兼具了Fe₃O₄磁性粒子的可回收特点以及金纳米粒子的加速电子转移等优点。并利用红外光谱、透射电子显微镜以及X射线光电子能谱对制备成功的Fe₃O₄@Au/MOF的结构和形貌进行表征。借助Fe₃O₄@Au/MOF的类过氧化物酶双重催化性能使胆固醇氧化为胆甾烯三酮和H₂O₂,而H₂O₂在其进一步的催化下产生的具有氧化活性的羟基自由基可促进3,3′,5,5′-四甲基联苯胺发生氧化还原反应,进而增加了体系中电荷的移动。根据电信号的响应情况, 从而实现对胆固醇的快速定性和高效定量的检测。研究结果表明,采用循环伏安法测得优化检测体系为:反应温度为 50℃,Fe₃O₄@Au/MOF 添加量为0.0125g,扫描速率为0.10V/s,缓冲溶液pH=4；当胆固醇浓度处于0.001~1.500mmol/L时呈现良好的线性关系,线性回归方程为y=20.6401x+4.7722,R²=0.9956,最低检测限为2.7μmol/L；且检测体系具有良好的回收率和抗干扰性,在食品分析和生化分析等方面具有良好的应用前景。     

金属有机框架基电化学传感器在食品安全检测中的应用进展

为保障食品安全与人类健康,实现快速、准确现场检测食品中有害物质是控制食品质量的关键。电化学传感器因其响应速度快、灵敏度高、设备易于小型化等优势在快速检测领域具有一定的优势。但食品中有害物质的痕量检测需要更广检测范围和更低检测限,同时实际样品体系复杂,对传感器的抗干扰性提出更高的要求。金属有机框架(metal-organic framework, MOF)材料因其可调的孔隙结构、大比表面积、易于修饰等优点,能够有效提高传感器的灵敏度和选择性,因此,MOF基电化学传感器被广泛应用于食品中有害物质的检测。本文综述了MOF材料用于构建电化学传感器对食品中危害因素(兽药、农药残留、真菌毒素、重金属、食品添加剂)检测的应用进展,着重阐述了MOF材料在构建电化学传感器中的优势,以及复合材料修饰电极中MOF的作用,同时对MOF材料的不足进行了讨论,为进一步拓展MOF基电化学传感器在食品安全检测中的应用提供新的思路。     

基于ZnO纳米刷的展青霉素电化学适配体传感器的构建与应用

建立了一种基于刷状纳米级ZnO富集,适配体特异性识别的电化学传感技术用于果品中展青霉素(patulin,PAT)的高灵敏度检测。ZnO纳米刷的引入可以有效增大PAT特异性适配体的负载量,进而增强对待测体系中目标物PAT的识别和捕获能力,实现PAT高灵敏度检测。结果表明,该方法检测PAT的线性范围是0.5～1×10³μg/L,最低检出限为0.15μg/L,检测苹果汁和山楂片样品的平均加标回收率为94.75%～110.84%,对于赭曲霉毒素A具有较好的抗干扰能力。该方法结合可控形貌纳米材料富集了PAT适配体的生物识别能力,从而实现了对PAT的快速、准确、高灵敏度检测,为其他真菌毒素传感器的构建提供了一个新的思路。     

猪肉中氯霉素质控样品的制备及其应用

目的：以猪肉为代表基质制备氯霉素质控样品,并探究其在快速检测方面的应用。方法：称取适量新鲜猪肉,加入一定体积的氯霉素标准溶液,经绞碎匀浆、真空冷冻干燥、粉碎、过筛、包装等步骤制得质控样品。依据CNAS-GL003:2018《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》对质控样品进行均匀性与稳定性评价。结果：均匀性检验结果显示制备的低、高浓度氯霉素质控样品的F值均小于F0.05(9, 10),样品间不存在显著性差异,表明均匀性良好。稳定性检验结果显示各时间段的t值均少于t临界值,表明样品在8个月存储期间的稳定性良好。结论：通过该方法制得的质控样品可适用于日常快检工作的质量控制、产品验证、盲样考核等领域,且制备方式具有可复制性。     

牛乳粉中氯霉素残留分析标准物质的定值方法研究及应用

目的 建立一种基于液相色谱-串联质谱法的牛乳粉中氯霉素残留分析基体标准物质定值方法,并以此法用于该标准物质的均匀性、稳定性检验及定值.方法 牛乳粉加水复原后,用乙酸乙酯提取,经正己烷除脂,再用乙酸乙酯萃取,同位素内标法定量测定.结果 氯霉素在0.4～4.0ng/mL范围内线性关系良好,相关系数达0.999,平均回收率为...     

超高效液相色谱——三重四级杆质谱测定乳与乳制品中氯霉素的残留

建立了乳与乳制品中氯霉素残留的超高效液相色谱——三重四级杆测定方法。该方法采用电喷雾电离源、多重反应监测负离子模式,可对氯霉素残留进行定性和定量测定。该方法的检出限为牛奶0.05μg/kg,乳粉为0.1μg/kg,线性范围在0.4～30.0μg/L内的回归方程为y=798.97+1874.56x,r=0.9993,加标回收率75.0%～94.6%,相对标准偏差为4.2%～12.8%。该法具有样品处理简单方便,灵敏度高,分析时间短等优点,可以满足乳与乳制品中氯霉素残留的测定。     

Development of a homogeneous immunoassay based on the AlphaLISA method for the detection of chloramphenicol in milk, honey and eggs

BACKGROUND: A homogenous light‐induced chemiluminescence immunoassay was developed using AlphaLISA technology for the detection of chloramphenicol (CAP). This technology is based on two different kinds of bead, namely light‐sensitive donor beads and beads containing chemiluminescers, also called acceptor beads. A competitive CAP AlphaLISA method was established using artificial antigen‐coated acceptor beads, polyclonal antibodies, biotinylated goat anti‐rabbit IgG and streptavidin‐coated donor beads. RESULTS: The sensitivity of detection was 0.0086 ng mL^?1 and the working range was from 0.0096 to 25 ng mL^?1. The intra‐ and inter‐assay coefficients of variation were both below 10%. The average recovery rates at spiked levels of 0.05–10 ng mL^?1 were 103.2, 108.4 and 91.6% for milk, honey and eggs respectively. The data obtained from the samples showed good correlation with ELISA results. CONCLUSION: The CAP AlphaLISA method is highly sensitive, specific and rapid and is suitable for screening large quantities of samples. Copyright © 2012 Society of Chemical Industry     

2016~2018年云南省市售蜂蜜中氯霉素监测分析

目的 了解云南省部分地区销售的蜂蜜中氯霉素检出情况。方法 从商店、农贸市场、网店销售等不同销售渠道采集云南省主要蜜源地和消费市场上的蜂蜜96件, 按照《国家食品污染和有害因素风险监测工作手册》对蜂蜜中氯霉素残留进行检测, 依据2002年农业部235号公告《动物性食品中兽药最高残留限量》等对检测结果进行评价。结果 2016年到2018年连续3年均有样品检出氯霉素, 96件样品总计有27件检出氯霉素, 检出率28.1%。结论 云南省部分地区销售的蜂蜜中氯霉素残留情况较严重, 应引起相关部门重视。     

基于氨基化二氧化硅微球表面印迹聚合物高效去除水中氯霉素的研究

目的 制备可特异性识别氯霉素(chloramphenicol,CAP)的吸附剂,并对实际水样中的氯霉素进行快速吸附去除。方法 基于表面分子印迹技术(surface molecularly imprinting technique, SMIT),以氨基化二氧化硅(SiO₂-NH₂)微球为载体,α-甲基丙烯酸(α-methacrylic acid,α-MAA)为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(ethylene glycol dimethacrylate, EGDMA)为交联剂制备核壳结构的氯霉素分子印迹聚合物微球。采用计算机模拟分析氯霉素与功能单体之间的相互作用筛选合适的单体,确定模板分子和功能单体的比例,并考查吸附剂的形貌特征、吸附性能和稳定性。结果 模板分子和功能单体的比例为1:4,制备的吸附剂SiO₂-NH₂@MIP吸附容量为65.36mg/g,吸附行为符合Langmuir吸附等温线模型和准二级动力学模型,为单层化学吸附。经过5次吸附循环后,对CAP的去除率仍在94%以上。结论 本研究制备的聚合物...     

辽宁省熟肉制品中氯霉素残留检测结果分析

目的 了解2011年辽宁省餐饮业熟肉制品中氯霉素残留状况,为监管部门提供科学的理论数据.方法 采用多阶段分层随机抽样的方法在辽宁省五个城市中抽取熟肉制品162份.按照检测标准要求采用液相色谱-串联质谱法,以间位氯霉素为内标物进行测定.检出率的比较采用x2检验分析,P ＜0.05为差异有统计学意义.结果 162批样品中,有40批检测出氯霉素残留,检出率为24.7％.不同城市和不同品种间检出率存在统计学差异.结论 辽宁省熟食制品中氯霉素残留情况比较严重,应该引起监管部门的关注.