高效液相色谱法测定玉米蛋白粉中游离氨基酸含量

建立高效液相色谱法同时测定玉米蛋白粉中17种游离氨基酸含量的方法。样品用盐酸溶液(0.1 mol/L)提取,采用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基-氨基甲酸酯(AQC)为衍生剂衍生。应用Nova-PakTM C_(18)柱,以10 mmol/L醋酸铵缓冲液、乙腈和超纯水为流动相进行梯度洗脱,柱温为37℃,检测波长为248 nm,外标法定量。结果表明,17种游离氨基酸线性关系良好,其中16种游离氨基酸在0.002 5~0.5μmol/mL范围内具有良好的线性关系,胱氨酸浓度在0.006 3~1.25μmol/mL范围内线性关系良好,相关系数在0.999 1~0.999 9之间,回收率为95.10%~105.21%,RSD为1.36%~4.39%。该方法灵敏度高、重现性好、操作简单,可用于检测玉米蛋白粉中游离氨基酸含量。     

PITC柱前衍生反相高效液相色谱法测定维生素功能饮料中L-赖氨酸和牛磺酸的含量

建立反相高效液相色谱法检测维生素功能饮料中L-赖氨酸和牛磺酸的含量的分析方法。维生素功能性饮料中的L-赖氨酸和牛磺酸通过苯异硫氰酸酯(PITC)柱前衍生,生成有紫外响应的氨基酸衍生物苯胺基硫甲酰氨基酸(PTC-氨基酸),PTC-氨基酸经RP-HPLC梯度洗脱后检测维生素功能饮料中L-赖氨酸盐酸盐和牛磺酸的含量。使用ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6×150mm 5-Micron),流动相A为0.1mol/L的乙酸钠溶液,流动相B为乙腈;流速为1.0mL/min;检测波长为254nm;柱温27℃;进样量20μL。牛磺酸和L-赖氨酸在线性范围内相关系数r0.999,回收率大于97.6,日内RSD分别为0.54%和0.46%(n=6)。结果表明本方法操作性强、灵敏度高,适用于维生素功能饮料中牛磺酸和L-赖氨酸的检测。     

柱前衍生RP-HPLC法测定仙鹤草中氨基酸含量

采用柱前衍生RP-HPLC法对仙鹤草中游离及水解氨基酸进行测定。以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂。以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂;色谱柱采用Ultimate Amino Acid氨基酸柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A为80%(体积分数)的乙腈-水溶液,流动相B为7%(体积分数)的乙腈-CH3COONa溶液(p H=6.5);检测波长为254 nm。21种氨基酸在0.001 9μmol/m L~2.700μmol/m L内呈良好的线性关系(R20.999 0)。21种游离氨基酸平均回收率在95.84%~111.34%之间,RSD在1.23%~2.54%之间(n=6);水解氨基酸平均回收率在90.79%~111.23%之间,RSD在1.29%~2.21%之间(n=6)。柱前衍生RP-HPLC法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,适合仙鹤草中氨基酸含量测定。     

6种葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸含量测定及比较

以异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂,采用Thermo Acclaim~(TM) 120 C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相A为pH 6.5的乙酸钠缓冲溶液,流动相B为甲醇—乙腈—水(体积比20:60:20),在流速1.0mL/min,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长254nm的条件下,建立了高效液相色谱法测定葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸的含量。结果表明,在试验浓度范围内,17种氨基酸的R~2均0.999 0;水解氨基酸的加样回收率为92.0%～104.6%,RSD为0.83%～4.07%;游离氨基酸的加样回收率为95.2%～102.4%,RSD为1.06%～3.98%。同时,6种葡萄籽中水解氨基酸的含量为130.46～163.24 mg/g,游离氨基酸的含量为2.04～5.13mg/g;用于酿造白葡萄酒的雷司令、赛美容和贵人香3种葡萄籽中游离氨基酸含量较高,用于酿造红葡萄酒的黑皮诺、蛇龙珠和赤霞珠3种葡萄籽中水解氨基酸含量较高。该方法稳定可靠,可用于葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸的含量测定。     

高效液相色谱法测定大豆中游离氨基酸含量

以邻苯二甲醛和氯甲酸芴甲酯联合柱前衍生,反相C18短柱分离,二元梯度洗脱,二极管阵列检测器（用于检测胱氨酸和赖氨酸）和荧光检测器（用于检测其他氨基酸）联合检测,建立了反相高效液相色谱法测定大豆种质资源中20种游离氨基酸含量。各氨基酸浓度在5～900μmol／L范围内线性良好,相关系数为0．9991以上。检出限低,灵敏度高。以5％三氯乙酸为提取溶剂,游离氨基酸的提取效果好,标准添加回收率为96．32％～102．25％,相对标准偏差为1．56％～4．30％（n=6）。本方法可用于大豆及其它谷物中游离氨基酸含量的测定。     

柱前衍生RP-HPLC测定杨树花中氨基酸含量

【摘要】目的 建立一种采用柱前衍生-反相高效液相色谱法检测杨树花中游离氨基酸和水解氨基酸含量的方法。方法 以异硫氰酸苯酯进行柱前衍生, 采用高效液相色谱法检测杨树花中游离氨基酸和水解氨基酸含量。结果 21种氨基酸线性范围为0.0019～2.7000 μmol?mL－1, R2均＞0.9990; 21种游离氨基酸的平均加样回收率在88.25％～100.04%之间、RSD 为0.57％～2.73％(n=6), 水解氨基酸的平均加样回收率在90.21％～100.01％之间、RSD 为0.52％～2.32％(n=6)。结论 该方法稳定、快速、精密度高、线性范围宽, 适合杨树花中游离氨基酸和水解氨基酸的含量测定。     

河北省特种桑叶中游离氨基酸的含量测定

测定河北省特种桑叶中游离氨基酸的含量。超声辅助提取桑叶中的游离氨基酸,以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,采用反相高效液相色谱法梯度洗脱测定。液相条件为Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温40℃,流速1 m L/min,检测波长254 nm。16种氨基酸在0.03125~1μmol/m L浓度范围内呈现良好的线性关系,r均大于0.9961,平均回收率为92.2%~101.4%(n=6),RSD5.0%。此方法准确可靠,可用于桑叶及其他药食两用植物中游离氨基酸的含量测定。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定 草本水杨梅叶中氨基酸含量

目的采用柱前衍生反相高效液相色谱法对草本水杨梅叶中氨基酸进行测定。方法样品以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,与草本水杨梅叶中氨基酸柱前衍生,采用Ultimate Amino Acid氨基酸分析专用柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:A为乙腈-水(80:20,V:V),B为乙腈-三水合乙酸钠缓冲溶液(7:93,V:V,p H 6.5),梯度洗脱;柱温35℃,流速1.0 m L/min,检测波长为254 nm。结果 20种氨基酸在0.039~1.250 mmol/L内呈良好的线性关系(r20.9996)。20种游离氨基酸平均回收率在96.51%~108.06%之间,RSD在0.36%~2.08%之间(n=6);水解氨基酸平均回收率在95.29%~102.13%之间,RSD在0.85%~2.45%之间(n=6)。结论该方法可用于草本水杨梅中氨基酸的检测,其灵敏度高且准确,具有良好的重复性及稳定性。     

4种蛋白质沉淀剂测定乳粉中非蛋白氮含量的效果

目的 通过测定乳粉中非蛋白氮含量,比较四种蛋白质沉淀剂分离蛋白质和非蛋白含氮物质的效果。方法 样品加水溶解后分别用15 % 三氯乙酸溶液、丙酮、20 %乙酸铅溶液和3 % 草酸钾-7 % 磷酸氢二钠溶液、乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液沉淀蛋白质,同时用三聚氰胺做加标回收,过滤后取滤液消化定氮。结果 三氯乙酸沉淀法计算非蛋白氮含量为0.2036%±0.0002%,相对标准偏差在四种方法中最小,为0.1023%,加标回收率为96.07±2.29%;丙酮沉淀法计算非蛋白氮含量为0.0981 %±0.0050 %,加标回收率在四种方法中最低,为50.56 %±7.90 %;乙酸铅沉淀法计算非蛋白氮含量为0.1372 %±0.0012 %,加标量为79.2mg三聚氰胺/10g样品时,乙酸铅沉淀法加标回收率比三氯乙酸沉淀法更稳定,为96.57%±1.07%;乙酸锌沉淀法计算非蛋白氮含量为0.3466 %±0.0100 %,加标回收率为86.81 %±2.87 %。结论 三氯乙酸沉淀法结果准确度和稳定性较其他三种方法更好,但受到加标量的影响。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定狭叶红景天中氨基酸含量

目的建立柱前衍生反相高效液相色谱法(reversed-phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)测定狭叶红景天中游离及水解氨基酸种类及含量。方法以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂;色谱柱采用Ultimate Amino Acid氨基酸柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A为80%(V:V)的乙腈-水溶液,流动相B为7%(V:V)的乙腈-CH_3COONa溶液(pH=6.5);检测波长为254 nm。结果 21种氨基酸在0.0019~2.700mmol/L内呈良好的线性关系(r~20.9990)。游离氨基酸平均回收率在97.80%~116.82%之间,RSD在1.93%~2.47%之间(n=6);水解氨基酸平均回收率在99.26%~111.23%之间,RSD在1.70%~2.23%之间(n=6)。结论柱前衍生RP-HPLC法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,适合对狭叶红景天中氨基酸含量的测定。     

重庆糯小米米糠的理化成分分析及营养评价

目的对重庆糯小米米糠的营养成分进行测定,并以此来评价该小米米糠的营养品质。方法以重庆糯小米米糠为研究对象,应用常规分析、DNS比色法、索氏抽提、气相色谱-质谱法(GC-MS)等方法,对其粗纤维、水分、淀粉、蛋白质、脂肪、灰分和还原糖成分进行测定,并且对膳食纤维、脂肪酸及氨基酸营养进行评价。结果上述指标含量分别为34.45%±0.3l%、10.39%±0.14%、12.36%±0.79%、12.93%±0.57%、24.67%±10.51%、8.71%±0.03%、7.24%±0.05%。饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸分别为28.71%、71.29%,饱和脂肪酸11种,不饱和脂肪酸8种。其中饱和脂肪酸:单不饱和脂肪酸:多不饱和脂肪酸=3:2:5,必需氨基酸指数(EAAI)、氨基酸比值系数(RC)分别为0.964、1.002。EAA/TAA=34%,EAA/NEAA=54%,接近FAO/WHO标准模式。结论重庆糯小米米糠是一种优质的膳食纤维源和粮食蛋白资源。     

HPLC Determination of Amino Acids in Musts and Port Wine Using OPA/FMOC Derivatives

ABSTRACT: Musts and port wines pose specific problems for amino acid analysis because of high sugar content. An HPLC technique was applied to the simultaneous quantification of primary and secondary amino acids in these matrices as their OPA-FMOC derivatives. This method enabled the fully automated analysis of 21 amino acids in 20 minutes. The average detection limit was 1.3 mmole/L, precision was 5%-12% for wine samples and accuracy by the standard addition method was 108.3 % (recovery value). Ten port wine and 43 must samples were analyzed for free amino acid contents. Proline represented 73% of the total for wine samples.     

6 种农业特种养殖动物肉中18 种氨基酸含量分析

针对目前国内新兴的6 种农业特种养殖动物,即蓝孔雀、眼镜蛇、滑鼠蛇、海蛇、海龙和海星,探讨6 种动物肉中18 种氨基酸含量的检测方法。运用全自动氨基酸分析仪法测定上述6 种动物的18 种氨基酸含量,样品经90%乙醇沉淀蛋白质后用6 mol/L盐酸溶液水解22 h后离心,上清液氮吹干,用样品稀释液复溶,过滤膜上机检测。以柠檬酸钠和氢氧化钠溶液为流动相进行梯度洗脱,荧光检测器测定,除脯氨酸（Pro）检测波长为440 nm外,其余17 种氨基酸检测波长均为570 nm。结果表明：除胱氨酸质量浓度范围为1.6～8.0 mg/L、牛磺酸为2.0～10.0 mg/L外,其余16 种氨基酸质量浓度范围为3.2～16.0 mg/L时线性良好（r=0.998 5～0.999 9）;方法检出限为0.04～0.42 mg/L;低质量浓度（16 种氨基酸质量浓度为6.4 mg/L,胱氨酸为3.2 mg/L,牛磺酸为4.0 mg/L）条件下的加标回收率为96.11%～109.76%,相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）为0.14%～1.62%,高质量浓度（16 种氨基酸质量浓度为12.8 mg/L,胱氨酸为6.4 mg/L,牛磺酸为8.0 mg/L）条件下的加标回收率为96.12%～104.13%,RSD为0.11%～1.88%;精密度RSD为0.08%～0.94%,稳定性RSD为0.16%～0.97%,重复性RSD为0.09%～0.91%。表明该方法快速易行、准确可靠,可用于蓝孔雀、眼镜蛇、滑鼠蛇、海蛇、海龙和海星的检验方法优化。     

GAS AND HIGH-PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHIC ANALYSES OF AMINO ACIDS IN SOYBEAN MEAL, CORN AND TRITICALE

Analyses of amino acids in six samples each of soybean meal, corn and triticale by high-performance liquid chromatography (HPLC) and gas chromatography (GC) were compared. Samples were hydrolyzed in 6N HC1, then phenylthiocarbamyl (for HPLC) and N-heptafluorobutyryl (for GC) derivatives of free amino acids were prepared and analyzed by the appropriate system. Coefficient of variation within each feedstuff for amino acids analyzed by HPLC ranged from 1.8 (leucine) to 23.5% (methionine) in soybean meal, 2.7 (leucine) to 14.7% (methionine) in corn and 1.7 (leucine) to 14.3% (cystine) in triticale. Corresponding figures from GC analysis were 0.7 to 22.4%, 1.4 to 14.3% and 1.6 to 12.1%, respectively. Linear regression of HPLC on GC values gave good fits with R² ranging from 0.86 for cystine and 0.99 for isoleucine, leucine, lysine, methionine, phenylalanine, threonine, alanine, aspartic acid and glycine. Although some differences between the two systems were evident, feedstuff amino acid values obtained by HPLC and GC analyses compare very well. Results of this study and consideration of such factors as ease of derivatization and length of time for analysis, in our opinion, make HPLC the system of choice.     

岷县高原鳅肌肉营养成分分析与品质评价

采用常规生化分析方法测定了岷县高原鳅(Triplophysa minxianensis)肌肉营养成分的组成和含量,并对其营养价值进行综合评价。结果表明:岷县高原鳅(鲜样)肌肉中水分、粗蛋白、粗脂肪、粗灰分、胆固醇、牛磺酸和维生素E的含量分别为75.43%±0.32%、17.87%±0.14%、1.72%±0.01%、1.57%±0.06%、(114.2±0.8) mg/100 g、(2738.4±50.6) mg/kg和(915.1±3.7) μg/100 g。岷县高原鳅肌肉中共检测出18种氨基酸,总含量(TAA)为15.04%,其中必需氨基酸(EAA)含量为5.98%,占氨基酸总量的39.76%,必需氨基酸(EAA)与非必需氨基酸(NEAA)含量的比值为81.47%,其必需氨基酸比例符合FAO/WTO的理想模式。必需氨基酸指数(EAAI)为75.40,鲜味氨基酸(DAA)含量为5.21%,占氨基酸总量的34.64%,支链氨基酸(BCAA)与芳香族氨基酸(AAA)的比值F为2.97。肌肉中共检测出16种脂肪酸,单不饱和脂肪酸(MUFA)含量为26.79%,多不饱和脂肪酸(PUFA)含量为40.79%,其中二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的总含量为28.77%,必需脂肪酸(EFA)含量为10.40%。分析结果表明,岷县高原鳅具有合理的氨基酸和脂肪酸组成,是一种营养成分均衡、营养价值较高且极具市场开发前景的名特土著鱼类。     

玉米氨基酸测定中缓冲溶液国产化研究

使用原装进口试剂对日立LA8080高速氨基酸分析仪分离度、峰面积和峰保留时间重复性进行了测试,仪器符合相关技术要求。为节省检测成本,开发了缓冲溶液国产化配方,使用国产试剂对仪器性能及方法回收率验证,各氨基酸回收率范围为99.96%~101.42%,与进口试剂相比国产试剂成本降低了88%。使用性能稳定的仪器和国产化配方缓冲溶液测定了18个玉米样品中17种氨基酸的含量,玉米中17种氨基酸均检出,其中含量最多和最少的氨基酸,分别为谷氨酸和胱氨酸。     

反相高效液相色谱法测定烟叶中的游离氨基酸

先用乙醇提取烟叶中的游离氨基酸 ,提取液经阳离子交换树脂纯化后 ,再用邻苯二甲醛(OPA)、氯甲酸芴甲酯 (FMCF)联合柱前衍生化和反相高效液相色谱法测定了烟叶中 17种带伯氨基和 /或仲氨基的游离氨基酸。方法的重复性为 :天冬氨酸 (Asp)、谷氨酸 (Glu)和组氨酸 (His)的相对标准偏差 (RSD)分别为 8.0 %、8.6 %和 9.0 % ,其它氨基酸的RSD均在 3%～ 7%范围内 ;回收率 ,除苏氨酸 (Thr)的为 6 8.0 %较低外 ,其它氨基酸的在 81.0 %～ 110 .5 %范围内 ,平均为 93.9%。用该方法测定了不同等级烟叶中的游离氨基酸。     

爬沙虫主要营养成分分析及其抗利尿作用

目的:对爬沙虫主要营养成分进行测定,并考察爬沙虫的抗利尿作用。方法:分别采用考马斯蓝法、苯酚-硫酸法、索氏提取法、直接干燥法、滴定法测定爬沙虫可溶性蛋白、多糖、油脂、水分及有机酸含量;采用氨基酸分析仪测定爬沙虫氨基酸组分并分析;采用水负荷大鼠模型考察爬沙虫抗利尿作用。结果:爬沙虫冻干粉中可溶性蛋白、多糖、油脂、水分、有机酸含量分别为4.87%±0.03%、1.90%±0.09%、16.45%±0.70%、71.51%±0.66%、3.54%±0.06%;共检测出14种氨基酸,总氨基酸(TAA)含量为52.01 g/100 g,其中必需氨基酸与总氨基酸的比值(EAA/TAA)为48.18%,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值(EAA/NEAA)为92.99%;抗利尿实验表明,爬沙虫可明显减少大鼠排尿量,同时可明显升高大鼠血清中抗利尿激素含量(AVP)。结论:爬沙虫中蛋白、多糖含量丰富,氨基酸组成比例符合优质蛋白质标准,同时爬沙虫具明显抗利尿作用,具有很好的食用价值与药用开发潜力。     

Proteolysis of low-moisture Mozzarella cheese as affected by substitution of NaCl with KCl

The proteolytic and ACE inhibitory activities of low-moisture Mozzarella cheese (LMMC) as affected by partial substitution of NaCl with KCl were investigated. Experimental LMMC were made and salted with 4 salt mixtures: NaCl only (control), 3NaCl:1KCl, 1NaCl:1KCl, and 1NaCl:3KCl, and then proteolytic activity and angiotensin-converting enzyme inhibitory activity were determined. Salt treatment significantly affected angiotensin-converting enzyme inhibitory activity and phosphotungstic acid-soluble N of LMMC during storage. Water-soluble N, trichloroacetic acid-soluble N, lactic acid bacteria population, and total free amino acids were unaffected during storage. Nonetheless, water-soluble N and trichloroacetic acid-soluble N increased significantly during storage within a salt treatment. Peptide profiles and urea-PAGE gels did not differ between experimental cheeses at the same storage time.     

罐头食品中双酚A和双酚F环氧衍生物残留的高效液相色谱分析

建立了一种高效液相色谱分析罐头食品中双酚A(BPA)和双酚F(BPF)环氧衍生物的方法。样品经微波辅助萃取后过PPL(填料为苯乙烯-二乙烯苯(SDVB)聚合物)固相萃取柱进行净化试验。结果表明,微波辅助萃取法的提取效果理想;采用PPL固相萃取回收率在73.26%~104.98%,除杂效果明显。将微波辅助—PPL固相萃取净化法应用于多种食品进行分析,结果表明该方法适用于食品中双酚A和双酚F环氧衍生物残留分析。