中心组合设计-效应面法优化RGD修饰粉防己碱-异长春花碱脂质体处方

目的采用中心组合设计-效应面法优选精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)修饰粉防己碱(TET)-异长春花碱(VRB)脂质体的最佳处方。方法采用主动载药法中的硫酸铵梯度法,制备RGD修饰TET-VRB脂质体。用高效液相色谱法(HPLC)分别测定脂质体的包封率。以卵磷脂与胆固醇的摩尔比(EPC/Chol)、卵磷脂与聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺的摩尔比(EPC/PEG 2000-DSPE)、EPC与VRB的质量比(EPC/VRB)3个因素作为自变量,考察各因素对包封率的影响,并对每个因素进行二项式拟合,运用效应曲面函数求出最佳处方。结果优选出的RGD修饰TET-VRB脂质体的最佳处方是EPC/Chol=1.5:1,EPC/PEG 2000-DSPE=20:1,EPC/VRB=15:1。结论中心组合设计-效应面法操作简单、准确度高、预测性好,优选出的处方制备RGD修饰TET-VRB脂质体符合设计要求。     

R_8GD多肽修饰大黄素脂质体的处方优选及含量测定

目的采用星点设计-效应面法优选R_8GD多肽修饰大黄素脂质体的最佳处方,并建立R_8GD多肽修饰大黄素脂质体中大黄素的含量测定方法。方法采用薄膜-超声分散法制备R_8GD多肽修饰大黄素脂质体。以包封率为指标,采用星点设计-响应面法优化处方中胆固醇和大黄素的用量及超声波细胞捣碎机的功率。通过方法学考察,建立高效液相色谱法(HPLC)测定R_8GD多肽修饰大黄素脂质体中大黄素含量的方法。结果 R_8GD多肽修饰大黄素脂质体的最优处方为磷脂22 mg、胆固醇4.5 mg、大黄素1.2 mg,超声波细胞捣碎机的功率为500 W,其包封率为95.78%±0.64%(n=3)。含量测定中,R_8GD多肽修饰空白脂质体对主药含量的测定无干扰。R_8GD多肽修饰大黄素脂质体中大黄素在5～35μg/ml范围内线性关系良好;脂质体中大黄素平均加样回收率大于95%;脂质体中大黄素的含量为229.872±1.53μg/ml。结论星点设计-响应面法优选出了大黄素脂质体的最佳处方。HPLC准确、简便、重现性好,可用于大黄素脂质体中药物含量的质量控制。     

聚乙二醇修饰木犀草素脂质体的制备及其理化性质

研究聚乙二醇修饰木犀草素脂质体的最佳制备工艺,以提高木犀草素的生物利用度。采用薄膜分散法制备聚乙二醇修饰木犀草素脂质体,以磷脂、胆固醇和磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000作为载体,包封率为评价指标,采用Box-Behnken设计实验响应面优化法优化工艺参数,分析聚乙二醇修饰木犀草素脂质体的粒径、电位和形态等指标。结果表明聚乙二醇修饰木犀草素脂质体的最佳制备参数为：膜材比为10:1,脂药比为16:1,磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000的质量分数为3%,超声时间15 min,水化温度40 ℃。Box-Behnken响应面法优化后的聚乙二醇修饰木犀草素脂质体平均包封率为86.3%,平均粒径为134.1 nm,电位为-14.07 mV,且在胃液、小肠液和结肠液中的累积释放率分别为39.08%、43.67%和71.71%。所制备的聚乙二醇修饰木犀草素脂质体包封率高,粒度均匀,缓释效果明显。     

PEG修饰EGCG/Cur复合脂质体的制备与抗氧化研究

本研究采用薄膜水合法制备表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)/姜黄素(Cur)复合脂质体(EGCG/Cur-L),通过单因素实验确定最佳制备工艺。为了增加脂质体的稳定性,对EGCG/Cur-L表面进行二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(DSPE-PEG₂₀₀₀)修饰,并对两种脂质体的包封率、粒径分布、微观形态和修饰效果进行研究,同时采用DPPH法评价脂质体的氧化稳定性。结果表明:EGCG/Cur-L的最佳工艺为:卵磷脂与胆固醇质量比为6:1,PBS缓冲溶液pH为6.5,EGCG添加量为6 mg,Cur添加量为3 mg,水化温度为55℃。EGCG包封率为68.78%,Cur包封率为90.23%,平均粒径为183.8±5.4 nm,多分散系数(PDI)为0.178±0.01,平均Zeta-电位为-34.7±0.62 mV。修饰后EGCG包封率为60.31%,Cur包封率为88.53%。表面修饰后Cur的包封率无明显变化,EGCG包封率有所下降;动态光散射(DLS)和透射电子显微镜(TEM)结果表明,修饰后脂质体的平均粒径从未修饰的183.8 nm增大到374.5...     

乳铁蛋白脂质体的制备

采用薄膜分散法、逆向蒸发法和复乳法制备乳铁蛋白脂质体,再利用透射电镜描述其粒子形态,红细胞溶血实验测定pH敏感性.结果表明,制备乳铁蛋白脂质体最佳方法是复乳法,制备的最佳条件是Lf与膜材的质量比1:1 50,EPC:TO:Chol质量比7:2:1,氯仿:乙醚体积比1:1和初乳与葡萄糖溶液的体积比1:3,二油酰磷脂酰乙醇胺添加量为类脂的5.0%时即具有pH敏感性.本研究证明了制备乳铁蛋白脂质体的最佳方法是复乳法,所制备的乳铁蛋白脂质体是具有pH敏感性的高包封率脂质体.     

茶多酚脂质体的制备

利用响应面分析法(RSM)对乙醇注入-超声法制备茶多酚脂质体的工艺进行研究。在单因素试验基础上选取影响茶多酚脂质体包封率的4个主要因素茶多酚与磷脂质量比(TP:PC)、胆固醇与磷脂质量比(CH:PC)、VE与磷脂质量比(VE:PC)和乙醇用量,根据Box-Behnken试验设计原理采用四因素三水平的响应面分析法对各个因素的显著性和交互作用进行研究。茶多酚脂质体最佳制备工艺参数为TP:PC=81:300,CH:PC=58:300,VE:PC=16.7:300和乙醇4.5mL。在最优条件下茶多酚脂质体包封率达78.10%,电镜观察表明茶多酚脂质体形态均匀,呈现不规则的椭圆形,粒径分布于400～1000nm范围内。     

山楂叶提取物类脂质体的制备工艺研究

制备山楂叶提取物类脂质体,并研究其最佳制备工艺及处方。采用改良-薄膜分散法制备山楂叶提取物类脂质体,通过单因素考察法和L9(34)正交试验法,以包封率为考察指标,优选类脂质体的最佳制备工艺和处方,采用喷雾干燥法将其粉末化。按最佳制备工艺和处方制备的3批样品,平均包封率约71.08%。最终确定山楂叶提取物类脂质体的制备工艺,其工艺简便,稳定可行,适合于大工业生产。     

莲藕多酚-多糖复合脂质体的制备及稳定性评价

采用逆向蒸发法制备莲藕多酚-多糖复合脂质体,分别以多酚和多糖的包封率为指标,考察多酚质量浓度、多糖质量浓度、磷脂-胆固醇质量比、超声时间和高速剪切转速对脂质体包封的影响,进一步通过正交试验,确定最佳制备工艺为:磷脂-胆固醇质量比1:4、莲藕多酚质量浓度15 mg/mL、莲藕多糖质量浓度1.5 mg/mL、超声时间6 min、高速剪切转速8000 r/min,在该条件下所得脂质体的多酚包封率为72.36%、多糖包封率为15.66%、ζ电位为-38.70 mV、粒径为123.01 nm。监测液态和冻干复合脂质体在4℃和25℃贮藏期间的包封率、ζ电位和粒径变化,发现脂质体冻干后的贮藏稳定性明显增加,且低温(4℃)利于脂质体的保存。研究结果可为莲藕功能成分脂质体的开发提供参考。     

pH梯度结合逆相蒸发法制备黑米麸皮花青素脂质体的研究

以大豆卵磷脂和胆固醇混合物为壁材,采用p H梯度结合逆相蒸发法制备黑米麸皮花青素脂质体,利用单因素实验,得到影响花青素脂质体包封率的三个显著性因素:大豆卵磷脂与胆固醇摩尔比(nSPC/nCH)、有机相与水相体积比(VOP/VAP)和磷酸缓冲液浓度(mmol/L)。根据中心组合(Box-Behnken)实验设计原理,采用响应面分析法对花青素脂质体的制备工艺进行了优化,结果得到花青素脂质体最佳制备工艺参数为:nSPC/nCH=3.29/1,VOP/VAP=3.16/1,磷酸缓冲液浓度为5.21 mmol/L。在最优条件下进行验证实验,得到花青素脂质体包封率达54.97%,所制备的花青素脂质体平均粒径为234 nm,Zeta电位为-25.0 m V。     

大蒜多糖长循环脂质体的制备及稳定性研究

采用薄膜分散法制备大蒜多糖长循环脂质体,并对其形貌、粒径进行了表征,同时对脂质体包封率、稳定性进行了研究。结果表明:经聚乙二醇(PEG)修饰的长循环脂质体形态圆整、分散均匀,平均粒径为115.4 nm;对大蒜多糖的包封率为71.94%,明显高于普通脂质体的包封率,同时该脂质体还具有较好的稳定性。     

超临界CO_2法优化番茄红素脂质体的配方工艺

采用超临界CO_2法制备番茄红素脂质体,以包封率为指标,研究脂质体配方组成对包封率的影响。选取胆固醇与磷脂质量比、缓冲溶液pH、番茄红素与磷脂质量比为考察因素,研究各因素对脂质体包封率的影响。采用响应曲面法进行脂质体配方组成的优化,得到最佳工艺参数为:胆固醇∶卵磷脂(W∶W)为9∶20,缓冲溶液pH为7.0,番茄红素∶卵磷脂(W∶W)为1∶50,此条件下番茄红素脂质体包封率达83.4%±1.15%。该实验结果为番茄红素脂质体的制备提供了方法依据和理论基础。     

β-谷甾醇对脂质体抗氧化性及膜结构稳定性的影响

以旋转蒸发-超声法制备脂质体,比较了以β-谷甾醇为助膜材料的脂质体(PC/Sito脂质体)、以胆固醇为助膜材料的脂质体(PC/Chol脂质体)和不加助膜材料的脂质体(PC脂质体)在抵抗超声作用、AAPH(2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐)引发的氧化作用、紫外线引发的氧化作用过程中的区别。结果表明:相比PC脂质体,PC/Sito脂质体和PC/Chol脂质体具有明显抵抗超声作用和推迟由AAPH引发的脂质体氧化反应发生的作用,并能有效维持脂质体在超声和氧化过程中脂质体的稳定性;在维持脂质体稳定性的效果上,β-谷甾醇优于胆固醇;在抵抗紫外线引发的脂质体氧化的过程中,3种脂质体未表现出明显区别。     

中链脂肪酸-VC复合脂质体制备及初步稳定性

以磷脂和胆固醇为膜材,脂溶性的中链脂肪酸(MCFAs)和水溶性的VC为模型药物,以脂质体的包封率和粒径为指标,分别采用薄膜法、复乳法、薄膜-高压法、复乳-高压法制备中链脂肪酸-VC复合脂质体,筛选出最佳制备方法(复乳-高压法),并通过单因素试验设计,确定复合脂质体的最优处方工艺为:总脂材质量浓度5.0g/100mL,MCFAs质量浓度10.0mg/mL,VC质量浓度3.0mg/mL,卵磷脂与胆固醇质量比为4:1,卵磷脂质量与无水乙醇体积比为1:10(g/mL),吐温与总脂材质量比为3:10,VE与卵磷脂质量比为4:100,120MPa条件下超微乳化处理2次。制备的复合脂质体MCFAs包封率达到49.01%,VC的包封率达到54.19%,平均粒径90.3nm,在4℃贮藏15d,包封率和粒径变化不大,表明脂质体低温贮藏稳定性良好。     

鱼油纳米脂质体的制备及其性质测定

采用响应面法优化乙醇注入-动态高压微射流法制备鱼油纳米脂质体的工艺,并对其理化性质进行了初步测定。结果表明:制备鱼油纳米脂质体的最佳工艺为:磷脂浓度29 mg/mL,m(磷脂)∶m(鱼油)∶m(胆固醇)∶m(吐温-80)=10∶2∶2.5∶1,微射流压力150 MPa,微射流处理次数2次。在此条件下脂质体的包封率为76.9%,平均粒径128.1 nm,Zeta电位-20.11 mV。乙醇注入-动态高压微射流法制备的鱼油纳米脂质体粒径小且分布均匀(多分散指数0.258),具有较高的包封率和稳定性。     

改性大豆磷脂在脂质体制备中的应用研究

以大豆磷脂和聚乙二醇单甲醚2000为原料,制备了大豆磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇单甲醚2000(SPE-MPEG2000),产物结构经1H NMR和IR进行了表征。采用薄膜分散法制备了含SPEMPEG2000的空间稳定脂质体(SSL),同时制备不含SPE-MPEG2000的普通脂质体(CLs)。通过TEM考察了两种脂质体的形态及粒度分布,测定了粒径及Zeta电位变化,采用紫外分光光度法测定了脂质体加乙醇后的吸光度变化及包封钙黄绿素后的包封率。结果表明:SSL粒子呈类球形,粒径分布较CLs均一且分散性较好;放置前后SSL的粒径及吸光度变化较小,包封率高于CLs,从而说明SPE-MPEG2000对脂质体有良好的稳定作用。     

β-紫罗兰酮温敏脂质体的制备工艺及配方优化

以合成磷脂DPPC和氢化大豆卵磷脂HSPC为膜材,采用薄膜超声法和乙醇注入法制备β-紫罗兰酮脂质体,并对其超声条件及配方进行优化。优化得到的较佳工艺参数为:超声功率240 W,超声时间4 min。通过单因素实验优化得到的β-紫罗兰酮脂质体的较佳配方为:DPPC与HSPC摩尔比为8∶2,磷脂质量浓度10 mg/m L,β-紫罗兰酮与Tween80、磷脂的质量比为1∶1∶20。该条件下制备的脂质体包封率为(60.62±3.48)%,平均粒径在200 nm左右,在原子力显微镜的观察下为球状或近似球状的小囊泡。     

维生素E脂质体的制备工艺筛选、优化及其性质研究

目的优化维生素E（V_E）脂质体的制备工艺并考察其性质。方法采用乙醇注入法、乙醚注入法、逆相蒸发法、薄膜水化法和复乳法分别制备V_E脂质体,以包封率和保留率为考察指标,选择最优制备方法 :经L₉（3⁴）正交试验设计优化选择,确定脂质体的最佳配方。结果薄膜水化法制备所得的V_E脂质体包封率最高,V_E保留率较高;用薄膜水化法制备脂质体的最佳配方为磷脂:V_E:胆固醇=20:0.8:1.5;用透射电镜观察最佳实验组V_E脂质体发现其具有指纹状结构,Zeta电位为-30.9±0.9 mV,平均粒径为33.7 nm。结论薄膜水化法制得的V_E脂质体具有包封率高,V_E保留率高,粒径均匀等特点。     

辅酶Q10纳米脂质体配方与工艺优化研究

采用乙醇注入-超声法制备辅酶Q10纳米脂质体,以包封率、保留率、平均粒径以及平均粒径的变化程度作为响应指标,应用正交试验法优选辅酶Q10纳米脂质体的配方和制备工艺。最佳配方为磷脂:胆固醇:吐温80:辅酶Q10=2.5:0.4:1.8:1.2(W/W),水相为0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4);最佳制备工艺条件为乙醇用量1ml,搅拌时间10min,水化温度45℃,超声功率450W。以优化配方和工艺制得的脂质体形态均匀,粒径分布范围在20～300nm之间,平均粒径为68nm,包封率高于95%,4℃下贮存四个月,粒径分布无显著变化,平均粒径的变化程度小于10%,保留率高于90%。经优化得到的辅酶Q10纳米脂质体配方合理、工艺简便可行、包封率高、稳定性好。     

辅酶Q10前体脂质体的研制及其特性研究

为提高辅酶Q10脂质体的稳定性,采用冷冻干燥法制备辅酶Q10前体脂质体.选择蔗糖、海藻糖、甘露醇、乳糖等作冻干保护剂,研究复水前后辅酶Q10脂质体的形态、粒径分布和包封率,并研究了辅酶Q10前体脂质体红外光谱性质,比较冷冻干燥保护剂种类及用量对辅酶Q10脂质体的保护作用.优选保护剂为海藻糖,与卵磷脂质量比为4:1,辅酶Q10前体脂质体水合重建后平均粒径为508nm,包封率达75%.红外光谱分析表明海藻糖与磷脂P=O基团之间形成氢键作用最强.     

羧甲基壳聚糖包裹椰子油脂质体制备的工艺优化

通过薄膜-超声分散法制备羧甲基壳聚糖包裹的椰子油脂质体,以大豆卵磷脂和氢化大豆卵磷脂为膜材,包封率为主要评价指标,采用单因素和正交实验对薄膜-超声分散法制备羧甲基壳聚糖包裹的椰子油脂质体的工艺和配方进行优化,并对所制备脂质体的微观形态、包封率、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和体外释放度进行分析。结果表明:最佳制备条件为羧甲基壳聚糖与磷脂比为1:16,磷脂与胆固醇比为8:1,椰子油与磷脂比为3:1,pH为4.5,超声强度750 W,超声时间20 min,此条件下实际包封率为96.94%±0.20％。羧甲基壳聚糖包裹椰子油脂质体在0.9%氯化钠中,24 h的释放度为41.28%±0.30%。椰子油脂质体的包封率高和累积释放度高,稳定性好,可实现延缓释放和靶向给药。