氢化物发生—原子吸收法测定炼油工业渣泥中的砷

本文报导了氢化物发生-原子吸收法(HG—AAS)测定炼油工业所产生的渣泥中砷的测定方法.研究了仪器的最佳工作条件,样品处理和实验条件,考查了共存离子的干扰.用本法测定渣泥中的砷,灵敏度为0.7ng/mL/1%吸收,检出限为0.8ng/mL,变异系数小于40%,回救率为95%～105%,方法的线性范围为0.0～10.0ng/mL。     

玻碳电极上的自组装APMDES制备电化学生物传感器

在玻碳电极表面自组装氨丙基甲基二乙氧基硅烷(APMDES)单分子膜,从而使玻碳电极上修饰了-NH2基团,用于检测低浓度小牛血清蛋白,采用金标银染的方法,对修饰电极检测蛋白的能力和自组装膜的致密性进行了研究.试验结果表明自组装膜的致密性主要受组装液浓度、组装时间和温度的影响.当 APMDES在乙醇溶液中的体积分数为3%,组装时间为4h、温度为30℃时,组装膜成膜状况较为理想.在最佳试验条件下,修饰上氨基的玻碳电极对检测质量浓度为0.5～0.05ng/mL的小牛血清蛋白有良好的响应,回归线性方程为I(μΑ)=0.8254 1.4319×C(ng/mL), R=0.958,检测极限为0.02ng/mL,背景电流信号小于2.0×10 -7A,检测的信噪比达到最佳.     

基于差分光电技术的人血清PSA检测算法研究

血清前列腺特异性抗原(PSA)是前列腺癌早期诊断的重要指标之一.通过采用免疫层析金标试纸和差分光电技术检测PSA浓度的方法,并用分段线性拟合方法分别拟合浓度为0.5～5 、5～50 和50～100 ng/mL范围内PSA浓度和T/C比值的关系.标定结果显示,在5～50 ng/mL范围内PSA浓度和T/C比值的线性相关性较好,其调整决定系数R2为0.924 27,而在该范围之外,它们的线性相关性都较差,不适合用作PSA检测.在浓度为5～50 ng/mL范围内做了11组检测实验,检测值和真实值的相关系数达到了0.910.实验证明,采用差分光电技术检测PSA浓度并用分段线性拟合方法做数据处理是可行的     

食品中磺胺类药物化学发光酶联免疫检测试剂盒的初步研究

在常规酶联免疫法的基础上,将磺胺类母核与牛血清白蛋白合成免疫抗原后免疫小鼠制得磺胺类单克隆抗体,并进一步优化抗体工作浓度、反应时间等实验参数,建立了一种简便、快速、精确的磺胺类残留一步式化学发光酶联免疫检测方法.结果表明该方法最佳检测范围为1.0～81.0 ng/mL,检测IC50达3.047 ng/mL,对猪肉的最低检测限为0.74 ng/g,可检出国际规定的SAs残留标准底限值以下的残留量.与常规ELISA方法相比,检测限和灵敏度基本一致,但反应时间缩短了60 min.证明采用一步式化学发光酶联免疫检测磺胺类残留可以大幅度缩减检测时间,符合快速检测的要求.     

玻碳电极上的自组装APMDES制备电化学生物传感器

在玻碳电极表面自组装氨丙基甲基二乙氧基硅烷（APMDES）单分子膜,从而使玻碳电极上修饰了－NH2基团,用于检测低浓度小牛血清蛋白,采用金标银染的方法,对修饰电极检测蛋白的能力和自组装膜的致密性进行了研究。试验结果表明：自组装膜的致密性主要受组装液浓度、组装时间和温度的影响。当APMDES在乙醇溶液中的体积分数为3 %,组装时间为4 h、温度为30 ℃时,组装膜成膜状况较为理想。在最佳试验条件下,修饰上氨基的玻碳电极对检测质量浓度为0.5～0.05 ng/mL的小牛血清蛋白有良好的响应,回归线性方程为：I (μΑ)=0.825 4+1.431 9×C（ng/mL）,R=0.958,检测极限为0.02 ng/mL,背景电流信号小于2.0×10-7 A,检测的信噪比达到最佳。     

克伦特罗酶免检测试剂盒的评价

以自制克伦特罗酶免检测试剂盒与德国r-B iopharm公司生产的试剂盒对比,从稳定性、重复性、特异性、灵敏度、精度、检测范围、IC5和检测时间多个角度对本产品进行了质量评估,结果显示,各项参数均接近于德国r-b iopharm公司的试剂盒。批间C.V.%<15%,批内C.V.%<10%,检测灵敏度可达到0.096ng/mL。ED50稳定在1.22ng/mL左右。检测精度在80~110%之间;检测范围为0.24~9.45ng/mL;检测时间小于2h。     

放线菌素D诱导的SL-1细胞凋亡的初步研究

研究了一定浓度的放线菌素D诱导SL-1细胞凋亡作用.以终浓度为50ng/mL,100ng/mL,200ng/mL,500ng/mL的放线菌素D处理正常SL-1细胞,24h后,终浓度为200ng/mL,500ng/mL的放线菌素D处理的细胞出现较明显的细胞凋亡现象,光学显微镜下可见细胞膜表面突出或形成小泡,细胞碎裂成凋亡小体;DAPI染色荧光显示细胞核逐渐形变,直至碎裂成小块而被凋亡小体包裹;DNA琼脂凝胶电泳呈典型的凋亡细胞DNA梯形条带;流式细胞仪检测结果,对照和以上四种浓度的放线菌素D处理的细胞凋亡率分别为3.43%,10.61%,15.60%,32.67%,72.24%.实验结果证明一定浓度的放线菌素D能诱导SL-1细胞凋亡,且成剂量正相关.     

血清中总cTnI、全长cTnI与cTnI-C复合物联合检测方法的建立及其临床应用

通过时间分辨荧光免疫分析法(Time-resolved fluorescence immunoassay,TRFIA)建立血清中全长cTnI、总cTnI、cTnI-C复合物的联合检测方法并进行方法学评估,并采用总cTnI、cTnI-C复合物及全长cTnI/总cTnI比值分析心肌损伤程度、发病时长及疗效。结果表明:Total-cTnI-TRFIA(检测总cTnI)灵敏度为0.030 ng/mL,检测范围为0.030～40.000 ng/mL,回收率为106.62%,与临床检测方法相关性最高(R~2=0.9225),阳性检出率为100.00%;Full-cTnI-TRFIA(检测全长cTnI)灵敏度为0.007 ng/mL,检测范围为0.007～40.000 ng/mL,回收率为102.23%,与临床检测方法相关性最低(R~2=0.6238),阳性检出率为90.90%;cTnI-C-TRFIA(检测cTnI-C)灵敏度为0.011 ng/mL,检测范围为0.011～40.000 ng/mL,回收率为92.15%,与临床检测方法相关性居中(R~2=0.8868),阳性检出率为98.70%。三种方法批内和批间的变异系数均小于10.00%。对3名心肌损伤患者进行连续检测,结果表明:总cTnI和cTnI-C复合物的浓度可以准确反映患者心肌损伤的程度;全长cTnI占比可以更好地提示发病时间,对预后的提示更早。联合检测血清全长cTnI与总cTnI并计算全长cTnI占比具有更好的临床诊疗前瞻性,有助于心肌损伤的诊断与疗效评估。     

面粉中砷和硒的微波消解-氢化物发生原子荧光测定法研究

用微波消解-氢化物发生原子荧光法对面粉中砷、硒的测定方法进行了研究.选定了最佳微波消解条件和测定条件,检出限As:0.23 ng/mL,Se:0.15 ng/mL,线性范围As:0～50 ng/mL,Se:0～20 ng/mL,线性系数大于0.999 3,回收率分别为砷94.3%～104.5%,硒89.6%～107.2%,RSD小于6%.该方法简便快速、灵敏准确.对市售小麦粉精粉和玉米面进行测定,结果满意.     

分子印迹光子晶体技术在食品痕量有毒物检测中的应用现状与展望

分子印迹光子晶体技术因其较好的专一性,选择性,灵敏性以及响应性,目前被广泛应用于食品中有毒物的检测。本文介绍了分子印迹光子晶体技术的原理、合成方法以及在食品中痕量有毒物检测中的应用,其中对农药吡虫啉、莠去净、甲基膦酸的检测限达到10~(-13)g/mL、10~(-8)ng/mL、10~(-6)mol/L,对兽药氯霉素、17β-雌二醇的检测限达到1 ng/mL、1.5 ng/mL,对食品中三聚氰胺和双酚A的检测限达到10~(-5)mg/mL、10~(-10)mol/L,并对分子印迹光子晶体技术进行了展望。     

单模微波消解-ICP-MS法同时对大枣中19种元素的测定与分析研究

建立单模微波消解-电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)同时测定大枣中19种元素的方法。运用全自动单模微波消解仪对样品进行微波消解处理,通过对ICP-MS分析条件的选择及优化并上机测定,结果显示:Ag、As、Cr、Ni等12种元素标准曲线浓度范围在0～50 ng/mL之间,相关系数均大于0.995,表现出良好的线性关系;Al、Ba、Cu、Fe等7种元素标准曲线浓度范围在0～1000 ng/mL之间,相关系数均大于0.995,线性关系良好。对各浓度梯度元素分别1倍,2倍、10倍三水平加标回收试验,加标回收率在65%～110%之间,符合微量元素的定量分析要求。本研究所测方法操作简单方便、可靠,且具有较高的精密度和准确度,满足大枣中多元素的日常检测要求,同时为其质量控制及安全性评价提供方法技术支持。     

Validated,Rapid and Sensitive HPLC-MS/MS Method for Determination of 7,4′-Dihydroxylflavone in Rat Plasma and Its Application to Preliminary Pharmacokinetics

A sensitive,specific and rapid high-performance liquid chromatography-electronic spray ionization-tandem mass spectrometric method was developed and validated for the determination of 7,4′-dihydroxylflavone(7,4′-DHF)in rat plasma.Genistein(internal standard,IS)was added in the collected plasma samples and subsided together by a simple one-step protein precipitation using acetonitrile-methanol(1∶1,v/v).Chromatographic separation was performed on an Agilent Zorbax XDB C18 chromatography column and gradient elution with the mobile phase consisting of methanol and 0.1%formic acid was used.The mass spectrometric detection was performed by negative ion electro-spray ionization in multiple selected reactions monitoring(MRM)mode,with the transitions of m/z 253.1→113.0 for 7,4′-DHF and m/z 268.9→158.8 for IS.The calibration curve has liner relationship over the concentration range of 0.1-50 ng/mL(r=0.995 4).The intra-and inter-day precision(RSD %)was less than 10%,and the accuracy(RE%,relative error)ranged from-5.2%to 8.0%.The fully validated method was applied to the pharmacokinetics(PK)of 7,4′-dihydroxylflavone(7,4′-DHF)in rat plasma after oral administration(two doses:15 and30 mg/kg)and intravenous injection(5 mg/kg).The result showed that T_(max) and C_(max) was 1.33±0.29 h and 0.12±0.02 ng/mL(15 mg/kg),and 1.17±0.29 h and 0.17±0.04 ng/mL(30 mg/kg),respectively.The bioavailability was 0.078%(15 mg/kg)and 0.070%(30 mg/kg),respectively.     

人参皂苷Rb1单克隆抗体的制备与鉴定

用人参皂苷Rb1分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)反应合成了交联抗原GRb1-BSA(GRb1与BSA的结合比为10∶1)和GRb1-OVA(GRb1与OVA的结合比为8∶1)。以GRb1-BSA为免疫原,分5次免疫3只BALB/C小鼠,取免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合,Hat筛选,有限稀释法克隆。建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系。采用ELISA(酶联免疫吸附测定)间接法和竞争法检测抗体的特异性。结果获得了一只小鼠分泌抗体效价达1∶16000,并获得两株分泌GRb1的单克隆抗体的细胞系,分别命名为1F7和1G3,单抗检测显示在0.01~1μg/mL呈线性关系,GRb1的检测范围达50~350 ng/mL,两株单抗针对相同的抗原决定簇,制备的单克隆抗体可用于GRb1含量的检测和分离。     

数理统计在石墨炉原子吸收分析中的应用

通过正交设计实验对石墨炉原子吸收光谱分析进行条件优化,并对常人尿中的镉含量进行了测定．结果表明,在优化分析条件下,镉的检出限为０００６２ｎｇ／ｍＬ,平均回收率９８１０％;对１０００ｎｇ／ｍＬ的镉溶液进行１０次平行测定,变异系数为２９８％．     

小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定及方法研究

利用免疫亲和柱对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的特异吸附性,使用高效液相色谱法对样品进行测定.研究了提取方式、样品粒度、样品溶液稳定性、振荡提取时间等因素对检测结果的影响.当标准曲线在0～2.0 μg/mL之间,线性关系良好,相关系数达到0.999 1.检测结果RSD小于8.0％,不同水平的加标回收率处于92.0％～107.4％之间,通过回收率试验和标准物质试验验证了方法的可靠性和准确性.     

基于酶联适体竞争法检测谷物制品中真菌毒素的研究

核酸适体作为一种新型分子识别元件,具有可体外合成、易修饰、稳定性好等优势,被认为是抗体的良好替代物.自玉米赤霉烯酮(ZEA)核酸适体被成功筛选以来,基于核酸适体与靶标的高特异性结合,构建了酶联适体间接竞争法检测玉米赤霉烯酮的新方法.ZEA与ZEA适体互补链DNA1竞争性结合酶标板上固定的ZEA适体,未结合的DNA1链被...     

液相色谱-二极管阵列检测法同时测定血液中6种毒品及其代谢物

建立了一种同时测定血液中吗啡、苯丙胺类、氯胺酮和杜冷丁等6种常见毒品的液相色谱-二极管阵列检测器联用的定性定量方法。条件为以乙腈和0.005mol/L的磷酸二氢钾水溶液为流动相,梯度洗脱,经C18色谱柱分离,二极管阵列检测器检测,检测波长210nm。利用保留时间和紫外吸收光谱进行定性分析。血浆中6种毒品在8.0～200.0ng/mL范围内线性关系良好（r2=0.999 2）,回收率范围为68.9%～95.2%,检测限为3.3ng/mL。结果表明,该方法操作简便、快速、选择性强、灵敏度高,适于血液中6种常见毒品及其代谢物的分析,可为相关案件提供方法和技术支持。     

Sensitive determination of DNA based on resonance light scattering enhancement of azocarmine G and CTAB

A new method for the determination of DNA was developed with azocarmine G（AG） in the presence of cetyltrimethylammonium bromide（CTAB） by the resonance light scattering （RLS） technique. The synthetic samples were determined with satisfactory results, and the reaction mechanism was also studied. The results show that under the optimum conditions, the weak RLS signal of AG can be enhanced by DNA, which results from the formation of a new ternary complex AG-CTAB-DNA with large size. Moreover, the enhanced RLS intensity at 552 nm is directly proportional to the concentration of DNA in the range of 0 - 1.0 μg/mL for fish sperm DNA （fsDNA） and 0 - 1.5μg/mL for calf thymus DNA （ctDNA）. Based on this, a new assay of DNA can be established. The detection limits （3σ） are 2. 1 ng/mL for fsDNA and 2.2 ng/mL for ctDNA, respectively.     

催化荧光法测定痕量亚硝酸根

在稀磷酸介质中，痕量亚硝酸根能催化溴酸钾氧化荧光桃红并使其荧光猝灭，且荧光猝灭程度与亚硝酸根加入量成比例关系，据此建立了催化荧光法测定痕量亚硝酸根的新方法．其激发波长λex=435．8nm，发射波长λem=560nm，测定亚硝酸根的线性范罔为0．0-11ng／mL，检出限为0．37ng／mL．将拟定的方法用于水样、蔬菜、粮食中亚硝酸根含量的测定，结果与Griss法一致．