紫外伤害培养对酵母水解液紫外吸收性能的影响

研究了紫外伤害培养对酵母菌生长繁殖的影响及紫外伤害培养后酵母细胞的酶水解条件和酵母水解液的紫外吸收性能.实验结果表明酵母菌紫外伤害培养时间为60h～72h.紫外伤害培养后酵母细胞的最佳酶水斛条件为质量分数为10%的酵母细胞悬浮液中添加质量分数为2%的蛋白酶(细胞干重),pH6.5,52℃振荡酶水斛26h.紫外伤害培养的酵母细胞经酶水解离心后,上清液稀释10倍测定OD365为0.349,是未经紫外伤害培养的酵母菌酶水解液的3.46倍.波长326Bm～400nm(防晒黑区)的紫外吸光率>95%.说明紫外伤害培养后的酵母细胞酶水解液是极具开发价值的UVA生物吸附剂.     

鸭骨泥酶解条件的优化

以鸭骨泥为原料,通过单因素实验确定最适用酶,并通过正交实验优化酶解条件。结果表明:最适用酶为广州华琪的复合蛋白酶和风味蛋白酶,在复合蛋白酶添加量为0.6%、水解时间为2h、风味蛋白酶添加量为0.8%、水解时间为1h、酶解温度为50℃、pH值为7.0、料液比为1∶1(g∶mL)的最佳酶解条件下,鸭骨泥的水解度为33.5%。     

青霉纤维素酶酶解芦竹的研究

以青霉纤维素酶酶解芦竹,探讨了酶解温度、酶解时间、pH值和酶载量对芦竹酶解效果的影响。结果表明,青霉纤维素酶酶解芦竹的最适条件为:酶解时间72h、酶解温度45℃、pH值4.8、酶载量30FPU.g-1 DM,在此条件下,葡萄糖产率为(61.75±1.22)%、木糖产率为(40.07±6.88)%;通过添加商业酶调配酶系中不同酶活比例,可进一步提高还原糖产率,当增加β-葡萄糖苷酶至40CBU.g-1 DM时,葡萄糖产率达68.96%、木糖产率达98.16%。     

竹叶黄酮在护肤品中防晒功效的初步评价

考察竹叶黄酮对紫外线辐射的防护效能。将竹叶黄酮添加到基质霜膏中制得护肤霜,采用紫外分光光度法,以紫外吸收值(透光率)为指标,对护肤霜的防晒效果进行评价。结果表明,在测试时间内,含竹叶黄酮1.0%和2.0%的护肤霜都能有效抵抗UVB辐射,按照布特星级分类标示,对UVA辐射的防护可达到三星级。竹叶黄酮可作为护肤品中的防晒功能添加剂。     

紫外诱变季也蒙毕赤酵母原生质体筛选木糖醇高产菌株

目的通过对季也蒙毕赤酵母原生质体进行紫外诱变,筛选遗传性稳定的木糖醇高产菌株。方法制备季也蒙毕赤酵母DQ11的原生质体,计算原生质体生成率及再生率,并对制备过程中的酶浓度(0.5%、1.0%、1.5%和2.0%)、酶解温度(26、28、30、32和34℃)及酶解时间(1、2、3、4和5 h)进行优化。对采用最佳酶解条件制备的原生质体进行紫外诱变,分别检测诱变30、60、90、120和150 s时原生质体的致死率,经重复筛选,采用高效液相色谱法测定菌株发酵液的木糖醇含量,并检测筛选出的木糖醇高产菌株的遗传稳定性。结果最佳酶解条件为:酶浓度1.5%,酶解温度30℃,酶解时间3 h,该条件下制备的原生质体经紫外诱变90 s(最佳诱变时间)后,获得1株高产木糖醇诱变菌株YZ-57,其发酵液的木糖醇含量为9.78 g/L,比出发菌株DQ11提高了186%,且具有良好的遗传稳定性。结论季也蒙毕赤酵母原生质体经紫外诱变,成功获得一株季也蒙毕赤酵母木糖醇高产菌株YZ-57,且具有良好的遗传稳定性。     

响应面法优化产低温脂肪酶工程菌Cl02的发酵条件

目的采用响应面法优化产低温脂肪酶工程菌Cl02的发酵条件。方法通过单因素试验考察培养基中酵母氮源含量、pH值、甘油含量和甲醇含量对酶活的影响,确定产酶的主要影响条件,在此基础上,根据Box-Benheken中心组合试验设计原理,采用三因素三水平的响应面分析法,综合考察各因子对低温脂肪酶酶活的影响,建立低温脂肪酶酶活的二次回归模型。结果培养基中酵母氮源含量、pH值和甲醇含量对酶活的影响显著。最适产低温脂肪酶条件为:酵母氮源含量7.3 g/L、pH 6.0、甲醇含量9.1 g/L,在此条件下,低温脂肪酶酶活可达42.25 IU/ml,比优化前(28.0 IU/ml)提高了50.9%。结论利用响应面法优化的发酵条件可显著提高工程菌的产酶能力,为规模化生产低温脂肪酶奠定了基础。     

复合蛋白酶交联酶聚集体制备枸杞蛋白多肽

该研究利用交联酶聚体技术制备出复合蛋白酶交联酶聚体固定化酶,以酶活回收率为指标,通过单因素实验得到复合蛋白酶交联酶聚集体最佳制备条件：风味蛋白酶与木瓜蛋白酶比例为3∶1,沉淀剂硫酸铵浓度为60%,戊二醛浓度0.5%,交联时间为50分钟,交联pH为7.5。此时最大酶活回收率为80.32%。相比单一蛋白酶,复合蛋白酶交联酶聚集体具有更好的热稳定性和pH稳定性,同时表现出良好的连续多次水解枸杞蛋白的性能。以蛋白水解度为指标,优化后复合蛋白酶交联酶聚集体最佳水解条件为：温度为60℃,pH为6,酶浓度为10 mg/mL,水解时间为100 min,在此条件下枸杞蛋白水解度为41.21%,比游离复合蛋白酶提高了6.9%。     

不同抗水成膜剂在水包油防晒体系中的性能研究

将乙烯基吡咯烷酮衍生物类、丙烯酸聚合物类、有机硅氧烷类、聚氨酯类、聚酯类5种不同类型的成膜剂分别添加于O/W防晒乳液配方,采用防晒系数分析仪、紫外-可见吸收光谱分析仪测定其对防晒乳液SPF值增效性及抗水性的影响。由实验结果可知,不同类型成膜剂对防晒配方SPF值的增效性及抗水性影响不同,当防晒配方中成膜剂的添加量为2%时,SPF值增效率均可达30%以上,抗水性提升60%以上。     

可逆抑制剂对发酵生产洗涤用蛋白酶的影响

在微生物发酵生产蛋白酶过程中添加可逆抑制剂,通过抑制发酵液中蛋白酶活性,减少蛋白酶自身水解,提高储存稳定性。结果表明,可逆抑制剂的最佳添加方式为在发酵过程中连续流加,流加量为抑制蛋白酶活性40%最佳,最佳条件下蛋白酶产量提高49.1%。抑制剂的添加,不影响蛋白酶的提取,提取时发酵液中的可逆抑制剂可以通过超滤法减少或者去除,在正常含抑制剂条件下,蛋白酶室温储存90 d,酶活仍保持100%。     

腐竹废水制备大豆多肽复合酶解条件研究

将腐竹废水进行回收利用,经蛋白酶酶解、分离、提纯制得大豆多肽.通过正交实验分析,确定腐竹废水复合酶解的最佳工艺条件为:采用三酶复合蛋白酶(由碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶以1∶2∶4的比例复合而成)、底物含量3%、pH值8.0、酶解时间4 h,此时多肽转化率为94.56%.     

毕赤酵母产重组木聚糖酶发酵条件的优化及其酶学性质

目的优化毕赤酵母工程菌GS115/xyn11A产重组木聚糖酶的发酵条件,并检测其酶学性质。方法采用单因素试验和L(934)正交试验考察摇瓶发酵条件下培养基起始pH值、诱导剂甲醇添加量、诱导温度及诱导时间对产酶活性的影响;并分析重组木聚糖酶的酶学性质。结果影响重组毕赤酵母产酶的因素重要性依次为:培养基起始pH值>诱导时间>诱导温度>甲醇添加量,重组酵母产酶最佳条件为:起始pH值7.5,甲醇添加量1.5%,32℃诱导96 h,在此条件下进行诱导表达重组木聚糖酶的酶活性可达228.35 IU/ml;酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为5.5,在低于40℃和pH 4.5～7.5的范围内较稳定。结论优化了毕赤酵母产重组木聚糖酶的发酵条件,为木聚糖酶的工业化生产及应用提供了依据。     

南瓜籽蛋白酶解产物的制备及其抗氧化性的研究

采用碱提酸沉法提取南瓜籽蛋白,对南瓜籽蛋白提取工艺优化;并且用4种不同的蛋白酶水解蛋白,通过正交实验确定蛋白酶解的最优条件。结果表明,南瓜籽蛋白的最佳提取条件是料液比1:15 g/mL,pH=8.5,35℃超声3 h,蛋白质量分数可以达到83.68%。将南瓜籽蛋白酶解后,以酶解液的DPPH清除率为指标,选择最佳水解蛋白酶为碱性蛋白酶,酶解的最佳条件为在5%底物浓度下,酶底比2%,酶解时间4 h,pH=9,在此条件下,酶解产物DPPH自由基清除率达到83.47%。     

基于Alcalase2.4FG碱性蛋白酶的玉米抗疲劳肽制备

以玉米蛋白粉为原料,利用Alcalase2.4FG碱性蛋白酶进行水解,制备玉米抗疲劳肽,考察底物浓度、[E]/[S]、酶解温度、酶解时间和酶解pH对酶解所得玉米抗疲劳肽活性的影响,通过清除羟基自由基的能力对活性进行检测,确定利用Alcalase2.4FG碱性蛋白酶制备玉米抗疲劳肽最佳的酶解工艺条件。结果表明:当底物浓度2%、[E]/[S]为4%、温度为55℃,pH值为9.0,时间45 min,在此条件下得到的玉米抗疲劳肽清除羟基自由基的能力最高,达到83.6%。     

黑曲霉诱变产酶活性与稻壳中木聚糖定向酶解的研究

采用紫外线照射诱变黑曲霉,筛选出低纤维素酶活的木聚糖酶高产菌株,研究了最优诱变条件,分析了诱变后黑曲霉产木聚糖酶的活性,测定了木聚糖酶对温度和pH值的稳定性。并初步探讨了木聚糖浓度、加酶量对酶解的影响。结果表明,最优诱变条件为:紫外照射功率40 W、照射距离28 cm、诱变时间2.5 min;黑曲霉产木聚糖酶的最适温度为50℃、最适pH值为4.2。木聚糖浓度对木聚糖的酶解没有影响,加酶量对木聚糖的酶解有一定影响;在木聚糖浓度为30 g.L-1、加酶量为2%~5%时,酶解效果较好。     

酶解血粉制备氨基酸水溶肥工艺条件优化

为资源化利用动物血液,以血粉为原料制备氨基酸水溶肥。通过单因素实验研究液料比、原料预处理温度、蛋白酶种类及组合酶比例等因素对血粉蛋白酶解效果的影响;通过正交实验考察温度、酶制剂添加量、p H和时间对血粉蛋白酶解效果的影响。结果表明：血粉的最佳酶解工艺为液料体积质量比6 mL/g、温度55℃、组合酶添加量3.0%（组合酶中蛋白酶B与风味蛋白酶质量比为2∶1）、p H 8.0、时间12 h;在该工艺条件下,血粉蛋白水解度为67.26%,酶解液中19种游离氨基酸质量分数为6.39%,分子量在1 046 Da以下的多肽占比达到99.59%。通过对血粉酶解工艺的优化,提高了血粉蛋白的水解度,增加酶解液中氨基酸含量,为蛋白酶酶解血液制备氨基酸水溶肥的过程控制及规模应用提供理论指导。     

酶辅助高效提取龙虾壳中甲壳蛋白的工艺研究

以龙虾壳甲壳蛋白提取率为指标,对龙虾壳甲壳蛋白的提取工艺进行研究;首先对蛋白酶种类进行考察;在此基础上对中性蛋白酶辅助提取方法进行单因素实验研究,然后应用正交实验进行条件优化。实验结果表明:当酶解温度为50℃、加酶量为1.5%、pH值为7.0、酶解时间为3 h时龙虾壳中甲壳蛋白的提取率最高,最佳提取率为43.58%。     

纤维素酶法提取杭白菊中总黄酮工艺优化

通过正交实验法研究了纤维素酶法提取杭自菊中总黄酮的主要工艺参数（酶添加量、酶解时间、酶解温度和pH）对总黄酮提取率的影响。纤维素酶法提取的最佳条件为：酶添加量0．5％、酶解时间2．5h、酶解温度55℃、pH5．0;此条件下总黄酮提取率比对照组提高了19．2％。     

蛋白酶在洗衣液中的稳定性改良

以硼砂为对照,考察了16种柠檬酸盐、多元醇及酯系列稳定剂,以及温度、pH、稳定剂用量对3种蛋白酶在洗衣液中稳定性的影响;同时基于洗衣液的主要成分考察了表面活性剂AES,AEO和APG等对蛋白酶活的影响。实验结果表明,柠檬酸盐尤其是柠檬酸铵钙的稳定效果最佳,APG0810和APG1214的稳定效果与硼砂接近。当蛋白酶用量为0.5%时,以柠檬酸铵钙-APG0810-APG1214三元复合体系稳定蛋白酶,含有Purafect 4000L和Purafect Prime 4000L的复合稳定剂体系在pH=7和25 ℃下的3周酶活保持率分别可达到84.3%和71.5%;在pH=8和37 ℃下的3周酶活保持率分别为47.2%和30.4%;硼砂体系pH=7和37 ℃下的3周酶活保持率分别为2.87%和13.5%。此外,AES会较大幅度地降低酶活,而非离子表面活性剂AEO_7和AEO_9对其酶活无显著影响,但AEO和AES的混合并不能降低AES对酶活的损伤,可以考虑在液体加酶洗涤剂中增加APG和AEO的使用。     

酸性蛋白酶水解小麦蛋白产物的乳化活性研究

以乳化活力指数为指标,采用单因素和正交实验研究了酸性蛋白酶对小麦蛋白水解最适条件。结果表明:三个因素对小麦蛋白粉乳化性的影响由强到弱的顺序为:反应温度>pH值>酸性蛋白酶/小麦蛋白粉质量比,最佳酶解条件为:反应温度为45℃、pH值为3.0、酸性蛋白酶/小麦蛋白粉质量比为3%,并测得在最佳条件下酶解产物的乳化活力指数为17.69 m2/g,此时水解度为7.32%。本研究可为利用小麦蛋白粉开发天然乳化剂提供参考。     

超声波条件下酶法提取鳝鱼皮中胶原蛋白的工艺研究

对鳝鱼皮中胶原蛋白的最佳提取工艺条件进行了研究.以超声提取时间、胰蛋白酶加入量、酶解时间、提取温度、pH 5个因素对提取工艺条件进行了优化,结果表明,最佳提取工艺条件为:酶加入量125 U/g、pH=7.2、温度35 ℃、超声波辅助提取时间3 min、酶解时间7 h,胶原蛋白的提取率达92.4%.利用紫外光谱和傅立叶变换红外光谱对胶原蛋白进行分析,结果表明,胶原蛋白的紫外特征吸收波长为226 nm,结构中含有肽键,羰基,羧基等蛋白质的特征官能团.