我国大豆核心种质南方材料对SMV流行株系的抗性评价

用人工接种方法,研究我国南方大豆核心种质93份野生大豆和99份栽培品种对黄淮与南方大豆产区SMV流行株系（SC-3、SC-7）和北方大豆产区流行株系（SC-11、SC-13）的抗性。结果显示,栽培大豆樟潭大青豆对4个株系表现无症状,ZYD03715、ZYD04257、上饶青皮豆3份材料对除SC-7外的3个株系表现无症状,5份材料（ZYD04203、ZYIX）4856、82—16、82—24和渠县八月黄）对SC-3和SC-7两个株系表现无症状,另有8、2、4份材料分别对SC-3、SC-7、SC-13表现无症状。参试材料中,免疫、高抗和高感材料较少,中度抗性的材料所占比例较高;来自四川的17份材料抗性较好。     

大豆种质资源对东北SMV1号和3号株系的抗性鉴定

采用556份大豆种质资源为供试材料,在2006和2007年连续两年分别接种SMV1号和3号株系,对其成株抗性和种粒斑驳抗性均进行了鉴定。结果表明,接种1号株系的成株抗病资源446份,占80．2％;抗种粒斑驳资源107份,占19．2％;对成株和种粒斑驳均表现抗性的资源103份,占18．5％。接种3号株系的成株抗病资源151份,占27．2％;抗种粒斑驳资源87份,占15．7％;对成株和种粒斑驳均表现为抗性的资源76份,占13．7％。对1号和3号株系,在成株和种粒抗性上均表现抗病的资源69份,占12．4％。以上资源特别是兼抗资源在大豆生产和抗病育种中应予以重视。研究还显示,来自辽宁和吉林的供试资源对1号和3号株系的成株和种粒抗性均较好;来自中国农科院作物所和黑龙江的供试资源对1号株系的成株抗性较好,但对1号和3号株系的种粒抗性相对较差。     

大豆花叶病毒株系间的交叉保护作用研究

利用11个来源不同的大豆花叶病毒株系在不同大豆品种上研究了接种间隔以及混合接种等处理方法对交叉保护效果的影响;研究了不同类型保护处理组合之间保护效果的差异,并观察了交叉保护作用对大豆部分农艺性状的影响。结果显示,不同挑战接种时间交叉保护作用存在明显差异,与保护接种间隔7d挑战接种保护效果显著好于间隔3、5、9、11d;接种处理方法不同,交叉保护效果也不同,先后接种两个株系可表现保护作用,两株系汁液等体积混合接种或同时各接种一片真叶则不表现保护作用;以同一品种上不同症状类型的SMV株系作为保护株系其保护效果存在程度差异,以花叶株系作为保护株系,表现较高的保护作用,以坏死株系作为保护株系,不表现保护作用。交叉保护作用能够显著减轻挑战株系对叶面积和根干重的影响。交叉保护作用在减轻SMV对株高、叶绿素含量和根瘤鲜重的影响上,不同株系、不同品种间存在一定差异。     

一个大豆锈病新抗源的筛选与鉴定

采用离体叶片接种方法对2007-2010年收集的1 000份大豆种质资源进行抗性筛选,得到1份高抗材料SX6907。SX6907在接种锈菌后20d不产生侵染病斑;在接种高浓度锈菌时,产生少数红褐色RB（Red-brown）病斑,但无孢子堆破裂现象,无孢子产生;已知抗病品种（除日向外）在本研究抗性鉴定中主要表现为黄褐色TAN型感病病斑,抗性丧失。组织学观察表明,SX6907在接种部位造成细胞坏死,侵染点无孢子形成,其抗性表现为抗锈菌扩展。SX6907是一个优异的抗锈病资源,可做亲本在抗锈病育种中应用。     

烟草抗PVY的EMS突变体pvyr1筛选与抗性遗传初步分析

为了从烟草EMS突变体库中筛选抗马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)突变体,采用苗期人工接种初筛M2抗病单株,对M3、M4和M5株系连续接种鉴定PVY抗性。采用e IF4E1基因特异分子标记检测和c DNA全长测序,分析突变体PVY抗性是否与e IF4E1突变有关。配制F1群体初步分析抗性遗传特性。苗期人工接种从1800份M2种子中筛选到1份抗PVY的烤烟突变体。冬季无加温措施塑料大棚内苗期人工接种PVY坏死株系MN分离物,接种后35 d未诱变对照品种发病率为100%,E9119-1Z/M3株系的发病率为56.3%,无症状单株ELISA检测PVY均为阴性,表明E9119-1Z/M3株系对PVY中抗。E9119-1Z的M4株系和M5株系在光照培养室内苗期人工接种对PVY坏死株系MN分离物和ZT-5分离物表现为中抗。E9119-1Z-R14-2/M5株系为抗性稳定的突变体,命名为pvyr1。pvyr1采用e IF4E1基因特异分子标记检测为阳性,c DNA测序表明e IF4E1基因无突变。pvyr1与未诱变对照品种(感PVY)、va位点抗PVY品种NC55的杂交F1代抗性鉴定结果初步表明,pvyr1突变体对PVY的抗性符合孟德尔隐性遗传,且与NC55的va位点不等位。表明pvyr1为一个与e IF4E1基因突变不同的抗PVY新资源。     

黑豆乙醇萃取物中抗氧化成分的分离与鉴定

目的：研究黑豆抗氧化活性成分。方法：采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）法筛选黑豆乙醇提取物抗氧化活性部分,并综合运用硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、D-101大孔吸附树脂柱色谱、凝胶柱色谱等方法对黑豆乙醇提取物具有较强抗氧化活性部分进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据对化合物进行结构鉴定。结果：采用DPPH法筛选表明黑豆乙醇提取物乙酸乙酯萃取部分和正丁醇萃取部分具有较强抗氧化活性,并从黑豆乙酸乙酯萃取部分、正丁醇萃取物经大孔吸附树脂体积分数30%乙醇洗脱部分中分离鉴定了10 个化合物,其中包括7 个黄酮类化合物：染料木素（1）、大豆素（2）、黄豆黄苷（3）、大豆苷（4）、染料木苷（5）、槲皮素-3-O-葡萄糖苷（6）、3’-甲氧基-表儿茶素-7-O-葡萄糖苷（7）,以及胡萝卜苷（8）,麦芽酚（9）、岩白菜素（10）。结论：化合物6、7、9、10为首次从大豆植物中分离得到,黑豆的抗氧化活性与其含较多酚类化合物有关。     

烟草耐黄瓜花叶病(Cucumber Mosaic Virus)育种研究

当今世界尚未发现烟草CMV抗源,据此,笔者经多年在烟草苗床和大田加压选择,育成三个高耐CMV品系:C151、C152和C212。在自然感染和田间接毒测定中,其抗性均占显著优势,平均病情指数比台湾育成的TT6、TT7低,室内接种鉴定对大陆各烟区CMV病毒株系的耐力远比TT6、TT7强,对各地CMV流行株系表现明显的抗性,达显著和极显著水平。尤其C212,其病情指数为28.88,是三品系中最低者,抗(耐)力居首位。TMV接毒鉴定,C151为过敏枯斑反应,是当前对CMV和TMV兼抗性能的较好桥梁品系。      

转TaDREB3基因大豆的品质等同性分析

将抗逆基因TaDREB3转入大豆品种东农50,得到3个稳定遗传的株系,并将T4株系种子播于大田中。对3个转TaDREB3基因株系及非转基因对照株系的种子分别进行蛋白质、油份、脂肪酸、异黄酮等品质性状的等同性分析,研究转化外源基因TaDREB3后大豆原有品质性状是否有改变。结果表明：3个转基因株系和对照植株相比,蛋白质含量、油分含量和脂肪酸含量均差异不显著;转基因株系1的大豆黄素虽然和对照差异显著,但是异黄酮总含量和对照没有显著性差异。说明TaDREB3基因的导入并没有改变大豆的品质性状。     

烟草耐黄瓜花叶病(Cucumber Mosaic Virus)育种研究

当今世界尚未发现烟草CMV抗源,据此,笔者经多年在烟草苗床和大田加压选择,育成三个高耐CMV品系:C151、C152和C212。在自然感染和田间接毒测定中,其抗性均占显著优势,平均病情指数比台湾育成的TT6、TT7低,室内接种鉴定对大陆各烟区CMV病毒株系的耐力远比TT6、TT7强,对各地CMV流行株系表现明显的抗性,达显著和极显著水平。尤其C212,其病情指数为28.88,是三品系中最低者,抗(耐)力居首位。TMV接毒鉴定,C151为过敏枯斑反应,是当前对CMV和TMV兼抗性能的较好桥梁品系。     

加热联合酶解大豆7S蛋白的分子结构及抗原性研究

选用不同加热预处理条件、不同蛋白酶处理大豆7S蛋白,SDS-PAGE考察酶解后大豆7S蛋白的降解情况,间接竞争ELISA法考察酶解物的抗原性。结果表明:加热预处理联合酶解可显著增大β-伴大豆球蛋白的降解程度,β亚基消化程度得到极大提升,α亚基、α'亚基几乎完全被降解,在相同酶解时间下,胰蛋白酶的酶解速度快于胃蛋白酶;加热预处理联合酶解大幅降低了β-伴大豆球蛋白的抗原性,胰蛋白酶的效果优于胃蛋白酶,经80℃加热10 min预处理再经胰蛋白酶处理,大豆7S蛋白的抗原性降低了79.99%,而胃蛋白酶最优条件下最多仅降低50.4%; SDSPAGE结果表明,胃蛋白酶、胰蛋白酶酶解物中出现了抗消化肽段,经过质谱鉴定,均来自于β-伴大豆球蛋白的α亚基。     

大豆资源抗疫霉根腐病基因分析

采取下胚轴创伤接种法鉴定156份大豆资源对13个不同毒力基因型大豆疫霉菌株的抗性。结果表明,125份资源分别抗1～13个菌株,占鉴定资源总数的80.13%。125份抗性大豆资源与13个大豆疫霉菌株共产生90种反应型。通过与13个鉴别寄主的反应型比较发现,有9份大豆资源产生的5种反应型与含有已知抗病基因的大豆资源的反应型相同;12份大豆资源产生的5种反应型与已知2个抗病基因组合的反应型一致,另外,还有至少抗1个菌株的104份大豆资源产生的80种反应型,既不同于已知单个抗病基因的反应型,也不同于2个已知抗病基因组合的反应型,推测可能含有新的抗病基因或基因组合。     

大豆对SMV1号株系的抗性遗传分析及抗病基因的SSR标记

利用杂交组合合丰25（S）×东农93-046（R）的F1、F2和F2∶3群体进行了抗病性鉴定,结果表明：F1在接种后表现抗病,F2群体分离比例为3（抗）∶1（感）,对F2衍生的F2∶3家系接种鉴定,纯合抗病家系、抗感分离家系和纯合感病家系的比率符合1∶2∶1,表明东农93-046对SMV1号株系的抗性由一对显性基因（RSMV1）控制。并利用东农93-046（R）×Conrad（S）的正反交组合F2进行抗性鉴定,结果正反交后代均表现为3∶1的分离比例,无细胞质效应,进一步证明了东农93-046是受一对基因控制的抗性种质。经改良的分离群体组群分析法研究发现,东农93-046抗SMV1的位点（RSMV1）位于F连锁群上,与SSR标记的连锁顺序为HSP176、Satt114、RSMV1、Satt510、Sct_033、Satt334、Satt362,标记与RSMV1之间的遗传距离分别为10.9cM、4.3cM、6.6cM、11.7cM、18.0cM和35.3cM。根据标记HSP176选择基因型纯合和杂合的抗病植株,其符合率分别达到100.0%和94.5%。     

市售鸡肉中沙门菌分离株多重耐药谱测定

为了解我国市售鸡肉中沙门菌多重耐药状况及耐药程度，对国家食源性疾病监测网从市售鸡肉中分离到的51株沙门菌进行耐药检测，并对多重耐药谱进行分析。利用NccLs(National Committee of Clinical Labaratory Standard)推荐的纸片法进行耐药检测，51株分离菌株全部对至少3种以上的抗生素耐药，属多重耐药株，耐5种抗生素的9株(17.6％)，耐6～9种抗生素的12株(23．5％)，耐10种以上抗生素的9株(17．6％)。51株沙门菌对万古霉素、红霉素、苯唑西林都具有耐药性(100％)，对其它抗生素的耐药情况是：萘啶酮酸(52.9％)、磺胺(35．3％)、链霉素(33．3％)、四环素(29.4％)、氨苄青霉素(23．5％)、羧苄西林(21.6％)、阿莫西林(19．6％)、吡拉西林(19．6％)、美唑西林(17．6％)、强力霉素(17．6％)、氯霉素(13．7)和头孢噻吩(9．8％)。有3株菌对庆大霉素耐药，有2株菌对丁胺卡那霉素和甲氧苄胺嘧啶耐药，有1株菌对复方新诺明耐药。分离出1株耐15种抗生素的鼠伤寒沙门菌，其耐药谱与超级耐药鼠伤寒沙门菌DTl04的耐药谱类似。从8省市市售鸡肉中分离的51株沙门菌均为多重耐药株，提示我国畜牧养殖业在使用抗生素方面存在严重问题，应加强对饲料添加剂使用的安全性管理，合理使用抗生素。     

用于大豆根冠关系研究的嫁接方法

用三个品种（中黄30、中黄39和翼豆12）研究幼苗期不同插接方式对大豆成活率和缓苗天数的影响,以期建立可用于大豆根冠关系研究的嫁接技术.试验采用插接法.对砧木保留两片子叶时接穗去留子叶对成活率的影响,以及接穗保留子叶时,砧木去留子叶对成活率的影响进行研究.结果表明：插接法的成活率可达90％以上;砧木留子叶＋接穗去子叶的嫁接方法缓苗天数需要3～4d;砧木留子叶时,接穗去留子叶对嫁接成活率不会产生显著影响;接穗留子叶时,嫁接部位的不同（即砧木去留子叶）对嫁接成活率没有显著影响;砧木留子叶＋接穗不留子叶的嫁接方式具有一定优势.     

黑龙江省大豆品种对大豆疫霉根腐病抗性评价及抗性基因推导

采用下胚轴伤口接种法,利用课题组在黑龙江省分离鉴定的8个大豆疫霉根腐病生理小种（race1、race3、race4、race5、race9、race13、race44、race54）对黑龙江省曾经大面积推广种植的44个大豆品种进行接种鉴定。结果表明,对8个生理小种分别有45.5%、29.5%、40.9%、43.2%、36.8%、45.5%、31.8%、72.7%表现抗性或中间类型,共产生37种反应型;通过基因推导,合丰-44,绥农-12可能含有Rps1c基因或Rps1a＋Rps1c、Rps1c＋Rps6、Rps1c＋Rps7的基因组合;黑河-32可能含有Rps1a＋Rps1d的基因组合,其它品种可能含有新的抗病基因或基因组合,表明黑龙江省存在丰富的抗大豆疫霉根腐病的种质资源。     

Presence and potential for horizontal transfer of antibiotic resistance in oxidase-positive bacteria populating raw salad vegetables

To assess whether domestically grown fresh salad vegetables constitute a possible reservoir of antibiotic resistance for Canadian consumers, aerobic bacteria capable of forming colonies at 30 degrees C on nutrient-limited media were recovered from a single sampling of Romaine lettuce, Savoy spinach and alfalfa sprouts, then examined for their susceptibility to ten antibiotics and the carriage of potentially mobile R-plasmids and integrons. Of the 140 isolates resistant to one or more antibiotic, 93.5 and 90.0% were resistant to ampicillin and cephalothin; 35.7% to chloramphenicol, 10.0% to streptomycin, 4.2% to nalidixic acid, 4.2% to kanamycin, and 2.8% to gentamicin. Gram-positive isolates accounted for less than 4% of the antibiotic resistant strains. A small portion (23.1%) of the predominant oxidase-positive, gram-negative isolates was resistant to two or more antimicrobials. Members of the Pseudomonas fluorescens/putida complex were most prevalent among the 34 resistant strains identified. Sphingobacterium spp. and Acinetobacter baumanni also were detected. Ten of 52 resistant strains carried plasmids, 3 of which were self-transmissible and bore resistance to ampicillin and kanamycin. Eighteen of 48 gave PCR evidence for integron DNA. Class 2 type integrons were the most prevalent, followed by class 1. We conclude that the foods examined here carry antibiotic resistant bacteria at the retail level. Further, our determination that resistant strains contain integron-specific DNA sequences and self-transmissible R-plasmids indicates their potential to influence the pool of antibiotic resistance in humans via lateral gene transfer subsequent to ingestion.     

Antimicrobial susceptibilities of Listeria monocytogenes strains isolated from food and food processing environment in Poland

A total of 471 Listeria monocytogenes isolates from different types of food and food-related sources in Poland during 2004-2010 were examined. This number includes 200 isolates from fish, 144 from fresh and frozen vegetables, 43 ready-to-eat products (deli foods, cold cuts), 13 from dairy products, 16 from raw meats, 15 from confectionery products and 40 directly from processing plants. All isolates were subjected to serotyping and lineage assays using PCR, and antimicrobial susceptibility using E-test and a broth microdilution method. Of all isolates, 256 (54.4%), 120 (25.5%), 59 (12.5%), 36 (7.6%) were identified as serotypes 1/2a (or 3a), 1/2c (or 3c), 1/2b (or 3b or 7), and 4b (or 4d or 4e), respectively. A direct correlation between the most common serotypes and three L. monocytogenes lineages was also observed. All L. monocytogenes isolates belonged to lineages I (20.2%) and II (79.8%). All strains were sensitive to ampicillin, amoxicillin, gentamicin, erythromycin, trimethoprim, rifampicin, vancomycin, chloramphenicol and sulfamethoxazol. Two of the L. monocytogenes strains (0.42%) showed phenotypic resistance. One strain was resistant to tetracycline and minocycline due to the presence of tet(M). It did not carry gene int, which may indicate that the tet(M) gene in this strain was not integrated in the transposon Tn916-Tn1545 family. The resistance of the second strain to ciprofloxacin and norfloxacin was attributed to active efflux associated with overexpression of gene lde. Our data indicate the low prevalence of antimicrobial resistance among L. monocytogenes isolates from food and food-related sources in Poland.