雷帕霉素预处理对大鼠肾缺血再灌注诱发肺损伤的影响

目的探讨雷帕霉素（RPM）预处理对大鼠肾缺血再灌注诱发肺损伤的影响及相关机制。方法采用随机数字表法将60只大鼠分为：假手术组（S组）、肾缺血再灌注组（I/R组）、RPM预处理组（R组）,每组20只。采用右肾切除和左肾缺血45 min行再灌注的方法制备肾缺血再灌注损伤模型。R组缺血前给予RPM（10 mg·kg^-1·d^-1）×3 d,最后1次术前2 h灌胃。再灌注6 h后经心脏采集血样,检测血清SOD活性、MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α的水平;取肺组织,光镜下观察肺组织病理学结果,并测定肺组织湿干比重（W/D）。结果与S组比较：其他2组肺W/D、血清MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α的水平明显升高（P〈0.05）,SOD活性明显降低（P〈0.05）;与I/R组比较：R组肺W/D、血清MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α的水平明显降低,SOD活性明显升高,肺组织病理学损伤明显减轻（均P〈0.05）。结论 RPM预处理可减轻大鼠肾缺血再灌注诱发肺损伤,其机制可能与抗氧化应激和抗炎反应有关。     

葛根素预处理对缺血再灌注心肌脂质过氧化与内质网应激的影响

目的:观察葛根素预处理对缺血再灌注(I/R)大鼠心肌内质网应激(ERS)与细胞凋亡的影响。方法:采用随机数字表法将24只大鼠分为假手术组(SH组),缺血再灌注组(I/R组),葛根素预处理组(PU组)三组,每组8只。实验结束测定心肌丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量以及GRP78 mRNA、CRT mRNA的表达。结果:与SH组比较,其余两组GRP78 mRNA与CRT mRNA表达、心肌MDA含量均明显增加,而心肌SOD水平明显降低(P<0.05)。与I/R组比较,PU组GRP78 mRNA与CRT mRNA表达、心肌MDA含量均降低,且心肌SOD水平明显增加(P<0.05)。结论:葛根素预处理可能通过减轻心肌脂质过氧化反应,抑制I/R导致的过度ERS而发挥心肌保护作用。     

罗格列酮对大鼠肾脏缺血再灌注损伤保护作用机制的研究

目的 研究罗格列酮预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探讨其保护机制.方法 建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,将40只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为5组：假手术组（S组）、缺血再灌注组（IR组）、罗格列酮＋缺血再灌注组（RIR组）、GW9662＋缺血再灌注组（GIR组）、罗格列酮＋GW9662＋缺血再灌注组（RGIR组）,每组8只.各实验组均于术后6、24、72ah抽取下腔静脉血,并于术后24 h采集肾脏组织.HE染色法光镜下观察肾组织形态、测定血清肌酐（Cr）含量、ELISA法测定血清丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD） 含量、免疫组织化学法观察肾组织中细胞间黏附分子（ICAM-1） 表达.结果 IR组肾小管评分及血清Cr、MDA含量较S组明显升高,血清SOD活性较S组降低,肾组织ICAM-1表达较S组增加（均P＜0.05）.RIR组肾小管评分及血清Cr、MDA含量较IR组下降,血清SOD活性较IR组升高,肾组织ICAM-1表达较IR组下降（均P＜0.05）.GIR组与IR组肾小管评分及血清Cr、MDA、SOD比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）.RGIR组与RIR组比较,肾小管评分及血清Cr、MDA含量显著上升,血清SOD活性下降,肾组织ICAM-1表达显著增高（均P＜0.05）.结论 罗格列酮预处理能通过激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator activated receptor gamma,PPARγ）保护缺血再灌注损伤的肾脏,其作用机制可能包括抗氧化应激和抗炎作用.     

损伤散对急性脊髓损伤大鼠肢体运动功能及Fas,FasL表达的影响

目的观察损伤散对急性脊髓损伤大鼠运动功能和受损脊髓组织中凋亡相关因子(Fas)及其配体(FasL)表达的影响,并探讨其作用机制。方法使用改良Allen’s法制作大鼠急性脊髓损伤模型,将96只大鼠随机分为空白组、模型组和损伤散组3组,致大鼠脊髓T12—L1节段中度撞击伤,伤后分别于2,8,24 h及7 d,比较各组脊髓损伤大鼠的Tarlov评分和损伤脊髓组织中Fas,FasL免疫阳性细胞表达。结果造模后24 h及7 d,损伤散组Tarlov评分显著高于模型组,差异有统计意义(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,损伤散组造模后8,24 h及7 d Fas,FasL免疫阳性细胞表达差异有统计意义(P<0.05或P<0.01)。结论损伤散能促进急性脊髓损伤大鼠运动功能的恢复,使受损脊髓组织中Fas及FasL免疫阳性物质表达降低,对受损脊髓组织有保护和修复的作用。     

不同缺血时间对脑缺血/再灌注损伤大鼠神经行为学的影响

为探讨不同缺血时间对脑缺血/再灌注损伤大鼠神经行为学的影响,利用线栓法复制脑缺血/再灌注损伤模型,考察缺血1 h、2 h和4 h后再灌注1 d、4 d、7 d和14 d的不同时间点时大鼠神经功能缺损评分,TTC染色测梗死面积.结果显示缺血2 h组存活率较高,为中度神经功能缺损程度.结论为缺血2 h为最适合的造局灶性缺血/再灌注模型的缺血时间,可以为评定后续实验中药物药效指标和选择缺血时间窗提供重要参考.     

血红素氧合酶-1在大鼠烧伤后心肌再灌注损伤中的表达及意义

目的研究血红素氧合酶（HO-1）对烧伤后大鼠心肌缺血再灌注损伤中的表达。方法 32只大鼠按随机数字表法分为烧伤组、热预处理组、热预处理＋ZnPP组、热预处理＋ZnPP＋Hemin组,每组8只。所有大鼠心脏进行离体Langendorff恒压灌流,分别记录大鼠心电图、左室压（LVDP）、左室内压变化速率（±dp/dtmax）,检测CK、心肌梗死面积及心肌组织HO-1mRNA和蛋白水平。结果大鼠烧伤后心脏缺血-再灌注可造成明显损伤,热预处理可明显减轻心脏的缺血-再灌注损伤、缩小心肌梗死面积、改善心肌收缩力;ZnPP可降低HO-1水平,抑制预处理对心脏的保护作用;Hemin通过增加HO-1水平,取消ZnPP对预处理心脏保护的抑制作用、改善心肌收缩、减少梗死面积。结论烧伤后再灌注可对心脏产生损伤,热预处理可减轻心脏再灌注损伤,HO-1可能参与其保护作用。     

保护素D1对大鼠全脑缺血再灌注损伤海马Caspase-3表达及神经元凋亡的影响

目的 评价保护素D1（PD1）对大鼠全脑缺血再灌注损伤海马Caspase-3蛋白表达及神经元凋亡的影响.方法 将108只健康成年雄性SD大鼠随机分为3组：假手术组（S组,n=36）仅游离双侧椎动脉和颈总动脉;脑缺血再灌注损伤组（IR组,n=36）和保护素D1组（P组,n=36）医采用四血管阻断法建立大鼠全脑缺血再灌注损伤模型.P组于再灌注即刻经侧脑室注入PD1 100 ng,S组和IR组注入等容量生理盐水.各组分别于再灌注2、6、12、24、48、72 h（T1-T6）随机取6只大鼠处死,取海马组织,采用Western-blot法和RT-PCR法检测海马Caspase-3蛋白和Caspase-3 mRNA表达,采用流式细胞仪检测海马神经元凋亡情况.结果 与S组比较,IR组、P组海马Caspase-3蛋白和Caspase-3 mRNA表达均上调（P〈0.05）;与IR组比较,P组海马Caspase-3蛋白和Caspase-3 mRNA表达均下调（P〈0.05）.S组各时点均未见神经元凋亡,IR组和P组于T1时凋亡率开始上升,T4时达峰值,T5时开始下降,且P组各时点凋亡率均明显低于IR组（P〈0.05）.结论 PD1可抑制大鼠全脑缺血再灌注损伤海马神经元凋亡,其机制可能与下调Caspase-3蛋白和Caspase-3 mRNA表达有关.     

环磷腺苷葡胺后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察环磷腺苷葡胺（MCA）对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法40只大鼠按随机数字表法分为空白对照组、缺血再灌注损伤组（I／R组）、缺血后处理组（IPO组）和MCA后处理组（MCA组）,每组10只。空白对照组仅行左冠状动脉左前降支套线而不阻断150min,I／R组阻断30min、再灌注120min,IPO组在再灌注初短暂缺血10S,再灌注10S、反复6次、处理后同I／R组,MCA组在再灌注前10min经静脉给予环磷腺苷葡胺注射液5mg·kg-1,其他处理同I／R组。再灌注120min后,测各组血清SOD活性及血清MDA含量、心肌ATP酶活性和心肌细胞凋亡指数（AI）,电镜下观察细胞超微结构变化。结果与I／R组比,IPO组和MCA组血清SOD活性增高,血清MDA含量降低,ATP酶活性增高,AI减少显著,细胞结构损伤减轻。结论MCA对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与改善能量代谢障碍有关。     

从PI3k/Akt通路研究山茱萸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用机制

目的:了解山茱萸对大鼠心肌缺血再灌注的保护作用机制。方法:选取84只雄性Wistar大鼠,按随机数字表法分三组,分别为对照组、缺血再灌注组(I/R组)和治疗组,每组28只。采用结扎大鼠冠状动脉左前降支法制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,对照组在左冠状动脉前降支处仅穿线不结扎,I/R组在再灌注前5 min时尾静脉注射0.9%氯化钠注射液1 m L,治疗组在再灌注前5 min时尾静脉注射山茱萸药液1 m L,观察记录各组大鼠心肌缺血情况和心电图信息。结果:与对照组比较,I/R组及治疗组大鼠FS和EF均降低,LVDd、LVESV、LVEDV均上升;与I/R组比较,治疗组FS和EF均上升,LVDd、LVESV、LVEDV均下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:山茱萸及其有效成分通过PI3K/Akt通路,对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护机制的实现起到了十分重要的作用。     

维生素E对皮瓣缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察维生素E对大鼠腹壁浅血管皮瓣缺血再灌注损伤的保护作用。方法:利用雌性Wistar大鼠制作腹壁浅血管为蒂的缺血再灌注皮瓣模型并进行试验,将30只Wistar大鼠按随机数字表法分为假手术组、生理盐水组和维生素E组,每组10只。假手术组不做缺血再灌注处理,维生素E组术前1 h腹腔注射维生素E 100 mg/kg,生理盐水组术前1 h腹腔注射等体积生理盐水。生理盐水组和维生素E组于皮瓣缺血2 h再灌注1 h后、假手术组于术后3 h,均取皮瓣中段边缘全层皮瓣组织1 cm×1 cm,检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,光镜下观察病理组织变化。结果:生理盐水组MDA含量明显高于假手术组和维生素E组,比较差异均有统计学意义(P<0.05);生理盐水组SOD活性明显低于假手术组和维生素E,比较差异均有统计学意义(P<0.05);假手术组未见明显组织创伤改变,生理盐水组皮瓣组织损伤较明显,而维生素E组明显好于生理盐水组。结论:维生素E具有抗氧自由基,减轻自由基的脂质过氧化作用,对缓解大鼠皮瓣的缺血再灌注损伤起着一定的保护作用。     

大鼠心脏缺血预适应延迟保护模型的建立

目的建立、评价大鼠在体心脏缺血预适应延迟保护模型。方法将24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组,每组8只。缺血-再灌注组：大鼠结扎冠脉左前降支,缺血45 min后剪断结扎线再灌注3 h;假手术组：缺血-再灌注前24 h给大鼠行开胸手术,但不阻断冠脉血流;缺血预适应组：缺血-再灌注前24 h给大鼠行心脏缺血预适应,阻断冠脉左前降支造成心脏缺血3 min,再灌注5 min,反复4次。测定3组大鼠心肌梗死面积及血清肌酸激酶（CK）活性以评价心肌损伤的程度。结果缺血-再灌注组心肌梗死区面积为（0.18±0.03）cm2;缺血预适应组心肌梗死区面积为（0.11±0.02）cm2,2组比较差异有统计学意义（P〈0.01）,假手术则对心肌梗死面积则无显著影响。与缺血-再灌组比较,缺血预适应组能显著减少血清CK的释放（P〈0.01）,假手术则对血清CK水平无显著影响。结论已建立的大鼠心脏缺血预适应延迟保护模型具有显著的心肌保护作用,可为缺血预适应的研究提供稳定的在体模型。     

微囊化兔坐骨神经组织细胞移植对脊髓损伤大鼠比目鱼肌FasL及Caspase-3表达的影响

目的观察用微囊化兔坐骨神经组织细胞移植治疗脊髓损伤对比目鱼肌凋亡相关蛋白FasL及Caspase-3表达的影响,探讨微囊化异种组织细胞移植治疗脊髓损伤的可能机制。方法家兔8只用于制备兔坐骨神经组织细胞悬液。成年SD大鼠80只按随机数字表法分为A组（正常组8只）、B组（微囊化兔坐骨神经组织细胞移植组24只）、C组（兔坐骨神经组织细胞移植组24只）和D组（单纯损伤组24只）。B、C及D组大鼠于T10脊髓行左半横断伤后,立即于损伤处分别植入明胶海绵吸附的10μL微囊化坐骨神经组织细胞、明胶海绵吸附的10μL坐骨神经组织细胞以及空明胶海绵。分别于术后1、3、7、14 d（每个时相取6只大鼠）取损伤侧比目鱼肌肌腹,A组（每个时相取2只大鼠）取相应部位的比目鱼肌肌腹。应用HE染色观察肌细胞微观形态、免疫组织化学染色观察比目鱼肌凋亡相关蛋白FasL及Caspase-3的表达情况。结果脊髓半切损伤后B组肌纤维萎缩始终不明显,而C、D组随时间的进展肌萎缩越来越明显。脊髓损伤1 d后比目鱼肌FasL及Caspase-3阳性表达升高,至第7天达高峰,第14天维持在较高水平;B组FasL及Caspase-3的表达明显低于同时间点的C组及D组（P〈0.01）。结论微囊化兔坐骨神经组织细胞移植治疗脊髓损伤可抑制比目鱼肌FasL及Caspase-3的表达,并延缓肌萎缩。     

甘利欣对风湿性心脏病二尖瓣置换术围术期CGRP与ET-1的影响

目的探讨甘利欣预处理对心脏手术围术期血浆降钙素基因相关肽（CGRP）、内皮素-1（ET-1）水平的影响。方法选择60例风湿性心脏病二尖瓣病变患者,ASAⅡ-Ⅲ级,择期在体外循环下行二尖瓣置换术,按随机数字表法分为甘利欣组和对照组,每组30例。麻醉诱导插管后,甘利欣组用10%葡萄糖注射液100 mL内加甘利欣2.5 mg.kg-1静脉泵入,对照组用10%葡萄糖注射液100 mL静脉泵入,2组液体均在麻醉诱导后至手术切皮前期间20 min内泵完。分别于麻醉诱导后（T1）,主动脉阻断后15 min（T2）、主动脉开放后15 min（T3）、2 h（T4）、24 h（T5）时间点取中心静脉血样,检测CGRP与ET-1水平。结果主动脉阻断后及主动脉开放后24 h内2组患者CGRP均较麻醉诱导后明显升高（P〈0.01）,甘利欣组明显高于对照组（P〈0.05）;2组ET-1主动脉阻断后均下降,T1、T2时间点2组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）,主动脉开放后24 h内2组患者ET-1逐渐上升,T4、T5时间点均明显高于麻醉诱导后水平（P〈0.01）,主动脉开放后24 h内甘利欣组低于对照组（P〈0.05）。结论甘利欣预处理可提高心脏缺血期及再灌注期血浆CGRP及降低再灌注期血浆ET-1。     

依达拉奉对急性脊髓损伤大鼠的抗细胞凋亡和神经保护作用的实验研究

目的探讨依达拉奉对急性脊髓损伤大鼠的抗细胞凋亡和神经保护作用机制。方法将120只SD大鼠随机分为3组：假手术组（n=20）、对照组（n=50）和治疗组（n=50）,采用改良的Allen法,制成中度脊髓损伤大鼠模型。假手术组行椎板切除,不用任何药物;治疗组注射依达拉奉3 mg.kg-1,每隔12 h重复一次,直至相应时点;对照组仅给予等量生理盐水。各组于术后6、24、48、72、120 h 5个时点分别取样检测脊髓组织含水量及丙二醛（MDA）的含量;TUNEL法检测各组脊髓中的神经细胞凋亡数;免疫组化检测各组脊髓组织Bcl-2基因表达。结果治疗组各时点脊髓组织含水量、MDA含量及细胞凋亡数均低于对照组（P〈0.05或P〈0.01）,Bcl-2蛋白表达显著高于对照组（P〈0.01）。结论依达拉奉能降低脊髓组织MDA含量,减轻脊髓水肿,上调Bcl-2表达,抑制细胞凋亡,减轻脊髓继发损伤,从而达到其对大鼠脊髓损伤的抗细胞凋亡和神经保护作用。     

依达拉奉对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用

目的 探讨依达拉奉对心肌缺血再灌注的保护作用及机制.方法 将50只成年SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、再灌注组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组10只.建立大鼠急性缺血再灌注模型,描记术中心电图变化.假手术组：开胸,分离左冠状动脉并穿线,不结扎,旷置225 min;再灌注组：缺血45 min,再灌注3 h,灌注前1 min将生理盐水按0.2 mL·kg-1经右股静脉注入;低剂量组：再灌注前1 min,将依达拉奉按3 mg·kg-1经右股静脉注入;中剂量组：灌注前1 min将依达拉奉按6 mg·kg-1经右股静脉注入;高剂量组：灌注前1 min将依达拉奉按9 mg·kg-1经右股静脉注入.于再灌注末测定血清肌钙蛋白、心肌组织Ca2＋、SOD、MDA及Na＋-K＋-ATPase 、Ca2＋-ATPase的含量或活性.结果 再灌注组与低剂量组、中剂量组、高剂量组相比,再灌注后ST段回落程度较低、室性心律失常发作例数稍高,但4组间比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）.低剂量组、中剂量组和高剂量组的血清肌钙蛋白明显低于再灌注组（均P＜0.05）;中剂量组、高剂量组及再灌注组血清肌钙蛋白明显高于假手术组（P＜0.05或P＜0.01）.与假手术组比较,再灌注组心肌组织MDA活性、Ca2＋含量明显增高,SOD活力及Na＋-K＋-ATP酶、Ca2＋-ATP酶活性明显降低（均P＜0.05）;与再灌注组比较,低剂量组、中剂量组和高剂量组的MDA活力及Ca2＋含量降低,SOD活力及Na＋-K＋-ATP酶、Ca2＋-ATP酶活性明显增加（均P＜0.05）.结论 在再灌注前注射依达拉奉可减轻心肌缺血再灌注损伤.其作用机制是有效地清除氧自由基、提高机体抗氧化应激能力.     

黄精多糖预处理对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的研究黄精多糖（Polygona-Polysaccharose,PSP）预处理对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧（anoxia/reoxygen-ation,A/R）损伤的保护作用及与其抗氧化作用的关系。方法实验用SD新生大鼠（出生1~3 d）20只,雌雄不拘,常规方法培养心肌细胞,在培养48 h后按随机数字表法分为4组（每组重复实验6次）：正常对照组（Control组）、A/R组、缺氧预处理（anoxia preconditioning,APC）组（APC＋AR组,3次短暂缺氧复氧,再进行A/R操作）、PSP预处理组（PSP＋A/R组）。对以下指标进行检测：细胞存活率（MTT法）,培养液中乳酸脱氢酶（LDH）活性、脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）活性;心肌细胞凋亡率（流式细胞仪）。结果与对照组比较,A/R组心肌细胞存活率、细胞培养液中SOD活性均明显降低（均P〈0.01）,而细胞培养液中MDA含量、LDH活性及心肌细胞凋亡率均明显增加（均P〈0.01）。与A/R组比较,APC＋A/R组与PSP＋A/R组心肌细胞存活率、细胞培养液中SOD活性均明显增加（均P〈0.01）,同时细胞培养液中MDA含量、LDH活性及心肌细胞凋亡率均明显降低（均P〈0.01）。与APC＋A/R组比较,PSP＋A/R组心肌细胞存活率、细胞培养液中MDA含量及LDH、SOD活性和心肌细胞凋亡率差异均无统计学意义（均P〉0.05）。结论 PSP预处理可减轻心肌细胞A/R损伤,具有模拟APC作用,其机制可能与PSP的抗氧化作用有关。