黄柏花粉多糖除蛋白方法比较及其对抗氧化功能的影响

黄柏花粉为研究对象,以蛋白清除率和多糖保留率为指标进行比较三氯乙酸法(TCA法)、Sevage法、木瓜蛋白酶法去除黄柏多糖中的蛋白质,并采用清除羟自由基能力和总还原力为2个体外指标来评价不同除蛋白方法对多糖抗氧化性能力的影响。结果表明,TCA法和Sevage法的最佳蛋白脱除率分别为92.21%和49.60%,其多糖保留率分别为53.76%和84%,木瓜蛋白酶法除蛋白(酶解温度45℃,时间2 h,p H=5.0),蛋白清除率为53.24%,多糖保留率为83.88%。比较3种除蛋白方法对多糖抗氧化能力的影响,发现清除羟自由基能力和总还原能力由强到弱依次为木瓜蛋白酶法、Sevage法、TCA法。因此说明,利用木瓜蛋白酶法除多糖中的蛋白质,多糖保留率较高,对多糖抗氧化能力破坏性小。     

碱浸提和纤维素酶辅助提取蓝莓多糖及其抗氧化能力的对比研究

以蓝莓为原料,利用碱浸提法和纤维素酶辅助法提取蓝莓多糖。采用正交试验优化蓝莓多糖提取工艺,确定蓝莓多糖得率影响的主次顺序,碱浸提法为提取温度、碱添加量、提取次数、提取时间,纤维素酶辅助法为p H、纤维素酶添加量、提取时间、提取温度,纤维素酶辅助法比碱浸提法获得的多糖得率提高了26%。2种方法获得的蓝莓多糖均具有抗氧化活性,碱浸提蓝莓多糖清除羟自由基能力最强,为88.8%,纤维素酶提取蓝莓多糖清除超氧阴离子自由基和羟自由基能力较强,分别为76.2%和76.0%。     

生姜多糖类物质的提取及抗氧化活性研究

目的以生姜为原料,采用超声波辅助法和热水浸提法提取生姜多糖类物质并进行抗氧化活性对比研究。方法经单因素试验结合响应面优化设计考察最优提取工艺参数,同时对2种方法提取的生姜多糖抗氧化活性进行对比分析。结果超声波辅助法提取生姜多糖最佳提取条件为:超声温度48℃,超声功率340W,超声时间21 min,液固比50:1(m L/g),在此条件下多糖得率为6.87%;热水浸提法的最佳提取条件为:温度72℃,时间164 min,液固比40:1(m L/g),在此条件下多糖得率为3.13%。抗氧化活性测定结果表明,超声波辅助法和热水浸提法提取生姜多糖的DPPH自由基清除能力的IC_(50)值分别为0.21 mg/m L和0.42 mg/m L,还原能力分别相当于维生素C的3.14%和0.5%,铁离子螯合能力的IC_(50)值分别为2.17 mg/m L和4.18 mg/m L,超声波辅助法提取的生姜多糖的DPPH自由基清除能力、还原力和金属螯合能力分别是热水浸提法提取的生姜多糖的2倍、6倍和1.9倍。结论生姜多糖具有一定的抗氧化活性,本研究可为生姜多糖的提取提供参考。     

南通坛紫菜多糖的黏度性质及其抗氧化活性

以南通洋口港坛紫菜为原料,利用水提法从紫菜中提取紫菜多糖,通过Sevage法除蛋白、活性炭脱色对其进行纯化。利用流变仪测定浓度、温度以及剪切速率对紫菜多糖黏度的影响探讨其黏度性质,并采用清除.OH自由基、O2-.自由基和DPPH.自由基模型对其体外抗氧化活性进行评价,并与VC进行了比较。结果表明:紫菜多糖溶液的黏度随着浓度和温度的升高而升高,随着剪切速率的增加而降低,多糖溶液表现为"非牛顿型流体",且具有"假塑性";紫菜多糖对.OH自由基、O2-.自由基以及DPPH.自由基都具有一定的清除能力,随着多糖溶液质量浓度的增大而增加,其中对O2-.自由基清除能力相对较强,当紫菜多糖溶液质量浓度为5 mg/mL时,对羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基的清除率分别为53.4%、78.9%和43.1%,但是与VC相比,紫菜多糖的抗氧化作用较弱。     

不同提取方法对槐米多糖抗氧化活性的影响

利用超声辅助提取法和热水浸提法分别提取槐米多糖,苯酚硫酸法测定多糖含量,采用还原能力、超氧阴离子自由基(O-2·)的清除能力、DPPH有机自由基的清除能力、羟自由基(·OH)的清除能力作为体外抗氧化作用评价的四个指标,并与VC、BHT进行比较。结果表明:超声波提取多糖得率比热水浸提法提高了21.6%;在0.125~2.0mg/m L浓度范围内,对自由基清除作用:VC>超声提取多糖>水提多糖>BHT。其中,超声提取多糖对O-2·(清除率,70.78%)和·OH(清除率,75.34%)的清除力略高于水提多糖(清除率分别为62.28%和70.45%),低于VC的清除力(清除率分别为98.21%和94.53%)。由此可见,槐米粗多糖有一定的抗氧化活性,而且不同提取方法得到的槐米多糖的抗氧化活性不同。     

药桑叶多糖的脱蛋白工艺与抗氧化活性研究

以新疆药桑叶为原料,采用水提醇沉法获得药桑叶粗多糖,利用Sevage法脱除粗多糖中的蛋白质,通过单因素试验、正交试验对药桑叶多糖脱蛋白工艺进行优化,并对脱蛋白前后的多糖进行DPPH自由基抗氧化活性试验。结果表明,药桑叶多糖的最佳除蛋白工艺条件为多糖溶液与Sevage试剂的体积比为1∶2,脱蛋白时间为20 min,脱蛋白次数为3次,蛋白质除去率可达到76.54%,多糖损失率为20.80%,脱蛋白后获得的多糖抗氧化活性比脱蛋白前的活性强。     

三种方法提取豆腐柴叶果胶抗氧化性比较研究

为了进一步研究豆腐柴果胶,采用草酸铵超声辅助法、碱提法和酸提法三种方法提取豆腐柴叶果胶,并对其抗氧化性进行测定。研究结果表明,草酸铵超声辅助提取法、碱提法和酸提法的提取率分别为14.73%,3.51%和9.20%;DPPH自由基清除率IC50分别为2.23,0.48和1.12 g/L;羟自由基清除率IC_(50)分别为3.86,2.26和2.98 g/L;还原力大小依次为:碱提取法提取的果胶酸提取法提取的果胶超声辅助提取法提取的果胶。由此可知,这三种方法提取的豆腐柴叶果胶均具有一定的抗氧化活性。与其他两种方法相比,碱提法虽然提取率较低,但是具有较强的抗氧化活性。     

江蓠多糖除蛋白的方法研究

采用水提醇沉法提取江蓠粗多糖,用苯酚-硫酸法测定江蓠中总多糖的含量,测得江蓠中总多糖含量为42.5%。分别采用Sevage法、冻融-Sevage联合法、TCA法3种方法进行除蛋白。Sevage法操作复杂,需进行多次操作,且多糖损失大;冻融-Sevage联合法蛋白清除率高,但多糖损失较大;TCA法操作简便,蛋白清除率高,多糖损失相对较小,为江蓠多糖除蛋白的最佳方法。     

香菇多糖不同提取方式的比较研究

采用微波辅助提取法、超声辅助提取法、热水提取法、酶提法提取香菇多糖(polysaccharide of Lentinus edodes,LEP),获得4种相应的多糖。利用傅里叶红外光谱仪和高效阴离子交换色谱分析对4种多糖进行结构表征,并以提取得率和抗氧化活性为依据,筛选最优方法。结果显示4种多糖单糖组分基本相同,但摩尔比有明显差异。提取得率影响顺序为超声提取多糖微波提取多糖酶提取多糖热水浸提多糖。在4种多糖中,微波提取多糖含量最高(43.17%),远高于其他3种多糖,且蛋白质含量最低(3.31%)。抗氧化试验结果表明,微波提取多糖的羟自由基清除力最高,DPPH自由基清除力和还原力与其他多糖活性相当。综合考虑提取得率、多糖含量和抗氧化活性,微波提取为最优方法。     

笋壳多糖的微波-超声波联合辅助提取工艺优化及其抗氧化活性

目的：通过微波-超声波联合辅助提取法优化笋壳多糖提取工艺,并研究其抗氧化活性。方法：考察提取时间、料液比、微波功率、超声波功率、提取次数对笋壳多糖含量的影响,在单因素试验基础上做L9（34）正交试验优化提取工艺参数,通过测定笋壳多糖清除羟自由基、超氧阴离子自由基、1,1-二苯基-2-苦基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的能力来评价其抗氧化活性,并同传统热水浸提法进行比较。结果：微波-超声波联合辅助提取最优工艺条件为提取时间30 min、料液比1∶30（g/mL）、微波功率200 W、超声波功率750 W,笋壳多糖得率为2.76%,粗多糖中多糖含量为37.63%;清除羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基的半抑制浓度分别为0.17、0.43 mg/mL和大于16 mg/mL。微波-超声波联合辅助提取法的各项指标均优于热水浸提法。结论：微波-超声波联合辅助提取笋壳多糖比传统热水浸提具有耗时短、效率高等优点,笋壳水溶性多糖具有显著体外抗氧化活性。     

槟榔芋多糖提取工艺及其抗氧化活性的研究

以多糖提取率为指标,通过对比热水浸提法与超声波辅助提取法,确定提取槟榔芋多糖的最佳工艺条件。结果表明,热水浸提法提取槟榔芋多糖的最佳条件为:提取时间为3 h,料液比为1:35,提取温度为70℃,多糖提取率为4.89%;超声波辅助提取法提取槟榔芋多糖的最佳方案为:超声温度50℃,超声功率90%,料液比1:40,提取时间45 min,多糖提取率为6.10%。超声波辅助提取法优化了多糖的提取工艺,不仅极大地缩短了提取时间,降低了能耗,也极大提高了槟榔芋多糖提取率。抗氧化活性测定结果显示,清除羟基自由基和DPPH自由基的IC_(50)分别为1.186 mg/m L和0.910 mg/m L;当槟榔芋多糖质量浓度为1.6mg/mL时,其吸光度值为0.545。说明槟榔芋多糖具有较好的抗氧化活性。     

3 种方法提取的雨声红球藻多糖的理化性质及抗氧化活性比较

以雨声红球藻（Haematococcus pluvialis）为原料,研究超声辅助酸提取、超声辅助碱提取、超声辅助水提取3 种不同提取工艺对雨声红球藻多糖提取效率和产品理化特性的影响,在此基础上对3 种多糖抗氧化活性进行比较分析。结果表明,3 种提取方法所得多糖提取率大小依次为：超声辅助碱提法（9.52%）＞超声辅助酸提法（1.50%）＞超声辅助水提法（1.29%）。傅里叶红外变换光谱分析结果表明,3 种多糖的组成单糖中均包含吡喃糖,成苷的半缩醛羟基主要为α构型,其中以酸提多糖的吸收峰最强。扫描电子显微镜证实了超声辅助碱提法对雨声红球藻细胞壁的破坏程度最大,胞内多糖溶出最多。通过对还原力、1,1-二苯基-2-苦基肼自由基清除能力和·OH清除能力等抗氧化活性的测定,表明3 种多糖均具有一定的抗氧化能力,其中以碱提多糖的综合抗氧化能力最优。由此可见,超声辅助碱提法是一种提取藻多糖较好的方法。     

金针菇多糖制备过程中体外抗氧化活性研究

采用热水浸提、乙醇沉淀、Sevage法除蛋白的方法对金针菇多糖进行提取及纯化,依次得到不同纯度的粗多糖,分别为金针菇多糖1(Flammulina velutipes polysaccharide1,FVP1)、金针菇多糖2(Flammulina velutipes polysaccharide2,FVP2)、金针菇多糖3(Flammulina velutipes polysaccharide3,FVP3),研究纯化过程中金针菇多糖的含量及抗氧化活性变化。采用苯酚硫酸法和3,5-二硝基水杨酸法(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)分别测定提取物中的总糖及还原糖含量,以总抗氧化能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力及抑制羟基自由基能力为检测指标,对纯化过程中金针菇粗多糖的抗氧化能力进行评价。结果表明:FVP1、FVP2、FVP3中多糖的含量分别为10.35%、19.48%、55.21%;得率分别为54.9%、9.26%、1.52%。以上3种不同纯度金针菇粗多糖在0.5 mg/mL~2.0 mg/mL的浓度范围内抗氧化活性能力大小依次为:抑制羟基自由基能力清除DPPH自由基能力总抗氧化能力。FVP1、FVP2、FVP3抗氧化能力均随着浓度升高而增强,抗氧化能力的大小依次为FVP1FVP2FVP3,这表明分离纯化工艺有降低金针菇多糖体外抗氧化能力的趋势。     

西红花花瓣粗多糖提取纯化工艺及体外抗氧化研究

研究西红花花瓣粗多糖的提取纯化条件及抗氧化活性。采用L9(34)正交试验设计,考察了提取温度、时间、料液比、提取次数等因素对西红花花瓣粗多糖提取效果的影响。进一步用酶法、Sevag法比较其除蛋白效果,并研究对羟自由基、DPPH自由基的清除能力。最佳提取条件为:料液比1︰50,提取温度为100℃,提取时间为3 h,提取次数为3次。酶法与Sevag法均有较好的除蛋白效果;抗氧化结果表明,西红花花瓣粗多糖对羟自由基、DPPH自由基均有一定的清除作用。最优条件下粗多糖得率达(19.346±0.029)%;酶法除蛋白效果要优于Sevag法;西红花花瓣粗多糖对两种自由基均有不同程度的清除作用。     

灵芝多糖不同提取方式的比较研究

目的 比较5种不同提取方式所得灵芝粗多糖的提取得率、理化性质、抗氧化活性, 确定最优提取方式。方法 采用热水浸提法、超声清洗辅助提取法、超声破碎提取法、微波辅助提取法、酶辅助提取法提取灵芝粗多糖, 可分别表示为H-GLP、U1-GLP、U2-GLP、M-GLP、E-GLP, 苯酚-硫酸法测定总糖含量、二硝基水杨酸(dinitrosalicylic acid, DNS)法测定还原糖含量, 比较对2,2-二(4-叔辛基苯基)-1-苦肼基自由基(DPPH?)清除活性, 羟自由基(?OH)清除活性和还原力大小, 分析抗氧化活性, 以傅里叶红外光谱仪(fourier transform infrared spectrometer, FT-IR)和高效阴离子交换色谱(high performance anion exchange chromatography, HPAEC-PAD)进行结构表征。结果 5种提取方式提取得率的大小排列顺序为: M-GLP>E-GLP>U2-GLP> H-GLP>U1-GLP, 其中M-GLP的提取得率最高为3.98%, 其多糖含量为46.80%, 还原糖含量为5.36%。5种方式提取所得粗多糖都体现出一定的抗氧化活性, M-GLP具有较强DPPH?清除活性, U2-GLP具有较强的羟自由基清除活性, 十分接近阳性对照。结论 微波辅助提取法在提取得率和抗氧化活性都优于其他提取方式, 值得进一步开发与利用。     

胡萝卜多糖硫酸酯化修饰及其抗氧化活性研究

采用水提醇沉法提取胡萝卜粗多糖,经Sevage法与木瓜蛋白酶相结合法除蛋白后,以DEAE纤维素柱层析分离纯化得到具有抗氧化活性的多糖组分。用浓硫酸法对其进行硫酸酯化修饰,经红外光谱比和硫酸钡比浊法定性定量分析多糖酯化率。研究结果表明:当硫酸取代度为18.4%,即硫酸酯化率为2.94时硫酸酯化胡萝卜多糖的抗氧化活性比未修饰多糖增加1.5倍。     

鲜品香菇柄中多糖闪式提取工艺优化及抗氧化活性研究

目的:开发香菇柄多糖的工业化生产。方法:以多糖得率为指标,采用均匀设计试验优化提取工艺,采用4种方法测定多糖抗氧化活性并与传统的热水浸提法进行比较。结果:闪式辅助热水浸提法提取香菇柄多糖最优工艺条件为闪式提取时间120 s,液料比(V_去离子水∶m_香菇柄)40∶1 (mL/g),热水浸提时间105 min,温度50℃,提取两次,此条件下多糖得率为(5.03±0.22)%,与模型预测值基本一致,是传统热水浸提法的1.82倍;香菇柄多糖具有较强的Fe³⁺还原能力、总抗氧化能力、羟自由基和DPPH自由基清除能力,且呈量效关系;闪式辅助热水浸提法所得多糖抗氧化活性强于传统热水浸提法。结论:闪式辅助热水浸提有利于香菇柄多糖提取,且能保持其抗氧化活性。     

响应面法优化平欧榛子多糖制备工艺及其体外抗氧化活性研究

为了提取平欧榛子多糖并对其进行体外抗氧化活性的研究。采用超声辅助水提法,在单因素试验的基础上,利用响应面的Box-Behnken设计对提取工艺进行优化。以蛋白脱除率和多糖损失率为指标,选择理想的脱蛋白方法,醇沉后冷冻干燥得到平欧榛子多糖。以2,2-二苯基-1-苦肼基(2,2-Diphenyl-1-pikryl-hydrazyl,DPPH)自由基清除率、抑制羟自由基(·OH~-)能力以及超氧阴离子(·O_2~-)清除率为指标,对平欧榛子多糖体外抗氧化活性进行评价,并以Vc作对照。结果表明,超声功率140 W,提取温度71℃,提取时间41 min,水料比为27:1,在此条件下平欧榛子多糖理想的最大得率为11.97%,验证结果多糖的得率为11.83%。在试验条件下,木瓜蛋白酶法最为适合,蛋白脱除率和多糖损失率分别为90.31%和5.66%。抗氧化结果表明,相同浓度下,平欧榛子多糖对于·OH~-和·O_2~-具有较强的清除能力,并与质量浓度呈一定的正相关关系,而对DPPH自由基的清除能力很弱,与多糖的质量浓度关系不显著。     

银杏外种皮多糖的提取和纯化工艺研究

考察温度、料液比、时间以及提取次数对多糖提取率的影响,确定最佳提取条件。水提醇沉得到的银杏外种皮中多糖(GBEP)含有一定的蛋白质,以多糖的损失率和蛋白质的去除率为指标,比较三种方法:三氯乙酸法、Sevage法、酶法去除GBEP中蛋白质的效率。结果表明,用酶法除蛋白时,多糖的损失率最低;Sevage法除蛋白最彻底,重复多次操作后可以得到不含蛋白质的多糖,虽然多糖损失较多,但有利于进一步的实验研究。AB-8树脂对多糖脱色率为66.35%。     

银柴胡多糖超声辅助提取工艺优化及抗氧化活性分析

目的：为了提高银柴胡多糖得率，对银柴胡多糖提取工艺参数进行优化，并评价其体外抗氧化活性。方法：采用超声辅助提取银柴胡多糖，在单因素实验基础上结合响应面法（Box–Behnken Response Surface）对提取工艺参数进行优化，并采用Sevag法除蛋白得银柴胡粗多糖，进一步对其抗氧化活性进行分析。结果：优化后银柴胡多糖最佳提取工艺参数为超声温度50℃、时间3.20 h、提取次数2次，在此条件下多糖得率最高，为28.24%±0.10%，多糖含量为59.13%；体外抗氧化测定结果显示，银柴胡粗多糖清除DPPH自由基、OH自由基、ABTS+自由基的IC50分别是5.47、2.40和1.44 mg/mL，表明其具有一定的抗氧化能力。结论：本研究经优化得到的银柴胡多糖提取工艺切实可行，可为银柴胡资源的开发利用提供理论依据。