快速选育抗黄瓜花叶病毒的转基因烟草纯合品系

以来源于烟草推广品种ＮＣ８９花药的单倍体苗为转化受体，同时导入了黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）的外壳蛋白（ＣＰ）基因和卫星ＲＮＡ（Ｓａｔ－ＲＮＡ）基因，在获得的共１１２株转化植株中，有３株在人工接种浓度高达２００μｇ／ｍｌ的ＣＭＶ时仍不发病。通过０．４％秋水仙素处理使之加倍并收获种子，而后连续两代在大田条件下鉴定其ＣＭＶ抗性及综合农艺性状，并与单独导入了ＣＭＶＣＰ基因或ＣＭＶＳａｔ－ＲＮＡ基因的转基因ＮＣ     

快速选育抗黄瓜花叶病毒的转基因烟草纯合品系

以来源于烟草推广品种ＮＣ８９花药的单倍体苗为转化受体，同时导入了黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）的外壳蛋白（ＣＰ）基因和卫星ＲＮＡ（Ｓａｔ—ＲＮＡ）基因，在获得的共１１２株转化植株中，有３株在人工接种浓度高达２００μｇ／ｍｌ的ＣＭＶ时仍不发病。通过０．４％秋水仙素处理使之加倍并收获种子，而后连续两代在大田条件下鉴定其ＣＭＶ抗性及综合农艺性状，并与单独导入了ＣＭＶＣＰ基因或ＣＭＶＳａｔ—ＲＮＡ基因的转基因ＮＣ８９品系及未转化的对照ＮＣ８９进行了比较。结果表明，同时表达ＣＭＶ外壳蛋白和卫星ＲＮＡ的双单倍体转基因植株，在Ｒ—１代即表现出一致的可稳定遗传的ＣＭＶ抗性，抗性水平较单独表达ＣＰ或Ｓａｔ—ＲＮＡ的转基因ＮＣ８９提高１倍左右。     

绵羊服装革工艺

ＴｅｃｈｎｉｑｕｅｏｆＳｈｅｅｐｓｋｉｎＧａｒｍｅｎｔＬｅａｔｈｅｒ特约栏目主持：肖传斌（德国司马化学有限公司上海办事处）垂询电话：（０２１）－６４４００６８２）１原材料材料：国产绵羊蓝湿皮厚度：０．８～１．０ｍｍ用料参照削匀皮重量　２水洗２００％　水,３５℃１．０％　ＳＵＰＲＡＬＡＮ　８０（非离子型脱脂剂）０．１%　甲酸４０分钟ｐＨ４．０排水３铬复鞣／中和１００％　水,４０℃１．５％　ＰＥＬＧＲＡＳＳＯＬ　ＳＦ（耐电解质合成加脂剂）１,５％　ＰＲＯＶＯＬ　ＢＡ１０分钟２．０％　ＮＯＶＡＬＴＡＮ…     

利用花药培养系统选育烟草抗赤星病品系

在接种有烟草赤星病菌的双层培养基上及含赤星病菌毒素的选择培养基上，获得了烟草推广品种ＮＣ８９的花药培养苗。温室内采用离体叶片法对这些花培苗进行了赤星病抗性鉴定，结果约１８％－４２．９％的植株抗性较对照ＮＣ８９有所提高。选其中４株抗性较高且农艺性状与对照ＮＣ８９相近的单株经秋水仙素加倍后收获了种子，然后于１９９２、１９９３年分别在赤星病病圃及大田条件下对其Ｒ—１代、Ｒ—２代植株进行了赤星病抗性及农艺性状测试。两年试验结果一致表明：在染色体加倍以后，所选植株的后代在基因型上已完全纯合，赤星病抗性较对照ＮＣ８９有较大提高，农艺性状也有所改善，而且均稳定遗传，是不同于原ＮＣ８９的烟草新品系。其中两个品系对赤星病的田间相对防效分别达５７．８％和５３．４％，且农艺性状优异，在生产上具有广泛应用前景。     

烟草抗病新品系“转基因NC89”的大田试验

对转“黄瓜花叶病毒外壳蛋白（ＣＭＶＣＰ）＋卫星ＲＮＡ”嵌合基因的工程ＮＣ８９的Ａ、Ｂ、Ｃ三个纯系以及转“ＣＭＶＣＰ＋烟草花叶病毒外壳蛋白（ＴＭＶＣＰ）”嵌合基因的工程ＮＣ８９Ｔ纯系进行了田间抗病性鉴定及农艺性状测试，结果表明：不论在人工接毒或自然发病条件下，转基因ＮＣ８９的花叶病病情指数都明显低于未转基因ＮＣ８９对照，其中Ｂ纯系的抗病性最高，在上述条件下，相对防效分别达到８０．２％、９２．９５％。在农艺性状方面，转基因ＮＣ８９较对照有所改善，但种性未变。     

绵羊服装革生产工艺

原皮：浸酸绵羊皮用料按浸酸皮重计１　脱脂１００％盐溶液,３０℃／６波美１．０％ＳＵＰＲＡＬＡＮ８０（非离子型脱脂剂）２０分钟２００％盐溶液,３０℃／６波美４５分钟排水２　去肉３　脱脂以下用料按去肉皮重计５０％盐溶液,３８℃／６波美２．０％ＳＵＰＲＡＬＡＮ８０２．０％ＮＯＶＡＬＴＡＮＡＧ（水溶性醛鞣剂）４０分钟２００％盐溶液,３８℃／６波美２０分钟排液１００％水,３８℃１．０％ＳＵＰＲＡＬＡＮ６７（脱脂剂）１．０％小苏打３０分钟ｐＨ５．０排水,３８℃水洗１０分钟４　鞣制１００％盐溶液,３８℃／６波…     

转马铃薯Y病毒复制酶基因烟草的获得及抗病性分析

重组克隆ＤＮＡ用ＫｐｎＩ／ＢａｍＨＩ双酶切得到马铃薯Ｙ病毒ＮＩｂ基因，将其插入质粒ｐＲＯＫ２相应切点中构成植物表达载体。用重组质粒ｐＲＯＫ２转化农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａ－ｃｉｅｎｓ）ＬＢＡ４４０４菌株，叶盘法将ＮＩｂ基因转入烤烟品种ＮＣ８９的染色体，获得抗卡那霉素的转化再生植株。经抗性筛选、ＰＣＲ检测、无性扩繁和大量重复抗病鉴定，结果表明，转化烟草植株ＤＮＡ中整合了外源目的基因，且表现抵抗２０μｇ／ｍｌＰＶＹＮ的侵染，ＥＬＩＳＡ分析认为抗性植株无病毒累积，初步筛选出对ＰＶＹＮ侵染具有较高抗性的转基因烟草植株。     

联邦德国粮食、土豆与脂类研究中心及德国油脂协会的贺信

联邦德国粮食、土豆与脂类研究中心及德国油脂协会的贺信ＢＵＮＤＥＳＡＮＳＴＡＬＴＦＵＲＧＥＴＲＥＩＤＥ．ＫＡＲＴＯＦＦＥＬ－ＵＮＤＦＥＴＴＦＯＲＳＣＨＵＮＧＩＮＤＥＴＭＯＬＤＵＮＤＭＵＮＳＴＥＲＩＮＳＴＩＴＵＴＦＵＲＣＨＥＮＭＩＥＵＮＤＰＨＹＳＩＫＤＥ...     

转抗虫基因烟草NC89纯合品系的获得及大田抗虫试验

经过连续三代抗虫性鉴定，选育出了表达直豆胰蛋白酶抑制剂（ＣＰＴＩ）的广谱抗虫转基因烟草ＮＣ８９纯合品系ＮＣ８９Ｌ２７－１９和ＮＣ９８Ｌ２７－２１。在大田对两个纯合系的抗虫性状进行了研究。①人工接种烟青虫；②害虫自然发生，不施杀虫剂；③在同一虫害防治阈值时施用杀虫剂。结果表明：转基因品系可稳定表达抗虫性状。在不施用杀虫剂时，田间相对抗虫效果在６４．７％～７０．５％之间；在施用杀剂时，可减少用药量４０％左右。转基因品系仍维持原ＮＣ８９主要植物学特性及农艺性状，为ＮＣ８９品种的抗虫改良品系。     

毛革两用服装革生产工艺

１原料皮澳大利亚盐湿羔羊皮２预浸水液比２０（２０升水每张皮）温度２８℃ＳＵＰＲＡＬＡＮ６７（阴离子型脱脂剂）０．５ｍｌ／ｌ纯碱０．５ｇ／ｌ转动１２０分钟水洗３浸水液比２０温度２０℃ＡＣＴＩＶＯＬＯＬＮ（浸水杀菌剂）１．０ｍｌ／ｌＳＵＰＲＡＬＡＮ８０（...     

烟草对赤星病菌的抗性与其防御酶系活性的关系

室内对抗病性不同的烟草品种CV 87和NC 89接种赤星病菌 ,分析测定接种后不同时间、不同叶位过氧化物酶 (POD)、过氧化氢酶 (CAT)以及苯丙氨酸解氨酶 (PAL)等同工酶酶活性变化情况。结果表明 ,抗病品种CV 87随接种叶位升高POD与CAT活性增加 ,感病品种NC 89表现先升高后降低的趋势。无论接种与否NC 89的POD活性都高于CV 87;抗病品种CV 87的CAT活性高于感病品种 ;接种赤星病菌后,抗病品种CV 87的PAL活性升高 ,感病品种NC 89的PAL活性降低 ,PAL活性与品种抗病性呈正相关     

寡糖诱导向日葵抗锈病的信号转导途径

为了解寡糖诱导向日葵抗锈病过程中的信号转导途径,利用寡糖、水杨酸（SA）、茉莉酸（JA）预先喷雾处理向日葵叶片,1d后接种锈菌,通过对植株体内脂氧合酶（LOX）活性及SA含量的测定,并通过RT-PCR对SA、JA信号途径的标记基因PR5和PDF1.2等表达水平进行测定,初步确定诱导抗性表达的信号转导途径。结果表明：经寡糖诱导后,向日葵叶片内LOX活性降低,SA含量上升,且诱导水杨酸途径标记基因PR5表达量增加。结果说明寡糖诱导向日葵抵抗锈病主要与SA介导的信号途径有关。     

三生-NN与NC89接种TMV后防御酶的活性变化

通过研究抗性不同的烟草品种使用木霉孢子并接种TMV后其防御酶活性和MDA含量变化,发现三生-NN和NC89虽然都属于普通烟草(Nicotiana tobacum L),但某些抗性相关基因不同.使用木霉孢子后,两者的防御酶有些变化趋势相同(如PAL),有些则不同(如POD);受损伤程度(MDA含量)变化幅度也不相同.接种病毒后,抗性酶被激活,其活性由抗病毒物质、病毒和植物本身等多种因素综合作用.枯斑三生作为烟草抗病毒物质的筛选的指示植物具有一定局限性,必须结合常规栽培品种进行更加系统的田间试验,才能确定某一抗病毒物质的实际应用效果.     

植物黄酮醇生物合成关键基因研究进展

黄酮醇作为一类重要的类黄酮化合物,是广泛存在于植物体内与植物的营养及外观品质密切相关的一类重要的次生代谢产物。黄酮醇生物合成关键基因的表达模式及表达量是决定黄酮醇生物合成进程及含量的重要因素,因此了解植物黄酮醇类化合物生物合成关键基因的研究进展对于植物黄酮醇类化合物生物合成的有效调控具有重要意义。本文综述了植物黄酮醇生物合成途径上关键基因(PAL,C4H,4CL,CHS,FLS)的克隆、分布、特性及其对外源环境条件应答的最新研究进展,以期为植物黄酮醇的生物合成后续研究提供参考依据。     

烤烟烟叶类黄酮合成关键酶活性及其调控基因的表达分析

为系统探究类黄酮在烟叶成熟期合成积累的关键点、合成相关酶及调控基因的变化规律,测定了豫烟6号、K326和ND202三个烤烟品种中部叶成熟期叶片的类黄酮含量、类黄酮合成上游的苯丙氨酸解氨酶（PAL）、肉桂酸4-羟化酶（C4H）、4-香豆酰CoA连接酶（4CL）、查尔酮合成酶（CHS）和查尔酮异构酶（CHI）酶活性及其基因表达模式的变化。结果表明,三个烤烟品种烟叶类黄酮含量变化呈现先增加后降低的规律,打顶后0~30d是烟叶类黄酮合成积累的关键时期,在叶片成熟期含量达最大值;在同一生态环境及栽培管理条件下,成熟期各阶段均以豫烟6号中部叶类黄酮含量最高;测定类黄酮合成酶活性发现,PAL、CHS和CHI酶活性与烟叶类黄酮合成的相关性较大,其中CHS合成酶最大（p < 0.01,r=0.88）;基因表达模式研究发现,PAL、C4H、4CL2、CHS和CHI基因与烟叶类黄酮含量的积累相关性较大,其中CHS基因最大（p < 0.01,r=0.96）,是烟叶类黄酮合成过程中的关键基因。      

花生不同品种叶片类黄酮含量和相关合成酶活性对PEG胁迫的响应

以花生品种花17、农大818、丰花5号和山花11号为试材,聚乙二醇（PEG）室内砂培法模拟干旱胁迫,研究20%PEG胁迫下花生幼苗叶片中类黄酮含量及相关合成酶活性的变化。20%PEG开始处理后,随胁迫时间延长,幼苗叶中类黄酮含量逐步上升,在胁迫9h达到高峰,之后逐步下降至对照水平,农大818、丰花5号和山花11号均在处理后72h降至对照水平,花17在36h降至对照水平。PEG开始处理后苯丙氨酸解氨酶（PAL）、查尔酮合成酶（CHS）、查尔酮异构酶（CHI）酶活性均逐渐提高,6h后CHS、CHI酶活性达到高峰,9h后PAL酶活性达到高峰,之后下降,4个品种趋势一致。分析表明PEG处理后山花11号和丰花5号的合成酶具有较高的活性和积累速率是其类黄酮快速大量合成的原因,而农大818CHS酶活性和PAL酶活性提高速率较低限制了其类黄酮的积累,3种酶的活性和积累速率均较低导致花17叶中类黄酮合成少,含量提高慢。相关分析表明PEG胁迫下PAL、CHS、CHI共同调控类黄酮的代谢,胁迫引起PAL、CHS、CHI酶活性改变是类黄酮含量变化的原因。     

温湿度的现场读取在电容式电子清纱器上的应用

介绍了利用AT89C2051、AD7416和CHS设计的电容式电子清纱器温湿度读取原理，并给出了读取系统的硬件及软件设计。     

Effects of nitric oxide on the alleviation of postharvest disease induced by Penicillium italicum in navel orange fruits

The present study evaluated the effects of 15 μL L^-1 nitric oxide (NO) on the fruit defence response of ‘Newhall’ navel orange. The decay rate of NO-treated navel orange fruits was significantly lower than that of control fruits during storage at 20 °C storage (P < 0.05). Treatment with NO suppressed the increase in disease incidence and lesion area in orange fruits inoculated with Penicillium italicum (P. italicum); significantly increased the activities of phenolic metabolism-associated enzymes and pathogenesis-related (PR) proteins, including polyphenoloxidase (PPO), phenylalanine ammonia-lyase (PAL), β-1,3-glucanase (GLU) and chitinase (CHT); and enhanced the activities of key enzymes, including 4-coumarate: CoA ligase (4CL), cinnamate-4-hydroxylase (C4H) and chalcone isomerase (CHI) in the phenylpropanoid pathway. The contents of total phenolics, flavonoids and lignin were also higher in NO-treated fruits than in control fruits. The findings suggest that exogenous NO could induce disease resistance against P. italicum in navel orange fruits.