以叶酸受体为靶向的脂质体介导MYCN基因小干扰RNA体外抑制神经母细胞瘤LA-N-5细胞的增殖

目的以氨基脂为主要成分、叶酸受体为靶向的脂质体包裹MYCN基因小干扰性RNA,研究其体外对神经母细胞瘤LA-N-5细胞MYCN基因表达的抑制及细胞增殖的影响。方法制备氨基脂为主要成分、叶酸受体为靶向的脂质体包裹CY3标记的MYCNsiRNA转染LA-N-5细胞,以每微克蛋白中荧光强度半定量siRNA的转染效果;用定量RT-PCR检测转染前后MYCN基因mRNA变化;MTT法检测细胞增殖受抑情况：结果以100nmol／L终浓度转染LA—N-5细胞后每微克蛋白含siRNA（1808．5±140．2）pg,作用72hMYCN基因mRNA表达显著下降,抑制率79．2％,瘤细胞增殖受抑达66．2％。结论叶酸受体为靶向脂质体介导MYCNsiRNA在体外对LA—N-5细胞MYCNmRNA表达有显著抑制作用,明显抑制LA—N-5细胞增殖,为神经母细胞瘤靶向治疗、基因治疗开辟了新的思路。     

Survivin-siRNA对骨肉瘤MG-63细胞药物敏感性的研究

目的研究特异性Survivin-siRNA转染骨肉瘤MG-63细胞后对骨肉瘤细胞药物敏感性的影响。方法应用两种特异性Survivin-siRNA（Survivin-siRNA,Survivin—siRNA,）转染骨肉瘤MG-63细胞,RT—PCR检测MG-63细胞Survivin-mRNA表达,流式细胞术检测MG-63细胞的凋亡,MTT法检测顺铂、多柔比星对转染前后MG-63细胞的半数抑制浓度（IC50）。结果特异性Survivin-siRNA转染骨肉瘤MG-63细胞24h后SurvivinmRNA表达水平明显抑制;流式细胞术显示转染Survivin-siRNA的MG-63细胞48h后凋亡率明显高于非特异性siRNA组和空白对照组（F=17．32,P〈0．01）;特异性Survivin—siRNA增强了MG-63细胞对多柔比星的敏感性5倍,增强了MG-63细胞对顺铂的敏感性9倍。结论化学合成的Survivin—siRNA能有效抑制Survivin基因在骨肉瘤MG-63细胞中的表达,并提高MG-63细胞对多柔比星、顺铂的敏感性。     

美科学家改进纳米抗癌技术

美国加利福尼亚技术研究所的科学家利用一种名叫环式糊精的糖性物质合成了一种聚合物，用它包裹住携带小分子干扰RNA的纳米粒子。实验中，经过上述处理的纳米粒子因为体积非常小，所以很容易进入实验鼠的血管。粒子同时携带一种能够黏在肿瘤细胞上的分子，一旦黏合成功，粒子中的小分子干扰RNA就开始发挥作用，抑制癌细胞生长基因的表达，阻止癌细胞的复制和扩散。用这种方法处理的纳米粒子没有引发实验鼠的免疫反应。     

HIF-1α对低氧培养人鼻咽癌细胞侵袭转移能力的影响

目的:观察HIF-1α对低氧培养鼻咽癌细胞侵袭转移能力的影响.方法:以高转移人鼻咽癌细胞CNE2为研究对象,HIF-1α siRNA 通过脂质体转染CNE2,Realtimes RT-PCR及ELISA法检测培养细胞上清中MMP-2、MMP-9的含量,Transwell小室观察CNE2的转移侵袭能力.结果:低氧能显著升...     

靶向bcl-2小分子化合物抑制角膜新生血管研究

目的探讨靶向bcl-2小分子化合物(Z24)对大鼠角膜新生血管的抑制作用。方法采用完全随机化方法将30只大鼠分为2组,每组15只鼠(15只眼),应用角膜基质缝线法诱导角膜新生血管,采用灌胃给药。治疗组:Z24混悬液(80mg/kg);对照组:等量不含Z24的空白液;自术后第1天起,1次/d,连续用药7d。每组预先标定8只大鼠进行新生血管的定量观察,其余大鼠进行组织学观察。结果缝线后第7天,治疗组新生血管的面积明显小于对照组(P<0.05)。结论全身应用Z24能够延缓角膜新生血管的生成。     

三羟异黄酮对光动力疗法中H22细胞VEGF表达的影响

目的探讨光动力作用对肿瘤细胞血管内皮细胞因子表达的影响及三羟异黄酮的干预作用。方法运用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,检测光动力作用后H2 2细胞VEGFmRNA表达的时相变化,比较各组有无显著差异,以及三羟异黄酮干预作用后其表达变化。结果H2 2细胞VEGFmRNA表达在光动力作用后1小时即有明显增加,峰值出现在PDT作用后4小时,各时相点均显著高于对照组(P <0 .0 1) ,三羟异黄酮呈浓度依赖性抑制其表达。结论三羟异黄酮可以抑制光动力作用所致H2 2细胞VEGFmRNA的表达升高。     

小血管的扫描电镜样品制备法

在小血管的扫描电镜样品制备过程中 ,由于血管干燥之后 ,血管弹力板层像棉花一样极不易切割 ,强行切割时会出现撕裂血管壁的现象。我们试用强力万能胶粘剂对样品进行处理 ,获得了满意的效果 ,此法尚未见文献报道 ,现介绍如下。材料和方法取白鼠做显微手术 ,经腹动脉插管 ,开放下腔静脉 ,行生理压原位固定 ,肝素化的林格氏液(Ｒｉｎｇｌｒｓ)冲洗 ,在吻合口取 4～ 8ｍｍ长的小血管 ,放入 3%戊二醛固定液中固定 2ｈ ,用 0 1ｍｏｌ Ｌ磷酸缓冲液冲洗 3次 ,每次 1 5ｍｉｎ ,用 5 0 %、70 %、80 %、90 %、95 %、1 0 0 %的液体叔丁醇梯度脱水置换…     

He-Ne激光对急性脊髓损伤总NOS、iNOS和ET-1的影响

目的:研究低能量He-Ne激光血管内照射对家兔急性脊髓损伤后脊髓组织总NOS、iNOS和ET-1的变化,探讨He-Ne激光血管内照射对脊髓细胞的保护作用的机理。方法:72只新西兰大白兔随机分为治疗组、损伤组和对照组,每组24只。治疗组和损伤组分别用Allen's法造成家兔T13水平急性脊髓损伤。其中治疗组通过耳缘静脉进行低能量He-Ne激光血管内照射,激光波长632nm,功率5mW的,每天1小时,连续10天。疗程结束后取损伤部位脊髓以免疫组化方法检测总NOS、iNOS表达量,放射免疫法检测ET-1表达量。结果:损伤组明显高于对照组(P<0.05);治疗组脊髓组织总NOS、iNOS和ET-1的表达明显少于损伤组(P<0.05)。结论:低能量He-Ne激光血管内照射治疗可以降低急性脊髓损伤后脊髓组织总NOS、iNOS和ET-1的量,说明He-Ne激光能够减轻损伤对神经细胞的损害,减轻神经功能丧失。     

血栓闭塞性脉管炎血管的电镜观察和能谱分析

血栓闭塞性脉管炎(Thromboangiitis obliterans,简称TAO)是一种主要累及肢体中小动脉炎症性和闭塞性疾病。该病发病率高、治愈困难、病因不清楚。近年来,一些研究提示,该病与免疫因素有关。但资料少,理论依据尚不充分。本文利用透射电镜和能谱仪,观察了16例TAO病人血管的超微病变,并进行了X射线显微分析。结果发现:①TAO病人血管病变主要累及血管中膜,中膜超微病变的特点是平滑肌细胞萎缩(图1,×6000)、变性(图2,×7500)或坏死(图3,×12000)。对坏死的平滑肌细胞用能谱分析证明,有钙的沉积。②在血管中膜观察到高电子密度的免疫复合物IC。有两种形态,一种呈块     

低强度激光血管内照射治疗脑梗塞机制研究

本研究观察了 5 32 .0 nm、6 32 .8nm、6 5 0 .0 nm 3种波长低强度激光血管内照射 (IL L L I)对脑梗塞患者血浆血小板颗粒膜蛋白 - 140 (GMP- 140 )、血清铜 -锌超氧化物歧化酶 (Cu- Zn SOD)、血浆内皮素(ET1 )的影响。结果表明 :每天照射 1h,强度为 1.72× 10 4J/ cm2 ,3种波长 IL L L I对抑制血小板活化无明显作用 ;但均可明显升高血清 Cu- Zn SOD含量 ,其中 5 32 .0 nm效果更为显著 ;均可显著降低血浆 ET1 含量 ,且 3种波长疗效无显著差异     

雷帕霉素对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的：观察雷帕霉素对人脐静脉内皮细胞增殖的影响,探讨其可能的抑制新生血管的作用机制。方法：采用四唑盐比色试验（MTT）法检测不同浓度（0.1ng/ml,1ng/ml,10ng/ml,20ng/ml）的雷帕霉素对血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）增殖的抑制作用。结果：不同浓度的雷帕霉素均能抑制由VEGF诱导的HUVEC增殖。结论：雷帕霉素能抑制HUVEC的增殖,且呈剂量依赖。雷帕霉素通过抑制血管内皮细胞的增殖来抑制新生血管的形成。     

缺氧诱导因子1α对大鼠骨髓间充质干细胞核心结合因子α1表达的影响

目的：研究体外低氧实验中缺氧诱导因子1α（HIF-1α）对大鼠骨髓间充质干细胞核心结合因子α1（Cbfα1）表达的影响。方法：将体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞分别置于常氧（含有5％c02的培养箱中）和低氧（含4％02、5％CO2和91％N2的三气培养箱中）中培养,分别于1d、3d、5d和7d用实时荧光定量PCR检测细胞内HIF-1α和CbfalmRNA的表达水平：用siRNA抑制细胞HIF-1αmRNA表达后用Westernblot法检测HIF-1α和Cbfal蛋白表达。结果：与常氧组相比,低氧组细胞HIF-1αanRNA的表达均增加（1d、3d、5d和7d：P〈0．05）,且3d达到最高峰;细胞CbfalmRNA的表达明显下降,3d尤为明显（P〈0．05）：低氧组细胞转染siRNA干扰HIF-1α表达后,能促进细胞内Cbfcd蛋白的表达（P〈0．05）。结论：低氧微环境抑制骨髓间充质千细胞的成骨向分化,细胞内HIF-1α反向调节Cbfal的表达。     

低强度激光对兔正畸牙牙周膜血管化的影响

目的 :探讨低强度激光 (lowenergylaser)照射对兔正畸牙牙周膜 (periodontalligament,PDL)血管化的影响。方法 :3 0只大耳白兔分为1d、3d、5d、7d、14d和 2 1d组 ,每组 5只。 80g力拉兔双侧上颌第一磨牙近中移动。左侧为对照组 ,右侧为实验组进行低强度激光照射。采用墨汁血管灌注及计算机图像分析的方法研究兔正畸牙PDL血管密度和面积的变化。结果 :实验组和对照组正畸牙的压力侧血管密度高峰值分别为 3 0个 mm2 和 2 7个 mm2 ,血管面积值分别为 7872 9.40um3和 710 2 1.0 0um2 ,高峰值出现在施力后第 7天。张力侧的实验组与对照组血管密度高峰值分别为 3 2个 mm2 和 2 8个 mm2 ,血管面积值分别为 913 2 9.44 μm2 和 85 0 46.0 0 μm2 ,高峰值出现在第 14天。实验组的压力侧与张力侧血管密度和面积均大于对照组 (P <0 .0 1)。结论 :低强度激光照射能促进兔正畸牙PDL的血管化反应 ,从而有益于正畸牙周组织的改建。     

低强度激光血管内照射对脑梗塞患者内皮分泌功能的影响

[目的]为了探讨低强度激光血管内照射的作用机理。[方法]我们采用放射免疫法和比色法观察了40例脑梗塞患者低强度激光血管内照射前后血浆ET-1、NO含量的变化。[结果]血浆EF-1含量由照射前82.26±8.15ng/降为62.7±8.08ng/ml,血浆NO含量由照射前的15.80±2.08μmol/L,差异均具有非常显著性(P<0.01)。[结论]低强度激光血管内照射抑制了ET-1的合成和释放,促进NO的分泌,这可能是其发挥生物学效应的机理之一。     

胸神经后皮支及其营养血管的解剖学研究

目的 :为临床设计背部皮神经营养血管皮瓣提供解剖学基础。方法 :在 17例 3 4侧成人躯干标本上 ,用显微解剖法观测第 1～ 12胸神经后皮支及其营养血管的来源 ,走行及分布规律。结果 :第 1～ 12胸神经后皮支的伴行动脉为肋间后动脉的背侧皮支。皮神经及其伴行动脉于脊柱两旁相应肋间穿出深筋膜 ,呈节段性、重叠性分布于背部皮肤 ,皮神经营养血管相互间形成丰富的吻合。结论 :可设计以第 1～ 12胸神经后皮支及其营养血管为蒂的皮神经营养血管皮瓣     

基于多尺度一致性与注意力机制的视网膜血管分割网络

针对现有的视网膜血管分割方法存在对微血管和毛细血管的分割能力不足,导致血管断连和末端血管漏分,造成视网膜血管分割性能不佳的问题,本文提出一种基于多尺度一致性与注意力机制的视网膜血管分割网络(multi-scale consistency and attention mechanism U-Net, MCAU-Net)。首先,该网络在瓶颈特征层嵌入注意力细化模块(attention refinement module, ARM),能有效细化瓶颈层冗余的特征,抑制背景等无关像素的权值。其次,将上下文特征融合模块(context fusion module, CFM)与传统的跳跃连接相结合,以此补充在特征提取过程中逐渐丢失的信息,加强网络对微血管和毛细血管的构建能力。最后,基于网络的多尺度输出设计了一种多尺度一致性的训练方式,以增强网络对不同尺度特征的敏感性。在DRIVE和CHASE＿DB1公开数据集上进行的对比实验表明本文网络具有良好的分割性能。     

低能量ALA-PDT对脑组织新生血管形成及胶质瘤生长的影响

观察了低能量5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学疗法(ALA-PDT)对脑组织新生血管形成和胶质瘤生长的影响。用10J/cm2的ALA-PDT照射27只裸小鼠大脑皮层后第1、5、10天,利用二维、三维图像观察新生血管形成,western blot检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达。另将12只裸小鼠分为对照组(无特殊处理)和ALA-PDT预处置组(10J/cm2),ALA-PDT预处置后第10天,颅内接种U87胶质瘤细胞,21天检测肿瘤体积。结果发现,以照射区对侧大脑相应区域为对照,低能量ALA-PDT照射后第1和5天,血管形态无明显变化,第10天有新生血管形成;VEGF在照射后第5和10天显著增高;HIF-1α在照射后第1天即开始增高,随后越发明显。低能量ALA-PDT可通过HIF-1α诱导VEGF高表达和新生血管形成,这种微环境的改变有助于U87脑胶质瘤细胞的生长。     

ZnPcS4-BSA光动力疗法治疗大鼠脉络膜新生血管的研究

目的:探讨新型光敏剂ZnPcS4-BSA(四磺酸酞菁锌与牛血清白蛋白的配合物)介导的光动力疗法对脉络膜新生血管的疗效及应用前景.方法:每只BN大鼠一眼作为实验眼,另一眼作为对照眼,在间接检眼镜下用氩激光光凝视网膜,于光凝后14、21、28天时行眼底光学相干断层扫描(OCT)和荧光血管造影(FFA)等检查.光凝21天后,进行光动力治疗(PDT),照射能量密度为50J/cm2,PDT1和PDT2两组分别以ZnPcS4-BSA和ZnPcS4为光敏剂,于治疗后24小时和7天进行眼底镜,OCT和FFA等检查,检查后作组织病理学光镜和电镜的观察.结果:光凝后14天时,OCT检查见光凝斑视网膜变薄,脉络膜反射被遮蔽,FFA见少量荧光素渗漏,光镜检查见视网膜神经层变薄.光凝21天后,OCT检查见光凝斑视网膜色素上皮(RPE)层和脉络膜毛细血管层反射光带增厚,光凝后21和28天时,FFA检查分别有55%和35%的光斑有点状荧光素渗漏,光镜检查有脉络膜新生血管形成.PDT1和PDT2组治疗后24h FFA检查CNV各有30%和25%被封闭,7天后各有60%和45%,两组间总的有效封闭率有显著性差异.光镜和电镜检查,PDT2组比PDT1组视网膜色素上皮细胞损伤更为严重.结论:ZnPcS4-BSA介导的光动力治疗一周后能有效地封闭脉络膜新生血管,比用ZnPcS4介导的光动力治疗效果更好.     

靶向YB-1的microRNA表达载体的构建及其对MB-MDA-231细胞增殖的影响

目的：构建靶向YB-1基因的microRNA表达载体,研究其对乳腺癌细胞MB-MDA231增殖的影响。方法：采用microRNA靶基因预测软件预测可能作用于YB-1基因的micro RNA,构建其过表达载体,利用Lipofectamine2000转染细胞MB-MDA231,荧光显微镜下评估转染效果,real-time ...     

强光治疗皮肤血管异色性病变的临床观察

肤血管异色性病变最常见的主要是鲜红斑痣及草莓状血管瘤,传统的治疗方法尚有不足之处,特别是对较大面积者的治疗一直是难题。自激光在医学中应用以来,其治疗效果有很大进步。近年来,发现一定波长的光对皮肤血管异色性病变较激光治疗具有较多的优越性。本院自1999年4月以来,用ＰｈｏｔｏＤｅｒｍＶＬ/ＰＬ/ＨＲ强光治疗机对68例皮肤异色性血管病变进行治疗,取得较好的效果,现报导如下:1　材料与方法11　临床资料一般情况:病例只限于本院用ＰｈｏｔｏＤｅｒｍＶＬ/ＰＬ/ＨＲ强光治疗者,男21例,女47例,男女之比为1∶22;年龄7个月～58岁,其中以…