影响丙酸菌生长和产酸因素的初步研究

研究了培养方式和各种培养条件对丙酸杆菌的生长、丙酸生物量及环境酸度变化的影响,初步确定丙酸杆菌发酵的初步优化培养方式、培养基的始初pH及不同浓度的营养成分对丙酸杆菌的生长和产酸量的影响,初步优化的培养基成分为葡萄糖3.0%,酵母膏2.0%,蛋白胨0.3%,氯化钴6ppm;培养方式静置有氧培养好;灭菌前pH7.0~7.5。     

丙酸菌生长细胞转化亚油酸生成共轭亚油酸

本文对费氏丙酸杆菌HZ—P-35转化亚油酸生成共轭亚油酸基本特性进行了研究。共轭亚油酸的测定以十七碳烯酸作内标物经甲酯化后采用气相色谱法测定。实验结果表明，费氏丙酸杆菌菌株HZ—P-35在改良MRS培养基中厌氧培养时生长较为缓慢，96h左右对数生长期结束；接种量10％有利于菌株的生长及共轭亚油酸转化；最适温度30℃既有利于菌体生长又有利于共轭亚油酸的生成；细胞边生长边转化底物亚油酸，培养4～5d时共轭亚油酸转化迭最大值，而至第6d菌体浓度具有较大值。     

不同初始pH对丙酸杆菌细菌素发酵的影响

薛氏丙酸杆菌在不同初始pH下摇瓶厌氧发酵,测定发酵液的pH、生物量、还原糖、氨基氮及抑菌活性,探求不同初始pH对丙酸杆菌细菌素发酵的影响。将初始pH为6.0,6.5,7.0,7.5,8.0的培养基分批进行发酵,结果显示:丙酸杆菌在初始pH为6.5时,发酵第2d的生物量为8.4mg/mL,与其他初始pH的差异极显著(P<0.01);以酵母菌和恶臭假单胞菌为指示菌,发酵产物细菌素的抑菌活性在第7d达到最大,初始pH6.5的抑菌活性分别为19.203AU/mL和24.827AU/mL,与其他初始pH的差异均极显著(P<0.01),说明不同初始pH对丙酸杆菌细菌素发酵有很大的影响,其最适初始pH为6.5。     

豆腐酸浆中高产蛋白的白地霉发酵条件的研究

本文对从酸浆中分离筛选出的白地霉FL44菌株在以黄浆水为主的培养基的条件下生产单细胞蛋白的发酵条件进行了初步研究，并对其发酵过程作了动态分析。结果表明：培养基组成、初始pH值、摇瓶装量与培养时间等，均对该菌株细胞生物量和蛋白产量有影响，优化培养基组成为：废糖蜜5％、(NH4)2HPO4 1％)；培养条件为：培养基初始PH5．5，装量40mL／250mL，摇瓶，摇瓶转速为220rpm，30℃培养48h；菌体生物量及蛋白产量分别为：15．2g／L和7．42g／L。     

双歧杆菌麦芽复合汁增菌培养基优选的研究

选择麦芽汁为主要原料，以两歧双歧杆菌Bbm和长双歧杆菌Blm为实验菌株，研究了麦芽汁基础培养基中添加单一营养因子对Bbm菌细胞生长量的影响，进一步利用正交试验优化筛选出Bbm菌麦芽复合汁增菌培养基；利用优选的麦芽复合汁增菌培养基对Blm菌进行验证性增菌试验。结果表明：大豆蛋白胨、牛肉浸膏、酵母膏、玉米浆可显著促进双歧杆菌Bbm的细胞增殖（p〈0．01），而磷酸氢二钾既能促进Bbm生长，又有缓冲培养基pH值的作用；利用L9（3^4）筛选出Bbm的麦芽复合汁增菌培养基的最佳配比为：在10°麦芽汁中添加0．3％大豆蛋白胨，0．6％牛肉浸膏，0．5％酵母膏，0．4％玉米浆，0．2％磷酸氢二钾，在麦芽复合汁增菌培养基中，经37℃培养12h，Bbm活菌数3．84×109CFU/ml，Blm活菌数达到3．90×109CFU／ml，较对照麦芽汁培养基的活菌数分别提高了8．17倍和8．14倍，较实验室常用的改良MRS培养基的成本降低1000元/吨。     

响应面法优化产丙酸杆菌素菌株的培养条件

响应面法已成功运用于发酵过程的优化,可以对发酵培养基及培养条件等诸多因素进行考察和评价,从而有效地确定重要因子的最优水平,取得更好的发酵效果,因此本文主要采用响应面法对丙酸杆菌素产生菌株的发酵培养基进行优化,以提高丙酸杆菌素抑菌能力.首先采用Plackett-Burman(PB)试验设计法筛选出3个主要因素为葡萄糖、Tween80和pH值,然后通过最陡爬坡法和响应面分析方法确定主要因素的最佳质量浓度分别为:葡萄糖2.32g/L,Tween80 0.1 g/L,pH值为7.0.在优化条件下丙酸杆菌素押菌能力增强,形成的抑菌圈直径是24.76 mm,是优化前的1.25倍.     

响应面法优化产酸丙酸杆菌丙酸发酵条件的研究

采用Box-Behnken设计和响应面分析法(Response surface methodology,RSM),以产酸丙酸杆菌发酵甘油产丙酸的3个关键因素(培养温度、pH和接种量)为自变量,以丙酸产量为响应值,对上述因素的最佳水平范围进行了探讨与优化。实验结果表明,培养温度和pH对丙酸产量有显著性影响,并据此建立了相关的数学模型。得到的工艺参数的优选结果是:培养温度为29.75℃、pH为6.61、接种量为6.15%(v/v),丙酸产量最大预测值为17.96g/L。经过优化,丙酸产量提高了27.9%,实验值与预测值基本相符。     

A群链球菌制剂无血培养基条件的优化

采用均匀试验对无血培养基的氮源、碳源和能源配比进行优化设计，数据结果进行偏最小二乘回归建模，确定无血培养基最佳配比：胰蛋白胨2％，葡萄糖0．9％，酵母粉0．4％，NaCl 0．5％，磷酸二氢钾0.1％．pH7．4-7．6。A群链球菌在无血培养基上生长良好，生物产量稳定，平均产率可达0．36g／L，菌体形态和生物产量与利用血培养基相当。结果表明均匀设计偏最小二乘回归建模能有效地优化发酵培养基配比。     

基因工程菌Pichia Pastoris高密度培养条件的摇瓶研究

对基因工程茵Pichia pastoris高密度培养的培养基进行了研究，选取了价廉易得的培养基，对此培养基各组分进行了优化，并对其它发酵条件进行了优化试验，得到了最优培养基配方及培养条件。结果表明，培养基最佳配方为：葡萄糖为5％，氨水单次补料量为20μL(250mL摇瓶装液量为20mL)，KH2PO4浓度为0．7％，培养基其它组分为：K2HPO40．1％、MgSO4．7H2O0．03％、FeSO4．7H2O0．05％、MnSO4．H2O0．05％。种子液最佳培养时间为40h，接种量为10％，250mL三角瓶装液量为20mL，摇床转速为220r／m，发酵培养基最佳初始pH5．5，发酵温度为30℃，发酵结束时间64h。在此优化的培养基及培养条件下，茵体密度达到最高，OD600达到64．3，细胞干重20．2g／L。     

乳品丙酸杆菌素作为生物防腐剂的研究进展

乳品丙酸杆菌细菌素是乳品丙酸杆菌产生的多肽或蛋白质。本文主要对乳品丙酸杆菌特性及其细菌素种类和防腐作用作详细介绍，由于乳品丙酸杆菌素是食品级微生物产生的而且具有较广泛的pH耐受和热稳定性，因此是一种极好的天然食品防腐剂，具有广泛的应用前景．     

金藻3011的培养条件优化及扩大培养研究

以金藻3011为材料，采用一次性培养方式，通过单因子梯度法研究了不同光照强度、温度、pH值对藻密度、细胞活性的影响；通过正交分析试验研究了N^3＋、P^5＋、Fe^3＋及NaCl添加量对金藻3011的生物量的影响，获得了以人工海水为基础的优化培养基配方：通过对比性试验研究了通气方式对自制6L光合生物反应器中高密度培养的金藻3011的生长速度和细胞密度的影响。结果表明：金藻3011适合在光照强度为33201ux，温度为24℃，偏碱性环境中生长，pH值为8．0，N^3＋、P^5＋、Fe^3＋浓度及NaCl添加量分别为0．04039g／L、0．0044g／L、3．90mg／L、20．476g／L时金藻3011．生长最迅速，生物量及TTC细胞活力亦最高，生物量是优化前的1．432倍；以此培养条件及营养盐配比用于6L水平培养，在通气时间10min／次，通气次数3次，d的条件下，细胞干重可达到0．6613g／L，使最终生物量为优化前的1．815倍。     

蒺藜对L.acidophilus和L.bulgaricus生长的影响

研究了不同浓度的蒺藜药液及药液离心与否对嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌生长的影响。结果表明，蒺藜药液培养嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌的最佳浓度均为0．111g／mL；药液离心对嗜酸乳杆菌的生长和药液的pH几乎没有影响；药液离心对保加利亚乳杆菌的生长和药液的pH均有较大影响，与对照相比，其菌体减少，pH升高。     

嗜酸乳杆菌-地衣芽孢杆菌融合子培养特性研究

嗜酸乳杆菌-地衣芽孢杆菌融合子分别进行固体培养和液体培养,观察融合子在不同培养基和不同培养条件下的生长状况、个体形态以及菌落形成,探索培养基的种类、pH值、温度、培养方式等对融合子生长量的影响,同时对其产酸性能进行了分析。结果表明:融合子在不同培养基的生长情况为:CMBPM≈LBMRS,CM、MRS和LB培养基的适宜初始pH值分别为6、7和5,BPM培养基初始pH值对融合子的生长繁殖影响不显著(P0.05)。在CM培养基中,37℃更适于融合子生长,其他培养基的最适培养温度均为35℃。除MRS培养基适合隔氧静置培养外,其他3种培养基则配以通氧摇床培养方式。     

温度、pH及盐对植物乳杆菌素L-1作用单核细胞增生李斯特氏菌的影响

本试验分析了透析除盐后的植物乳杆菌素L-1的效价和作用方式，测定了在食品加上过程中常涉及到的温度、pH和盐等生化条件对其作用单核细胞增生李斯特氏菌的影响，并初步探索了pH和盐对植物乳杆菌素L-1吸附作用的影响。结果表明：透析除盐后的植物乳杆菌素L-1的效价可达1280AU／ml，作用方式为杀菌；低温下144h内可以控制住初始菌数，高温下可以短时间内迅速降低初始活菌数；在pH7．0下，该细菌素的抑菌效果最好；无论是TSBYE培养基中还是磷酸缓冲液中，试验所采用的四种盐对植物乳杆菌素L-1的杀菌作用都有一定的拮抗作用，各盐之间和同种盐内不同浓度间差异不显著；对吸附作用的初步研究发现pH对植物乳杆菌素的吸附作用有一定影响，而盐对其影响不显著。     

丙酸菌代谢乳酸特征的研究（第1报）

将丙酸菌应用于浓香型大曲酒生产,对丙酸菌代谢乳酸的特征做了研究。结果表明:①本所分离得到的C_2-08丙酸菌以乳酸(1266mg/ml)为底物(pH7)发酵一周,乳酸降解率为100％,代谢产物为丙醋和乙酸,比例为3.07:1;②该菌的pH活性曲线表明,pH4～7均能生长,以pH7最快,pH5最适宜;③pH5培养液的生物量随乳酸含量的增加而增加;④丙酸菌在葡萄糖与乳酸共存时,乳酸降解率随葡萄糖浓度增加而随之高于葡萄糖转化率。在2％乳酸钠溶液含3％葡萄糖量发酵4天时,乳酸降解率为95.02％,葡萄糖转化率为55.12％;而含2％葡萄糖量时则乳酸降解率为78.98％,葡萄糖转化率为61.88％;⑤在pH4～5黄水稀释液中发酵结果得出该菌只利用乳酸为碳源,培养一周乳酸降解率达85％～95％以上。不利用己酸及其它有机酸。     

乳酸菌对肠出血性大肠杆菌O157:H7抑制作用的研究

为探讨乳酸菌对肠出血性大肠杆菌O157：H7 ATCC43895(E．Coli O157：H7)的抑制作用，在培养基上进行了研究。将E．Coli O157：H7与干酪乳杆菌干酪亚种、植物乳杆菌、发酵乳杆菌、乳酸乳球菌和瑞士乳杆菌同时接种在培养基中，E．Coli O157：H7的活性不受影响；将E．Coli O157：H7接种到培养了24h的乳酸茵培养液中，E．Coli O157：H7活性显下降。以乳酸调整的低pH值对E．Coli O157：H7有一定的杀灭作用。本研究表明：乳酸菌的代谢产物乳酸对E．Coli O157：H7有杀灭作用。     

以浓醪酒糟为基质的发酵生产单细胞蛋白的工艺条件的优化

主要研究进行以浓醪酒糟为基质的SCP发酵，对其培养基的优化，探讨了氮源、磷酸盐、无机盐及发酵起始温度、发酵起始pH和不同种龄、不同接种量、溶氧对发酵的影响。其优化的培养基为酒精糟液、硫酸铵1.5‰、硫酸镁0.3‰；而优化的发酵工艺条件是：初始pH为4．5、装液量为15mL/250mL、培养温度为30℃、150转／分钟的摇床。发酵后得到的结果是：淀粉含量从1．62％降到1．125％，降幅达30．6％；菌浓达到了2．51g/100mL；真蛋白含量达51．7％；COD从59669．9降到30940．3，COD去除率达48．18％。产物中酵母数达9．88亿个／mL，营养丰富，可直接用作饲料。     

产类胡萝卜素沼泽红假单胞菌的生长特性

研究了碳源、氮源、微量元素、生长因子、光照强度、温度、pH值等因素对产类胡萝卜素沼泽红假单胞菌生长的影响。结果发现碳、氮源中醋酸钠、酵母浸骨对沼泽红假单胞菌生长的影响比较大；B、Zn及对氨基苯甲酸对沼泽红假单胞菌生长有一定促进作用。通过研究确定了培养沼泽红假单胞菌的较佳条件，即优化了培养基：初接种量为3％左右，pH6．5-8.5，28℃，2000lx。     

痤疮丙酸杆菌拮抗菌的筛选、发酵优化及安全性评价

痤疮是一种毛囊皮脂腺单位的皮肤炎症，青少年患病率可达85%,它的发病与痤疮丙酸杆菌的定植有关。获取能够高效拮抗痤疮丙酸杆菌的微生物，丰富痤疮丙酸杆菌拮抗菌的资源库。采用琼脂扩散法从酸菜中筛选出对痤疮丙酸杆菌具有较强抑菌活性的菌株。通过菌落形态、生化鉴定和16S rDNA序列比对进行菌株鉴定。从培养基优化及发酵条件优化两方面提升拮抗菌的抑菌活性。采用体外安全评价方法评估拮抗菌的安全性。筛选得到一株能高效拮抗痤疮丙酸杆菌的菌株HA2,初步鉴定为海恩西芽孢杆菌(Bacillus haynesii)。通过优化菌株HA2的发酵条件，将过膜发酵上清液抑菌圈的直径从38 mm提升至53 mm。根据四环素效价曲线换算，效价从20 308.6 U提升至112 927.6 U,提升5.56倍。经体外安全评价，初步判断菌株HA2为安全菌株。海恩西芽孢杆菌HA2是一株能高效拮抗痤疮丙酸杆菌，且成功通过体外安全评价的菌株，具有进一步研究的价值。     

响应面法优化P.acidipropionici产酸发酵培养基

利用响应面分析法优化产酸丙酸杆菌发酵产酸培养基.在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken试验设计,选定甘油、混合氮源(酵母提取物:胰酶大豆肉汤=2∶1)和磷酸氢二钾3个关键因子为响应因子,以丙酸产量为响应值建立多元二次回归方程,在分析各个因素的显著性和交互作用后,确定了产酸丙酸杆菌发酵产酸的最优培养基为:甘油44.4g/L、混合氮源(酵母提取物:胰酶大豆肉汤=2∶1)27.0g/L、K2HPO4 2.0g/L,丙酸产量最大预测值为20.75g/L.经过优化,丙酸产量提高了151％,实验值与预测值基本相符.