分离芸薹属植物基因组DNA的一种方法

介绍一种比目前较普遍使用的ＣＴＡＢ法能更好地分离植物基因组ＤＮＡ的方法。通过芸薹属不同植物和不同重量实验材料的多次试验，证明用该方法分离的基因组ＤＮＡ产率、纯度和分子量都较高，分离的ＤＮＡ可用于限制性酶切。这种方法也完全适用于其它植物基因组ＤＮＡ的分离。     

原生质体融合技术

原生质体融合技术是在没有细胞壁阻碍的条件下,由PEG(聚乙二醇)助融,使两个亲株整套基因相互接触、交换、组合,得到多种类型的重组子,从而获得新的优秀菌株的技术。该项技术在细菌、酵母菌、链霉菌和霉菌等方面的研究和初步应用,为工业微生物遗传育种,开辟了广阔的前景。     

细菌的原生质体融合

本文评论了有关细菌原生质体融合研究的进展,并报道了作者的部分研完工作。本文较充分讨论了原生质体融合的基本枝术步骤,包括出发株的选择,原生质体的制备,融合,再生,筛选和特性验证。介绍并推荐以育种为目的的该技术的较适使用条件。     

茶树菇原生质体制备及融合研究

本实验研究茶树菇原生质体制备的影响因素及茶树菇原生质体的融合过程。结果表明,酶、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂、pH值对原生质体的制备有显著的影响,其中温度、pH值对原生质体的制备影响最大。制备茶树菇原生质体的最佳条件为：1％纤维素酶和1％蜗牛酶（1：1）,酶解4h,酶解温度为28℃,渗透压稳定剂采用pH6．00．6mol／L甘露醇溶液。原生质体的融合采用30％PEG（MW4000）溶液和pH10．5O．2mol／LCaCl2溶液。     

细菌原生质体融合育种技术及其应用进展

原生质体融合技术是细菌遗传育种的有效方法之一,发展迅速,应用广泛。文中综述了亲本菌株选择性遗传标记方法、影响原生质体制备与再生因素、原生质体融合方法和条件。介绍了细菌原生质体融合技术在遗传育种中的应用,并展望了细菌原生质体融合技术的发展前景。     

芸薹属植物未成熟小孢子培养技术的研究和应用

从供体植株状态，取样，分离和培养方法，胚状体发生和小植株形成，再生植株性状表现等方面芸薹属植物未成熟小孢子培养技术。这一技术与诱变，基因转化，原生质体融合，性状遗传研究，育种方法结合，广泛应用于遗传和育种实践中。     

芸薹属种子贮藏蛋白质组分的比较研究

对组成芸薹属3个基本种和3个复合种的种子贮藏蛋白亚基组成进行了SDS-PAGE比较分析,结果表明：不同种间的种子贮藏蛋白具有一定的差异,表现出丰富的多态性;6个种共有24条亚基带,并各自具有特征蛋白谱带。利用贮藏蛋白亚基条带的信息,分析了种间的蛋白相似度,并进行了聚类分析。供试材料分为两类：Ⅰ类为白菜型油菜、甘蓝与甘蓝型油菜;Ⅱ类为黑芥、芥菜型油菜和埃塞俄比亚芥。     

茶树菇与鸡腿菇原生质体融合及再生

研究茶树菇与鸡腿菇原生质体制备、融合及再生。以菌龄4d 的菌丝体为原料,采用1% 果胶酶和1% 蜗牛酶混合酶液(体积比1:1),酶解4h,酶解温度为30℃,pH6.0 的0.6mol/L 甘露醇溶液为渗透压稳定剂,制备得到茶树菇与鸡腿菇原生质体。两种原生质体融合的最佳条件为：使用35% 聚乙二醇(PEG4000)和0.2mol/L CaCl₂ 溶液(pH10)为助融剂,30℃融合30min。利用灭活原生质体作为标记筛选出融合子,融合的细胞在培养基中实现再生,通过菌落表型的比较和拮抗实验验证再生出的为融合子。     

啤酒酵母原生质体融合株GR8的中试研究

啤酒酵母原生质体融合株GR8的中试表明:融合株GR8凝絮性较强(本斯值为3.0);以12oBx麦芽汁为培养基,用500L发酵罐在12℃下发酵15d,发酵度为69.6%;发酵液中的双乙酰、乙醛、总高级醇、乙酸乙酯和乙酸异戊酯的含量分别为0.0390mg/L,3.26mg/L,84.7mg/L,11.14mg/L和0.99mg/L。     

面包酵母原生质体融合

面包酵母（Saccharomyces cerevisiae）两亲株原生质体的制备,是用对数生长早期的细胞,在蜗牛酶和17%蔗糖、20u/ml青霉索的作用下完成的,3060分钟内原生质体的形成率达8592%．两亲株的原生质体在35%PEG（M．W．6000）,0.4M CaCI2条件下被诱导融合．融合频率为10－410－5．     

双亲灭活米曲霉原生质体融合中原生质体制备的研究

对双亲灭活米曲霉原生质体融合育种中原生质体制备的条件进行了研究,将菌丝的预处理与细胞壁的酶解合为一步,并讨论了DTT的加入量。结果表明,原生质体制备的最佳破壁酶为纤维素酶、溶壁酶、蜗牛酶3种酶混合浓度比为5:3:1;菌丝培养15h;酶解时加入3mol/L DTT;酶解2.5h;0.8mol/L NaCl作为渗压稳定剂。所得双亲菌株原生质体的融合率为3.31%。     

采用原生质体融合法选育优良啤酒酵母

采用原生质体融合法改造啤酒酵母，使其不改变啤酒发酵特性的同时具糖化大分子糊精的能力，提高了啤酒发酵度，生产出高发酵度，淡爽型普通啤酒。     

原生质体融合技术在L-谷氨酸菌株育种中的应用

本文阐述了原生质体融合技术在L-谷氨酸高产菌诱变育种中的应用方法和步骤,选育得到温敏型谷氨酸菌种产酸153g／L的菌株FM00—189。     

原生质体融合技术及其在酿酒酵母菌株选育中的应用

酵母是发酵工业的灵魂，优质酵母对于其产品的产量、质量、生产效率等方面都有决定性的作用。论述了这些年新兴的酵母育种技术－原生质体融合技术在酿酒酵母菌种选育中的原理、应用和发展方向。     

利用原生质体融合技术构建梨酒酵母工程菌

以菌株酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae YDJ05及产香酵母Issatchenkia orientalis YS03为融合亲本X和Y,通过原生质体融合技术构建适合梨酒酿造的酵母工程菌,研究结果表明:利用EMS诱变亲本菌株Y,得到了一株精氨酸营养缺陷型菌株,亲本菌株X和Y采用蜗牛酶液在35℃下处理100min,得到菌株X、Y的原生质体融合率分别为93.6％、94.2％,再生率分别为27.8％、31.6％.以加热的方式灭活亲本菌株X,灭活时间为14min.在以PEG为促融剂的条件下对两株菌进行原生质体融合,经过优选得到融合子D J02,其产酒精率、产香率等指标最优,分别达到了9.87％、0.37g/L.     

原生质体融合技术在微生物菌种选育中的应用

对原生质体融合技术的关键步骤、影响原生质体融合和分离的因素进行了综述.就原生质体融合技术在微生物育种技术上的应用前景进行了分析.