胶体金免疫层析法快速检测黄曲霉毒素B1的研究

本文应用胶体金免疫层析技术,建立了一种快速检测食品中黄曲霉毒素B1的方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体并喷于玻璃纤维上,黄曲霉毒素B1偶联抗原和二抗鼠抗驴分别结合于硝酸纤维膜上,依次将样本垫、胶金垫、硝酸纤维膜和吸水纸组装切割成胶体金试纸条并装入检测卡中。测试结果表明黄曲霉毒素B1快速检测试纸条的灵敏度为5ng/ml,检测时间为10min,批内和批间重复性为100%,假阳性率和假阴性率均为0。使用简单方便,非常适合现场快速检测黄曲霉毒素B1。     

一种快速检测呕吐毒素的胶体金试纸条

利用胶体金免疫层析法,研制了一种能够快速检测黄豆中呕吐毒素含量的试纸条。通过试验,胶体金试纸条对呕吐毒素的检测限是1μg/g,对玉米赤霉烯酮毒素、黄曲霉毒素B1、赭曲毒素A等无交叉反应,假阳性率和假阴性率均为0,检测时间为10min。试纸条能够准确、可靠、简便、快速地检测黄豆中残留的呕吐毒素,适合大量样品的现场检测。     

定性测定羊奶中黄曲霉毒素M1残留高灵敏度检测卡的研制

研制定性测定羊奶中黄曲霉毒素M1残留的高灵敏度检测卡.在硝酸纤维素膜上预包被黄曲霉毒素M1全抗原作为检测线,以及预包被羊抗鼠二抗作为质控线.将抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体用胶体金标记作为金标垫.将样品垫、金标垫、预包被黄曲霉毒素M1的硝酸纤维素膜以及吸水垫依次粘贴在PVC板上,切割成试纸条并组装成检测卡.结果表明:该检测卡的检测限为0.5μg/L,对黄曲霉毒素M1的交叉反应率为100％,而与同族的其他物质的交叉反应率小于5％.假阳性率小于5％,假阴性率为0％,检测卡常温储存,保质期18个月.本研究的检测卡,可快速准确地应用于羊奶中黄曲霉毒素M1残留的定性检测,为快速准确地测定羊奶中黄曲霉毒素M1残留提供了依据.     

胶体金免疫层析法快速检测赭曲霉毒素A在谷物及饲料中的研究

正应用胶体金免疫层析技术,建立一种快速检测谷物和饲料中赭曲霉毒素A的方法,其中包括胶体金的制备、金标抗体的制备、试纸条的组装和测试等步骤。测试结果表明赭曲霉毒素A快速检测试纸条对谷物类样品检测限为5 ng/m L,对饲料样品检测限为100ng/m L,检测时间为10 min,试纸条特异性好,假阳性率小于5%,假阴性率为0。该法使用简单方便,非常适合现场快速检测谷物和饲料中的赭曲霉毒     

胶体金免疫层析法快速检测T-2毒素的研究

应用胶体金免疫层析技术,建立了一种快速检测谷物和饲料中T-2毒素的方法.采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗T-2毒素单克隆抗体并喷涂于玻璃纤维上,T-2毒素偶联抗原和羊抗鼠二抗分别喷涂于硝酸纤维素膜上,作为检测线和质控线,依次将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水垫组装成试纸条并装入检测卡中.测试结果表明,T-2毒素快速检测试纸条的检测限为0.Smg/L,检测时间为10min,假阳性率和假阴性率均为0.该法使用简单方便,非常适合现场快速检测谷物和饲料中的T-2毒素.     

乳品中多种抗生素残留胶体金检测方法研究

研究用于牛奶和奶粉中多种抗生素残留同时检测的胶体金免疫层析试纸条。基于胶体金免疫层析技术,搭建抗原包被体系和胶体金标记抗体体系,优化检测方法,考察胶体金快速检测试纸条的检测灵敏度、特异性、准确度和实际样本适应性。试纸条可同时检测卡那霉素、红霉素、林可霉素3种药物在牛奶、奶粉中的残留,检测限分别为50.0,20.0和75.0μg/L,假阳性率和假阴性率均为0,样本无需前处理,检测操作简单,10 min内实现3种药物同时检测。采用胶体金试纸条和液相色谱串联质谱法对20份牛奶和奶粉盲样进行比对试验,阳性样品全部检出,2种方法测定结果一致。建立的胶体金免疫层析技术及试纸条检测准确可靠,适用于现场大批量样本的快速检测和筛选。     

胶体金免疫层析法快速检测赭曲霉毒素A研究

该研究应用胶体金免疫层析技术建立一种快速检测食品和饲料中赭曲霉毒素A方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,标记抗赭曲霉毒素A单克隆抗体,标记胶体金抗体喷涂于玻璃纤维上,赭曲霉毒素A偶联抗原OTA-OVA和二抗兔抗鼠IgG分别喷涂于硝酸纤维膜上作为检测限和质控线,依次将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维膜和吸水纸组装成试纸条并装卡。测试结果表明,赭曲霉毒素A快速检测试纸条灵敏度为5 ng/mL,检测时间为10 min,批内和批间重复性为100%,假阳性率和假阴性率均为0。该法简单方便,非常适于现场快速检测赭曲霉毒素A。     

高灵敏黄曲霉毒素B1免疫层析定量检测法的建立

以胶体金为标记物,借助于胶体金读取仪,建立了高灵敏的定量检测黄曲霉毒素B_1的胶体金免疫层析方法。试纸条制备时,当标记溶液pH为6.0,检测线全抗原的使用浓度为1.5mg/mL,金标抗体浓度为4μg/mL、用量为1.2μL时,所建立方法的灵敏度为5.7ng/L。通过加速保存试验,结果显示该试纸条的保存期大于1年。该试纸条应用于实际谷物及酱油加标样本检测,证明该方法可满足食品快速检测的需要。     

胶体金免疫层析技术快速检测谷物中3种真菌毒素的研究

目的应用胶体金免疫层析技术开发一种快速检测谷物中黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)的三联检测卡。方法优化胶体金溶液p H值、金标抗体量及抗原包被量制备3种胶体金试纸条,将试纸条组装成检测卡,研究该卡的检测限、准确度、特异性和稳定性。结果 AFB_1、ZEN和DON 3种试纸条的胶体金溶液最适p H值分别为7.5、7.5和7.0,金标抗体量分别为4.2、7.2和9.6μg/ml,抗原包被量分别为1.0、1.4和0.8 mg/ml。检测卡的检测结果与仪器检测结果基本一致,重复性较好,与结构类似物及其他霉菌毒素无交叉反应,在室温条件下可以保存12个月。结论该三联检测卡操作简便、快速、准确、稳定,且能同时检测3种真菌毒素,在谷物的现场检测中有较好的应用前景。     

牛奶中黄曲霉毒素M1测定方法的比较

本试验采用薄层层析法、黄曲霉毒素M1试剂盒快速检测法、酶联免疫法,测定了牛奶中黄曲霉毒素的含量并比较了三种测定方法的异同。三种检测方法中,薄层层析法试验成本底,但样品前处理繁琐,最低检测限高,不能检测出低含量的黄曲霉毒素;黄曲霉毒素M1试剂盒快速检测法属于半定量检测法,方法简单快速,但偶尔出现假阳性,适于原奶的筛选。酶联免疫法方法为定量检测法,相对准确,但成本高,适于对可疑牛奶的仲裁实验。     

应用胶体金试纸条快速检测赭曲霉毒素A的研究

本文介绍了一种快速检测赭曲霉毒素A的胶体金试纸条的研制方法，其中包括胶体金的生产、金标抗体的制备、试纸条的组装和测试等步骤。测试结果表明赭曲霉毒素A快速检测试纸条的检测限为10ng／ml，检测时间为10min，加上使用方便，经济适用，使之适合于赭曲霉毒素A现场快速检测之用。     

应用胶体金试纸条快速检测宁夏稻米霉菌毒素的研究

在我国稻米真菌毒素污染呈上升趋势,稻米质量安全事关国计民生。以黄曲霉毒素B1、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮标准溶液分析了3种毒素胶体金免疫层析快速检测试纸条的最低检出限分别为0.005、0.5 mg/kg和0.3 mg/kg,以回收率和变异系数分析了该快检方法的准确性和精密度,并进一步将该检测技术应用于宁夏稻米毒素的快速检测。结果表明:3种毒素的胶体金免疫层析快速检测试纸条具有灵敏度高、特异性好、操作简单、可通过肉眼直接判读结果的特性,适用于稻米的现场快速检测。     

赭曲霉毒素A无毒体系胶体金试纸条的研制及与传统胶体金试纸条的比较

本实验介绍了赭曲霉毒素A无毒体系胶体金试纸条的研制方法,其中包括胶体金的生产、金标抗体的制备、无毒体系试纸条的组装等步骤。所制备的赭曲霉毒素A无毒体系胶体金试纸条和传统的胶体金试纸条进行了比较,测试结果表明,赭曲霉毒素A无毒体系胶体金试纸条的检测限和检测时间与传统的胶体金试纸条相同,适合于赭曲霉毒素A现场筛查之用。     

动物组织中呋喃它酮代谢物快速检测试纸条的研制

介绍了检测动物组织中呋喃它酮代谢物的胶体金试纸条的研制方法,主要包括胶体金标记物的制备并冻干成微孔试剂,样品吸收垫和反应膜的制备,试纸条的组装等研究步骤,所研制出的呋喃它酮代谢物快速检测胶体金试纸条对动物组织的最低检测限为1.0μg/kg,检测时间短,试纸条特异性好、假阳性率不高于5%、假阴性率为0,可应用于动物组织中呋喃它酮代谢物的快速检测和现场筛查,具有较高的市场应用前景。     

农产品中赭曲霉毒素A免疫层析试纸条快速检测技术研究

基于胶体金免疫层析原理建立了一种快速检测赭曲霉毒素Ａ（ｏｃｈｒｏｔａｘｉｎＡ,ＯＴＡ）的胶体金试纸条的研制方法,包括胶体金的制备、金标记探针的制备、试纸条各条件参数的测试和优化等。试纸条检测ＯＴＡ的肉眼可视检测限为０．２５ｎｇ／ｍＬ,检测时间为１０ｍｉｎ,试纸条能特异性识别ＯＴＡ而不与赭曲霉毒素Ｂ及其他真菌毒素发生交叉反应,使用简单、方便、成本低,重复性好,保质期长,尤其适用于农产品中ＯＴＡ的现场快速筛查。     

基于胶体金免疫层析技术的赤霉素快筛试纸条的研制

研制快速检测豆芽中赤霉素的快筛试纸条。采用免疫层析技术,以胶体金为标记物制备赤霉素单克隆抗体-胶体金偶联物,以竞争抑制模式制备赤霉素胶体金免疫层析试纸条。该试纸条对豆芽中赤霉素的检测限为100 μg/kg,灵敏度为98%,特异性为97%,假阴性率为2%,假阳性率为3%。该方法操作简便,具有较高的灵敏度和特异性,可广泛应用于豆芽中赤霉素残留的现场筛查和检测。     

T-2毒素胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制

应用胶体金免疫层析技术,研制出一种快速检测T-2毒素的方法。采用柠檬酸三钠还原法制备20 nm胶体金,标记抗T-2毒素多克隆抗体并喷于玻璃纤维上,T-2毒素偶联抗原和羊抗兔二抗分别结合于硝酸纤维素膜上,经过试纸条层析条件优化,依次将样本垫、金标结合释放垫、硝酸纤维膜和吸水纸组装切割成胶体金试纸条。测试结果表明T-2毒素快速检测试纸条的灵敏度为50μg/L,检测时间为10 min,批内和批间重复性好,保存期为3个月。使用简单方便,非常适合现场快速检测T-2毒素。     

T-2毒素快速定量检测试纸条的研究

为研制一种快速定量检测玉米中T-2毒素含量的胶体金试纸条,对T-2毒素单克隆抗体进行标记并对胶体金试纸条性能进行研究。用胶体金标记T-2毒素单克隆抗体,通过测定加入不同量碳酸钾后吸光度值的变化,确定标记的最佳pH值,通过与抗原进行正交试验确定最佳组合条件,应用胶体金定量读数仪通过检测线和对照线的对比,检测试纸条的性能。结果表明,单克隆抗体标记的最佳pH值为8.5,最佳标记浓度为20μg/mL,抗原的包被浓度为0.5mg/mL,羊抗鼠IgG的包被浓度为1.0mg/mL,试纸条检测T-2毒素标准品的检测限为5μg/kg。T-2毒素胶体金快速定量检测试纸条检测方法可得出具体数据,与常见真菌毒素无交叉反应,回收率在77%~117.6%之间,批内和批间重复性检测变异系数小于10%,玉米中T-2毒素的检测结果与高效液相法检测结果一致。T-2毒素胶体金快速定量检测试纸条可用于玉米中T-2毒素含量的快速定量检测。     

氯化钙对花生中黄曲霉毒素B1提取及其快速检测结果的影响

以氯化钙为蛋白沉淀剂、黄曲霉毒素B1为靶标,探究了70％甲醇水（V/V）提取液中不同含量氯化钙对花生中黄曲霉毒素提取及其免疫检测结果的影响;采用样品加标回收的方法,研究比较了五种不同含量氯化钙对胶体金免疫层析试纸条和ELISA检测结果的影响。研究结果表明,样品经含1％CaCl2（m／V）的甲醇水处理后,用胶体金免疫层析试纸条检测时,试纸条T线颜色梯度变化,不同浓度加标回收率等参数均得到明显改善,前处理效果显著;选取20份花生实际样品,经过这种前处理之后,进行胶体金免疫层析试纸条和ELISA检测,同时将其检测结果与免疫亲和层析高效液相色谱法（IAC-HPLC）进行比对,胶体金免疫层析试纸条与IAC-HPLC检测结果符合率为90％,间接竞争ELISA与IAC-HPLC检测结果相关系数达0．996,表明本研究所改进的样品前处理方法能提高免疫检测准确度,具有很好的应用性。     

SPE法低成本快速检测乳制品中黄曲霉毒素M1

黄曲霉毒素,1993年被世界卫生组织的癌症研究机构划定为1类致癌物.其中黄曲霉毒素B1毒性和致癌性最强,而黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的代谢物,主要存在于牛奶中.卫生部官网一份有关食物中毒的说明文件指出,黄曲霉毒素主要损伤肝脏,致癌性很强,我国乳及乳制品中规定黄曲霉毒素M1限量为0.5μg/kg. 目前检测黄曲霉毒素的方法通常为免疫亲和层析净化高效液相色谱法和酶联免疫吸附法(ELISA)这两种方法.酶联免疫吸附法(ELISA)操作简单,快速,但灵敏度低且会出现假阳性,需使用免疫亲和柱法进行精确定性、定量,而免疫亲和柱又存在使用繁琐、价格昂贵、储存条件苛刻、保存期短等缺点.