细脚拟青霉发酵液中核苷类物质的HPLC分析及脂肪酸成分含量测定

以冬虫夏草生药做对比,采用RP—HPLC、GC法对一株细脚拟青霉菌株发酵液冻干粉中核苷类物质、脂肪酸成分进行分析测定．结果表明,细脚拟青霉发酵液冻干粉中主要含有尿苷、鸟苷、腺苷、肌苷和胸苷5种核苷,其含量分别为3．6306mg／g、5．5472mg／g、0．8643mg／g、0．4628mg／g和0．2316mg／g;不饱和脂肪酸是优势脂肪酸,以亚麻油酸、油酸为主,其相对含量分别为38．42％、27．66％．与冬虫夏草生药相比,细脚拟青霉发酵液冻干粉中核苷类物质的含量明显高于后者,不饱和脂肪酸含量略低于冬虫夏草生药．     

虫草中腺苷含量的快速测定

通过超声波提取,用薄层色谱(TLC)法定性和高效液相色谱(HPLC)定量来测定天然冬虫夏草、蛹虫草子实体及其液体培养菌丝体中腺苷及其含量。TLC分析显示三种样品均含腺苷,HPLC测得腺苷含量分别为48.17±0.61μg/g,(130.23±0.62)μg/g,(437.67±2.40)μg/g.HPLC结果表明:蛹虫草子实体及培养菌丝体中腺苷含量明显高于冬虫夏草。本文的TLC与HPLC比以往采用的同类方法具有分离速度快、样品处理较简单的特点,可作为虫草类产品的质量控制指标。     

灵芝菌丝发酵及胞内多糖提取条件的优化

通过摇瓶培养研究了灵芝液体发酵的适宜培养条件,探讨了灵芝菌丝体胞内多糖的最佳提取条件和方法.结果表明:最适发酵培养时间为6 d,pH6.5,可溶性淀粉15 g.L-1,大豆蛋白胨10 g.L-1,硫酸亚铁1 g.L-1,所得菌丝体为44.8 g.L-1;热水浸提法的最佳条件为料液比为1∶20,浸提时间4 h,浸提温度90℃,多糖含量最高为17.5%;酶法的最佳提取条件为料液比1∶20,加酶量2%,处理时间3 h,多糖含量最高为20.8%.通过对比,确定酶法为灵芝菌丝多糖的较佳提取方法.     

细脚拟青霉产胞外抗氧化活性成分培养基的优化

采用液体摇瓶培养的方法,以DPPH自由基清除率为指标,对一株细脚拟青霉产胞外抗氧化活性成分培养基进行了优化,确定了其产抗氧化活性物质的最佳培养基.结果表明最佳培养基为:碳源为蔗糖和麦芽糖组成的复合碳源;氮源为酵母浸出粉;微量元素及生长因子为KH2PO4、柠檬酸铵和VB;正交实验结果表明最佳培养基配方为蔗糖2%、麦芽糖1%、酵母浸出粉1.5%、KH2PO40.5%、柠檬酸铵0.04%、VB0.03%.培养基优化后,该菌株发酵液中代谢产物的抗氧化活性可达73.47%.     

冬虫夏草发酵液和菌丝体中主要核苷类成分分析

为研究冬虫夏草发酵液和菌丝体中核苷类物质的种类和含量,将冬虫夏草进行液体发酵培养,再经超声提取、醇沉、真空浓缩等方法获得供试样品Ⅰ(发酵液醇提成分)和供试样品Ⅱ(菌丝体提取物醇提成分),应用高效液相色谱法对供试样品中主要核苷类物质进行测定,结合次黄嘌呤、腺嘌呤、腺苷、虫草素等标准品图谱和标准曲线方程对其进行定性定量分析。结果显示,试验条件下,发酵液中含有较多的虫草素和次黄嘌呤,产率分别为28.470、23.436mg/L;菌丝体中含有较多的腺苷,产率为5.067 9mg/g。     

市售山楂食品中微量元素的测定

为了解不同山楂制品中金属元素的含量高低,采用干法灰化样品,以原子吸收光谱法测定20种不同山楂制品中的铁、锌、铜、铅、镁、钠、钙7种微量金属元素的含量。结果表明,样品中都含有丰富的人体必需元素,其中钙的含量最高,对人体有害的铅的含量均在国家标准范围之内,不会产生危害,并且不同品牌不同生产厂家生产的山楂产品中同一种金属元素的含量有一定差异。     

ICP-AES/ICP-MS联合测定玉竹中多种元素

以玉竹为原料,样品经微波消解后,采用ICP-AES和ICP-MS测定样品中的23种元素,其中K含量最高,达8 652μg/g;Ca、Mg、Al、Fe的含量依次为2 158、696、444和191μg/g;Pb、Cd、Tl含量分别为0.71、0.43、0.063μg/g;Be含量最少,仅0.028μg/g。经3个国家一级标准物质分析验证,结果与标准值相符,并且所有元素精密度(n=12)在0.5%~6.9%。     

不同产地山药中金属元素含量的比较

以火焰原子吸收光谱法对不同产地同一品种山药中的Fe、Mn、Ca、Mg、K、Zn、Cu、Na等金属元素含量进行测定分析.结果显示所有样品中均含有这8种金属元素,加标回收率在92.71％～100.19％之间,RSD为0.27％～1.96％.不同产地山药中金属元素含量存在差异,河南温县山药金属元素含量最高.     

银杏叶乙醇提取物对霉菌抑制作用的研究(一)——银杏叶乙醇提取物对储藏物霉菌的抑制作用

本试验通过银杏叶 95%乙醇提取物对黑曲霉、黄曲霉、杜青霉、草酸青霉和灰绿曲霉生长的抑制作用研究表明 ,银杏叶提取物对 5种供试霉菌均有不同程度的抑菌作用 .当提取物在培养基中浓度为 0 0 1g/mL时 ,对灰绿曲霉的抑菌率为 88 8% .提取物只能抑制 5种霉菌的生长 ,但不能起杀菌作用 .对提取物的敏感程度从大到小依次为灰绿曲霉 >草酸青霉 >桔青霉 >黄曲霉 >黑曲霉 .     

铁仔不同器官微量元素的含量测定

采用原子吸收光谱法测定了铁仔的根、茎、叶和果中铜、铁、锌、锰等4种微量元素的含量。结果表明,铁仔根、茎、叶和果各部分均含有丰富的铁和适量的Mn、Zn和Cu,其中,根的铁含量达到297．8410μg/g;叶的Mn和Zn含量分别为78．8291μg/g和20．6814μg／g,果的Cu含量为12．6383μg/g。     

胆固醇氧化酶高产菌株的诱变选育及产酶条件优化

在对细脚拟青霉、玫烟色拟青霉、粉拟青霉、香菇、平菇、金针菇等胆固醇氧化酶产生菌初筛的基础上．选择以产酶较高的玫烟色拟青霉作为紫外诱变的出发菌株,筛选出一株相对高产突变菌株MFEC006,其酶活达到了0．5483U／mL,比出发菌株提高了154％,经8次传代培养,突变株性质稳定．对MFEC006菌株产酶条件进行优化,得出其最佳产酶条件为：pH为6．5,温度27℃,接种量10％,摇床转速180r／min．     

羊肚菌菌丝的分形特征

用菌丝显微图像灰度的统计分布图得到羊肚菌菌丝具有分形学的自相似性并求出其分维数。对比羊肚菌固体、液体不同培养方法下菌丝的形态及分维数,结果为分枝越多分维数越大;对比不同菌种羊肚菌和蛹虫草菌丝的分维数。说明分维数的差别对于菌丝形态特征的研究可以提供基础。     

虫草多糖的化学结构及药理活性研究进展

作为虫草的主要活性成分之一,虫草多糖具有多种药理活性.近年来随着虫草菌无性型和液体深层发酵技术的发展,虫草多糖已成为多糖研究的热点.本文概述了发酵虫草及其多糖相关产品的开发,介绍了虫草多糖的化学结构研究及其在质量控制中的应用,重点综述了虫草多糖药理活性的研究进展,包括抗肿瘤、降血糖、对肝脏和肾功能的保护作用,以及免疫调节作用,分析了虫草多糖研究中存在的问题,并对其今后的研究开发进行了展望.     

高富锗蛹拟青霉菌株的筛选

为了获得高富锗能力的蛹拟青霉菌株,对蛹虫草无性型蛹拟青霉不同菌株进行了富锗培养,并对富锗能力、生物量、有机锗转化率等指标进行了测定.结果表明：富锗能力最强的菌株为28号和14号,在锗浓度为500μg/mL时,生物量分别为15.09 mg/mL和13.84 mg/mL,有机锗转化率分别达到2.3%和1.9%.蛹拟青霉不同菌株具有不同的富锗能力.     

复合型生物絮凝剂产生菌筛选及絮凝机理研究

采用纤维素降解菌和絮凝菌组成复合型生物絮凝剂产生菌菌群,进行两段式发酵,利用纤维素为底物,生产复合型生物絮凝剂．将高效絮凝菌F2、F3、F5和F6进行双菌混合培养的正交试验,发现F2和F6组合絮凝活性最佳,且均优于单菌．确定该复合型生物絮凝剂HITM02的有效成分存在于发酵液中,主要是细菌的代谢产物．有效成分为蛋白质、多糖和多肽类物质,其中蛋白质的含量为5．4％,总糖含量为1．76％,还原糖未检出．这些有效成分与发酵过程中纤维素等的代谢残留物共同作用,具有优良的絮凝能力．絮凝机理包括蛋白质等两性电解质的电中和作用;蛋白质、多肽、多糖等高分子物质和纤维素等的代谢残留物共同具有的吸附架桥作用．     

蛹虫草无性型原生质体制备条件的研究

以蛹虫草无性型为材料,通过液体培养获得菌丝体,经不同浓度的蜗牛酶、纤维素酶在不同条件下酶解处理菌丝体获得原生质体．实验结果表明：以培养6d的蛹虫草菌丝体为材料,0．5mol／L甘露醇溶液为稳渗剂,蜗牛酶浓度为1％,纤维素酶浓度为0．5％,两种酶混合的体积比为1：2,pH6．5,35℃条件下酶解3h,可得原生质体产量最高为1．36×10^8个／mL．这一研究结果为蛹虫草通过原生质体技术进行菌株的遗传改良提供了重要的理论依据．     

广谱碳源产油酵母菌的筛选及培养基优化

以葡萄糖、木糖和阿拉伯糖及三者混合糖为碳源,对8株酵母菌的菌体油脂积累能力进行初步测定,并对PR61菌株产油条件进行优化.实验发现：当以D-葡萄糖为唯一碳源时,所有菌株油脂含量都超过20%（质量分数,以下同）;利用D-木糖发酵时,有6株菌株油脂含量超过了20%;利用L-阿拉伯糖发酵时,各菌株油脂含量均较葡萄糖和木糖低;上述菌株利用混合糖（m（D-葡萄糖）∶m（D-木糖）∶m（L-阿拉伯糖）=40∶20∶8）发酵时,有5株菌株油脂含量超过30%,且部分菌株利用混合糖的能力超过了葡萄糖.研究表明：菌株PR61利用各种碳源时的生物量和油脂产量均较高.采用U10（108）均匀设计对其产油条件进行优化,结果如下（g/L）：碳源（m（D-葡萄糖）∶m（D-木糖）=2∶1）质量浓度130,硫酸氨质量浓度2,酵母粉质量浓度1,七水硫酸镁质量浓度0.1,磷酸二氢钾质量浓度2,碳氮比131.在上述条件下菌株PR61的油脂产量可达4.336 g/L.     

高温季节不同培养基栽培北虫草的实验研究

北虫草高温季节优质菌种接种在10种不同配方的培养基中,获得与野生北虫草形态一致的子实体。通过对比分析显示:以小麦为主料E1培养基子实体长势最好,以大米为主料的F1培养基生物转化效率最高。生物活性物质检测发现:10种不同配方培养基培养出的实体超氧化物歧化酶(SOD)含量基本相同;虫草素和腺苷的含量越高,多糖与虫草酸的含量越少。该研究结果为高温季节栽培北虫草提供有效的实验依据。